1 拼音
shāng hán Viduō táng yì miáo
2 英文参考
Vi Polysaccharide Typhoid Vaccine[2010年版药典]
3 伤寒Vi多糖疫苗药典标准
3.1 品名
3.1.1 中文名
伤寒Vi多糖疫苗
3.1.2 汉语拼音
Shanghan Vi Duotang Yimiao
3.1.3 英文名
Vi Polysaccharide Typhoid Vaccine
3.2 定义、组成及用途
本品系用伤寒沙门菌培养液纯化的Vi多糖，经用PBS稀释制成。用于预防伤寒。
3.3 1 基本要求
生产和检定用设施、原材料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。
3.4 2 制造
3.4.1 2.1 菌种
生产用菌种应符合“生物制品生产检定用菌毒种管理规程”的有关规定。
3.4.1.1 2.1.1 名称及来源
生产用菌种为伤寒沙门菌Ty2株，CMCC 50098。
3.4.1.2 2.1.2 种子批的建立
应符合“生物制品生产检定用菌毒种管理规程”的有关规定。
3.4.1.3 2.1.3 种子批的传代
主种子批启开后传代次数不得超过5代。工作种子批启开后至接种发酵罐培养传代次数不得超过5代。
3.4.1.4 2.1.4 种子批的检定
3.4.1.4.1 2.1.4.1 培养特性
菌种接种子pH7.2～7.4的肉汤琼脂、马丁琼脂或其他适宜的培养基35～37℃培养16～20小时，应为无色半透明、边缘整齐、表面光滑湿润的圆形菌落。
3.4.1.4.2 2.1.4.2 染色镜检
应为革兰氏阴性杆菌。
3.4.1.4.3 2.1.4.3 生化反应
发酵葡萄糖、麦芽糖、甘露醇均产酸不产气；不发酵乳糖、蔗糖（2010年版药典三部附录Ⅺ V）；氧化酶试验阴性。
3.4.1.4.4 2.1.4.4 血清学试验
（1）玻片凝集试验
菌种的新鲜培养物与Vi及H-d参考血清有强凝集反应（+++以上），与O-9参考血清不产生凝集或仅有较弱凝集反应。
（2）定量凝集试验
菌种的新鲜培养物，用PBS制成6.0×108/ml的菌悬液，加入终浓度为0.5%的甲醛溶液，杀菌后的菌液（或直接用活菌菌液），与伤寒Vi参考血清做定量凝集试验；另取经100℃30分钟加热杀菌的菌液，与伤寒O参考血清做定量凝集试验。出现（+）凝集之血清最高稀释度为凝集反应效价，凝集效价应不低于参考血清原效价之半。
3.4.1.4.5 2.1.5 种子批的保存
种子批应冻干保存于8℃以下。
3.4.2 2.2 原液
3.4.2.1 2.2.1 生产用种子
启开工作种子批菌种，检定培养特性及染色镜检合格后，接种子改良半综合培养基或其他适宜培养基，制备数量适宜的生产用种子。
3.4.2.2 2.2.2 生产用培养基
采用改良半综合培养基或经批准的其他培养基。培养基不应含有与十六烷基三甲基溴化铵能形成沉淀的成分。
3.4.2.3 2.2.3 培养
采用培养罐液体培养。在培养过程中及杀菌前取样进行菌液浓度测定及纯菌试验，涂片做革兰氏染色镜检，如发现污染杂菌，应废弃。
3.4.2.4 2.2.4 收获及杀菌
培养物于对数生长期的后期或静止期的前期收获。取样进行菌液浓度测定及纯菌检查，合格后在收获的培养液中加入甲醛溶液杀菌，杀菌条件以确保杀菌完全又不损伤其多糖抗原为宜。
3.4.2.5 2.2.5 纯化
3.4.2.5.1 2.2.5.1 去核酸
将已杀菌的培养液离心后收集上清液，加入十六烷基三甲基溴化铵，充分混匀，形成沉淀；离心后的沉淀物用注射用水溶解，并加入适量氯化钠（或氯化钙）溶液，使多糖与十六烷基三甲溴化铵解离；加入乙醇至最终浓度为25%，2～8℃静置1～3小时或过夜，离心收集澄清的上清液。
3.4.2.5.2 2.2.5.2 沉淀多糖
于上述上清液中加入乙醇至最终浓度为80%，充分振摇，离心收集沉淀；沉淀物用无水乙醇及丙酮分别洗涤，沉淀物即为多糖粗制品。多糖粗制品应保存在-20℃以下，待纯化。
3.4.2.5.3 2.2.5.3 多糖纯化
将多糖粗制品溶解于1/10饱和中性醋酸钠溶液中，稀释至适宜浓度，按适当比例用冷酚（100g结晶酚溶于40ml的1/10饱和醋酸钠溶液）提取数次，离心收集上清液，并用0.1mol/L氯化钙溶液或其他适宜溶液透析或超滤；加入乙醇至最终浓度为75%～80%，离心收集的沉淀物用无水乙醇及丙酮分别洗涤，然后用灭菌注射用水溶解，除菌过滤后即为多糖原液。提取过程应尽可能在15℃以下进行。
3.4.2.6 2.2.6 原液检定
按3.1项进行。
3.4.2.7 2.2.7 保存及有效期
于-20℃以下保存。自多糖粗制品制造之日起，有效期为60个月。
3.4.3 2.3 半成品
3.4.3.1 2.3.1 配制
用无菌、无热原PBS（pH6.5～7.5）稀释原液，可加入适量防腐剂。每1次人用剂量含多糖应不低于30μg。
3.4.3.2 2.3.2 半成品检定
按3.2项进行。
3.4.4 2.4 成品
3.4.4.1 2.4.1 分批
应符合“生物制品分批规程”规定。
3.4.4.2 2.4.2 分装
应符合“生物制品分装和冻干规程”规定。
3.4.4.3 2.4.3 规格
每瓶5ml（10次人用剂量）、1ml（2次人用剂量）、0.5ml（1次人用剂量）。每1次人用剂量0.5ml，含多糖应不低于30μg。
3.4.4.4 2.4.4 包装
应符合“生物制品包装规程”规定。
3.5 3 检定
3.5.1 3.1 原液检定
3.5.1.1 3.1.1 鉴别试验
采用免疫双扩散法（2010年版药典三部附录Ⅷ C），本品与伤寒Vi血清48小时内应形成明显沉淀线，而与伤寒O血清不形成沉淀线。
3.5.1.2 3.1.2 化学检定
3.5.1.2.1 3.1.2.1 固体总量
依法测定（2010年版药典三部附录Ⅶ M）。
3.5.1.2.2 3.1.2.2 蛋白质含量
应小于10mg/g（2010年版药典三部附录Ⅵ B第二法）。
3.5.1.2.3 3.1.2.3 核酸含量
应小于20mg/g，核酸在波长260nm处的吸收系数（）为200（2010年版药典三部附录Ⅱ A）。
3.5.1.2.4 3.1.2.4 O-乙酰基含量
应不低于2.0mmol/g（2010年版药典三部附录Ⅵ F）。
3.5.1.2.5 3.1.2.5 多糖分子大小测定
多糖分子的KD值在0.25以前的洗脱液多糖回收率应在50%以上（2010年版药典三部附录Ⅷ H）。
3.5.1.3 3.1.3 无菌检查
依法检查（2010年版药典三部附录Ⅻ A），应符合规定。
3.5.2 3.2 半成品检定
3.5.2.1 无菌检查
依法检查（2010年版药典三部附录Ⅻ A），应符合规定。
3.5.3 3.3 成品检定
3.5.3.1 3.3.1 鉴别试验
按3.1.1项进行。
3.5.3.2 3.3.2 物理检查
3.5.3.2.1 3.3.2.1 外观
应为无色澄明液体，无异物。
3.5.3.2.2 3.3.2.2 装量
依法检查（2010年版药典三部附录Ⅰ A），应不低于标示量。
3.5.3.3 3.3.3 化学检定
3.5.3.3.1 3.3.3.1 pH值
应为6.5～7.5（2010年版药典三部附录Ⅴ A）。
3.5.3.3.2 3.3.3.2 防腐剂含量
如加苯酚作防腐剂，其含量应不高于3.0g/L（2010年版药典三部附录Ⅵ M）。
3.5.3.3.3 3.3.3.3 多糖含量
称取0.5～0.6g琼脂糖，加入0.05mol/L巴比妥缓冲液（pH8.6） 40ml中，加热溶胀完全，待冷却至约56℃时，加入伤寒Vi血清1ml，混匀后迅速倾倒于12cm×6cm的洁净水平玻板上，待凝胶凝固后用直径3mm的打孔器在距底边1.5cm处打孔。各孔中分别加入各稀释好的伤寒Vi抗原标准品溶液（浓度分别为：100μg/ml、50μg/ml、25μg/ml、12.5μg/ml、6.25μg/ml）和本品5μl（本品做双孔）。靠近边缘一孔中可加入10μl溴酚蓝指示液。加样后将玻板置于电泳槽上，滤纸搭桥，加样端与电泳仪负极相连。采用0.05mol/L巴比妥缓冲液（pH8.6）为电极缓冲液，8V/cm恒压电泳至指示剂迁移到前沿。取下玻板浸泡于生理氯化钠溶液1～2小时后，覆盖洁净滤纸移至培养箱中过夜烤干。用考马斯亮蓝染色液染色至火箭峰出现，用甲醇－醋酸溶液脱色至背景清晰。准确测量火箭峰高，以标准品浓度的对数和相应的峰高作直线回归，得直线回归方程，将本品的峰高均值代入直线回归方程，求出本品浓度。每1次人用剂量多糖含量应不低于30μg。
3.5.3.4 3.3.4 无菌检查
依法检查（2010年版药典三部附录Ⅻ A），应符合规定。
3.5.3.5 3.3.5 异常毒性检查
依法检查（2010年版药典三部附录Ⅻ F），应符合规定。
3.5.3.6 3.3.6 热原检查
依法检查（2010年版药典三部附录Ⅻ D），注射剂量按家兔体重每1kg注射0.025μg多糖，应符合规定。
3.6 4 保存、运输及有效期
于2～8℃避光保存和运输。自生产之日起，有效期为24个月。
3.7 5 使用说明
应符合“生物制品包装规程”规定和批准的内容。
伤寒Vi多糖疫苗使用说明
【药品名称】
通用名称：伤寒Vi多糖疫苗
英文名称：Vi Polysaccharide Typhoid Vaccine
汉语拼音：Shanghan Vi Duotang Yimiao
【成分和性状】
本品系用伤寒沙门菌培养液纯化的Vi多糖，经用PBS稀释制成。为无色澄明液体。
有效成分：伤寒沙门菌Vi多糖。
辅料：应列出全部批准的辅料成分。
【接种对象】
主要用于部队、港口、铁路沿线的工作人员，下水道、粪便、垃圾处理人员，饮食行业、医务防疫人员及水上居民或有本病流行地区的人群。
【作用与用途】
接种本疫苗后，可使机体产生体液免疫应答。用于预防伤寒。
【规格】
每瓶5ml （10次人用剂量）、1ml（2次人用剂量）、0.5ml（1次人用剂量）。每1次人用剂量0.5ml，含伤寒Vi多糖应不低于30μg。
【免疫程序和剂量】
（1）上臂外侧三角肌肌内注射。
（2）注射1针，剂量为0.5ml。
【不良反应】
常见不良反应：
可出现短暂低热，局部稍有压痛感，一般可自行缓解，不需特殊处理。
极罕见不良反应：
过敏性皮疹：一般接种疫苗后72小时内出现，应及时就诊。
【禁忌】
（1）已知对该疫苗的任何成分过敏者。
（2）患急性疾病、严重慢性疾病、慢性疾病的急性发作期和发热者。
（3）妊娠期妇女。
【注意事项】
（1）以下情况者慎用：家族和个人有惊厥史者、患慢性疾病者、有癫痫史者、过敏体质者、哺乳期妇女。
（2）用前摇匀。如出现摇不散的凝块、异物、疫苗瓶有裂纹或标签不清者，均不得使用。
（3）疫苗开启后应立即使用，如需放置，应置2～8℃，并于1小时内用完，剩余均应废弃。
（4）应备有肾上腺素等药物，以备偶有发生严重过敏反应时急救用。接受注射者在注射后应在现场观察至少30分钟。
（5）严禁冻结。
【贮藏】
于2～8℃避光保存和运输。
【包装】
【有效期】
24个月。
【执行标准】
【批准文号】
【生产企业】
企业名称：
生产地址：
邮政编码：
电话号码：
传真号码：
网 址：
3.8 版本
《中华人民共和国药典》2010年版