ABO系HDN检测

目录

1 拼音

ABO xì HDN jiǎn cè

2 注解

ABO系HDN是由于母婴ABO血型不合,母体的IgG抗A或抗B或抗A、B抗体经过胎盘进入胎儿血循环破坏胎儿红细胞所引起。此病多见于O型母亲所生的A型或B型婴儿,这与O型母亲体内本身就含有IgG抗A(B)抗体有关。诊断ABO系HDN最有力证据,是证实患儿红细胞被来自母亲的IgG抗A(B)所致敏。

3 操作名称

ABO系HDN检测

4 用品及准备

抗人球蛋白试剂,1%菠萝酶或木瓜酶、乙醚、患儿血样本、56℃水浴箱,其他材料同 ABO血型鉴定。

5 方法及内容

1. 血样本的预处理

(1) 抽患儿血样3~5ml,3000r/min离心3min,分离出血清。

(2) 将血块捣碎成游离红细胞后,用生理盐水洗涤3次,得压积红细胞。

(3) 取1滴压积红细胞,加19滴生理盐水配成约5%红细胞悬液。

2.ABO血型鉴定。同ABO血型鉴定之试管法。

3.患儿红细胞作直接抗人球蛋白试验。同抗人球蛋白直接试验。

4.患儿红细胞作抗体放散试验。ABO血型相合,作乙醚放散试验;ABO血型不合,作加热放散试验。

(1) 将患儿红细胞用生理盐水洗涤3次后,弃去上清液,得压积红细胞。

(2) 取压积红细胞1份,加等量生理盐水。

(3) 置56℃水浴箱加热放散,振摇7min。

(4) 立即以3000r/min离心5min(离心时为保持放散时的温度,应将离心管预先加温至56℃及管内加入56℃水,并以56℃水作平衡水)。

(5) 取出上清液分成3等份于标有Ac (A细胞)、Bc、Oc的小试管中。

(6) 每小试管中再加入相应的经酶处理的5%红细胞悬液1滴,置37℃水浴箱温育15min。

(7) 取出用生理盐水洗涤3次后,在各管中加入抗人球蛋白血清1滴,以3000r/min离心15s,观察结果。

放散液与指示红细胞反应结果

指示红细胞意义
AcBcOc
+-- -+- ++- 00+ ---放散出抗A抗体放散出抗B抗体放散出抗A(B)抗体可能包括抗A、B 放散出ABO血型以外的抗体未放散出抗体

注:①间接抗人球蛋白试验法:甚为敏感,即使是直接抗人球蛋白试验阴性的患儿,一旦抗体放散试验出现阳性结果,即可明确诊断。②Oc“—”尚不能排除放散出ABO血型以外的抗体。

有时在放散试验的结果观察中,会遇到一种交叉反应性抗A、B抗体,它针对特异性是A和B抗原所共有的,因而它能凝集A型和B型红细胞,抗A、B同样可引起ABO系HDN。

5.游离抗体试验  患儿血清中的IgG抗A(B)抗体来自母亲,如果患儿血清中发现存在与其红细胞不配合的IgG抗A(B)或抗A、B抗体时,应将其血清与Ac、Bc、Oc作间接抗人球蛋白试验加以证实:

(1)取小试管3支,分别标明Ac、Bc、Oc。

(2)在上述各管中,分别加入患儿血清1滴,再加入相应5%红细胞悬液各1滴。

(3)37℃孵育30min。

(4)取出用生理盐水洗涤3次后,在各管中加入抗人球蛋白血清1滴。

(5)以3000r/min离心15s,肉眼看结果。

患儿血清与指示红细胞在抗人球

蛋白介质中反应结果

指示红细胞意义
AcBcOc
+-- -+- ++- 00+ ---游离的抗A抗体游离的抗B抗体游离的抗A(B)抗体或抗A、B 游离的ABO血型以外的抗体未游离抗体

注:Oc“—”尚不能排除ABO血型以外抗体的存在。

(6)测血清胆红素、血红蛋白等,在HDN的胆红素检查时,应注意选择适当的测定方法,采用Lathe—Ruthren改良法,较适合于患儿高胆红素血症的检查。

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