亮氨酸氨基肽酶

目录

1 拼音

liàng ān suān ān jī tài méi

2 英文参考

Leucine aminopeptidase

3 概述

亮氨酸氨基转肽酶广泛存在于人体各种组织中,以肝、胰、胆、小肠、子宫、肌肉最丰富,在十二指肠、血清与尿中也有分布。临床上测定血清亮氨酸氨基转肽酶主要对肝胆疾病的诊断与治疗的评价有一定的意义。

4 别名

LAP

5 亮氨酸氨基肽酶的医学检查

5.1 检查名称

亮氨酸氨基肽酶

5.2 分类

血液生化检查 > 酶类测定

5.3 亮氨酸氨基肽酶的测定原理

(1)二甲氨基苯甲醛显色法:样品中的亮氨酸氨基肽酶作用于L-亮氨酸-β-萘胺,水解产物β-萘胺与二甲氨基苯甲醛反应形成偶氮化合物,根据β-萘胺的生成量推算此酶的活性。

(2)连续监测法:样品中的酶水解亮氨酸对硝基苯胺,可在405nm处取得吸光度,根据其摩尔吸光系数和吸光度再求得此酶活力单位。

5.4 试剂

(1)二甲氨基苯甲醛显色法:

①基质缓冲液(pH6.5):称取磷酸二氢钾0.681g,溶于40ml蒸馏水中,加入L-亮氨酸-β萘胺40mg,溶解后再加MgCl2100mg,用1mol/L NaOH调pH至6.5(约1.5ml),加蒸馏水至50ml,冰箱可保存4周。

②40g/L对位二甲氨基苯甲醛乙醇溶液:称对位二甲氨基苯甲醛8g溶于70%乙醇中,最后用70%乙醇加至200ml。

③显色剂:按需要取40g/L对位二甲氨基苯甲醛乙醇液若干ml,再加等量0.45mol/L HCl,置棕色瓶室温保存约两周。

④β-萘胺标准液(150μmol/L):准确称取β-苯胺盐酸盐(AR)13.5mg,溶于蒸馏水中,然后加至1L(临用前配制)。

(2)连续监测法:

①20mmol/L磷酸盐缓冲液(pH7.2):称取磷酸氢二钠2.04g和磷酸二氢钾0.77g溶于800ml蒸馏水中,用1mol/L NaOH或1mol/L HCl调pH至7.2,最后加蒸馏水至1L。冰箱可保存1年。

②基质溶液:称取亮氨酸对硝基苯胺63mg于甲醇10ml中。置棕色瓶内。冰箱中能保存六个月。

5.5 操作方法

(1)二甲氨基苯甲醛显色法:按表1操作。

用445nm波长,以对照管调零,读取测定管吸光度,查标准曲线即可求取酶活力单位。

(2)连续监测法:在一光径1cm比色杯中加入3.0ml pH7.2磷酸盐缓冲液,加入基质溶液0.1ml,再加预温至30℃血清0.1ml,混匀,立即输入仪器,于405nm处连续测吸光度,求△A/min。

5.6 正常值

(1)二甲氨基苯甲醛显色法:27~50u/L。

(2)连续监测法:11~30IU/L血清。

(3)酶速率法(37℃): 血清:男:18.3~36.7U/L 女:16.3~29.2U/L 尿: 男:3.84~9.24U/g?Cr 女:2.82~5.3U/g?Cr

5.7 化验结果临床意义

升高:胆管癌、胰腺癌、或者胆结石等引起肝外性阻塞、药物性肝损害、病毒性肝炎、肝内胆汁瘀滞、急性肝炎、恶性淋巴瘤、淋巴肉瘤、妊娠、无黄疸的肝转移癌等。

此酶广泛分布于人体各组织,以肝、胰、胆、肾、小肠以及子宫肌层内含量最多。胰腺癌时此酶活力升高,阳性率达100%,此酶活力正常时可否定胰腺癌,但肝胆疾病时此酶活力也可升高。因此该酶临床应用价值相似于ALP,但骨癌时此酶活力正常。

此外,正常妊娠2个月后该酶活力逐渐上升至分娩后下降,在判定结果时应注意此点。

5.8 附注

二甲氨基苯甲醛显色法:

(1)酶活力超过400u/L时,将标本稀释后再测。

(2)由本法所得Km为8.8×10-2mmol/L,本法酶反应液中底物浓度为1.28mmol/L,约为Km值的15倍。

5.9 相关疾病

胰腺癌,骨癌

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