低分子量肝素钠_拼音、药品标准、效价测定

1 拼音

dī fèn zǐ liàng gān sù nà

2 药品标准

2.1 正式名

低分子量肝素钠

2.2 汉语拼音

2.3 标准号

WS-090(X-087)-99

2.4 拉丁文或英文

Low-molecular-weight Heparins Sodium

2.5 主要活性成分

低分子量肝素钠是一种硫酸氨基葡聚糖的钠盐，

2.6 性状

本品为白色或类白色粉末；有引湿性。

本品在水中易溶。

2.7 鉴别

（1）取本品，照效价测定项下测定，抗Xa因子活性与抗Ⅱa因子活性比应不小于1.5。

（2）本品的水溶液显钠盐的鉴别反应（中国药典1995年版二部附录Ⅲ）。

2.8 检查

酸碱度取本品0.10g，加水10ml溶解，依法测定（中国药典1995年版二部附录Ⅵ H），pH值应为5.5～8.0。

溶液的澄清度和颜色取本品加水溶解制成每1ml含0.15g的溶液，溶液应澄清无色，如显色，与黄色１号标准比色液（中国药典1995年版二部附录Ⅸ A第一法）比较，不得更深。

中华人民共和国国家药品监督管理局　发布　江苏省药品检验所　审核

国家药品监督管理局药品评审委员会　审订　南京南大药业有限责任公司提出

本标准自1999年9月7日起试行，试行期2年。

保护期至2001年6月28日，保护期内，其它单位不得仿制。

总氮量取本品，照定氮测定法（中国药典1995年版二部附录Ⅶ D第二法）测定，按干燥品计算，含总氮量应为1.５～2.5％。

干燥失重取本品1g，精密称定，置五氧化二磷干燥器中60℃减压干燥至３小时，减失重量不得过10.0％（中国药典1995年版二部附录Ⅷ L）。

重金属取本品0.5g，依法检查（中国药典1995年版二部附录Ⅷ H 第二法），含重金属不得过百万分之十。

硫酸离子和羧酸离子摩尔比取本品约0.1g，精密称定，加20ml重蒸馏水溶解后冷至4℃，取2ml溶液过预先冷至４℃的阳离子交换柱（10cm×1cm），柱床用重蒸馏水冲洗，收集流出液约10～15ml，在磁力搅拌下，测定收集液的电导值，并用氢氧化钠滴定液（0.05mol/L）滴定，每滴加约50μl精确记录收集液的电导值和滴定液消耗量直至滴定终点。以每次滴定液消耗的毫摩尔数为横坐标，相应的电导值为纵坐标作图，该图由三个近似线性的部分组成，分别对各部分作直线，第一和第二条直线交点的横坐标值即为氢氧化钠中和硫酸离子的毫摩尔数(M１），第二和第三条直线交点的横坐标值即为滴定液中和硫酸离子和羧酸离子总毫摩尔数（M２）。按下式求出硫酸离子和羧酸离子的摩尔比（r）应不小于1.8。

r ＝ M1 / （M2-M1）。

异常毒性　取本品，加氯化钠注射液制成每1ml含400AXaIU的溶液，依法检查（中国药典1995年版二部附录XI C），按皮下注射法给药。

热原取本品，加氯化钠注射液制成每1ml含1000AXaIU的溶液，依法检查（中国药典1995年版二部附录XI D），剂量按家兔每1kg注射１ml，应符合规定。

分子量测定照高效液相色谱法（中国药典1995年版二部附录Ⅴ D）测定。

色谱条件与系统适用性试验以微孔硅胶（５μm）为填充剂，理论塔板数应不低于20000／米，其蛋白质的分离范围为15000至100000。以1.0mol/L硫酸溶液调0.2mol/L硫酸钠溶液pH至5.0作为流动相，流动相的流速为0.5ml/min；将紫外检测器和示差检测器按顺序串联使用，紫外检测器的检测波长为234nm，示差检测器接紫外检测器输出端。

测定法　称取低分子量肝素钠分子量标准品适量，加流动相配制成每1ml含10mg的溶液，量取25μl注入液相色谱仪，记录示差和紫外图谱，按下述方法计算：

分子量校正因子（f）在相关范围内，计算UV234曲线下的总面积（∑UV234 ）和RI曲线下的总面积（∑RI）。按下式计算RI响应和UV234 响应面积的比值r：

r = ∑RI / ∑UV234

因子f与r相乘等于Mna （Mna为校准用标准品的已知数均分子量），因子f：

f = Mna / r

UV234 和RI响应值相关联时，按下式计算，得到任意点的分子量M ：

M = fRI / UV234

供试品溶液的制备和测定　称取低分子量肝素钠样品适量，加流动相溶解制成每1ml含10mg的溶液，取25μl注入液相色谱仪，记录示差图谱，按下式计算重均分子量（Mw）

Mw = ∑（RIiMi） / ∑RIi

其中，RIi = 在第i部分中被洗脱物质的量（重量）。

Mi = 第i部分中相应的分子量。

另外，根据下式可以计算出分子量小于8000部分的百分比率（P）：

其中，　　　指分子量小于8000（Mi<>

指所有RI总和。

3 效价测定

抗Xa因子活性测定

（1）对照品溶液的制备　取低分子量肝素钠对照品用三羟甲基氨基甲烷－氯化钠缓冲液（pH7.4）溶解并稀释成4种一定浓度梯度的溶液（S1 、S2 、S3、S4 ），浓度范围为0.025～0.2AXaIU/ml。

（2）供试品溶液的制备　取本品适量，按估计效价照对照品溶液的稀释方法制成4种同样浓度梯度的溶液（T1 、T2 、T3、T4 ）。

（3）测定法取16支试管加抗凝血酶ⅢR2 溶液50μl，再分别加入不同浓度的供试品（或对照品）溶液50μl（每种浓度两支），轻轻摇匀勿产生气泡。然后按S1、S2、S3、S4、T1、T2、T3、T4、T1、T2、T3、T4、S1、S2、S3、S4 的顺序置37℃水浴保温1分钟，加入牛血Xa因子溶液100μl，迅速混匀，在水浴中精确保温1分钟，加入发色底物R1溶液250μl，精确反应4分钟，加醋酸375μl终止反应，以三羟甲基氨基甲烷－氯化钠缓冲液（pH7.4）作为空白对照，在波长405nm处测定吸收度，以溶液吸收度和浓度的对数，照生物检定统计法（中国药典1995年版二部附录XI V）中的量反应平行线测定法计算出供试品的抗Xa因子活性，可信限率（FL％）不得大于10％。

抗Ⅱa因子活性测定（1）对照品溶液的制备　取低分子量肝素钠对照品用三羟甲基氨基甲烷－氯化钠缓冲液（pH7.4）溶解稀释成4种一定浓度梯度的溶液（S1、S2、S3、S4 ），浓度范围为0.015～0.075AⅡaIU/ml。

（2）供试品溶液的制备　取本品适量，按估计效价照对照品溶液的稀释方法制成4种同样浓度梯度的溶液（T1、T2、T3、T4 ）。

（3）测定法取16支试管加抗凝血酶ⅢR2 溶液50μl，再分别加入不同浓度的供试品（或对照品）溶液50μl（每种浓度两支），轻轻摇匀勿产生气泡。然后按S1、S2、S3、S4、T1、T2、T3、T4、T1、T2、T3、T4、S1、S2、S3、S4 的顺序置37℃水浴保温1分钟，加入凝血酶溶液100μl，迅速混匀，在水浴中精确保温1分钟，加入发色底物R2溶液250μl，精确反应4分钟，加醋酸375μl终止反应，以三羟甲基氨基甲烷－氯化钠缓冲液（pH 7.4）作为空白对照，在波长405nm处测定吸收度，以溶液吸收度和浓度的对数，照生物检定统计法（中国药典1995年版二部附录XI V）中量反应平行线测定法计算抗Ⅱa因子活性，可信限率（FL％）不得大于10％。

3.1 含量测定

3.2 作用与用途

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3.3 用法与用量

3.4 注意

俊?．对本品过敏者，急性细菌性心内膜炎，血小板减少症禁用。本品与非甾体抗炎药、水杨酸类药、口服抗凝药、影响血小板功能的药物和血浆增容剂（右旋糖酐）等药物同时使用时，应注意观察，因这些药物能增加出血危险性。

2．不能用于肌肉注射。

3．下列情况慎用：（1）有过敏史者。（2）有出血倾向及凝血机制障碍者包括胃及十二指肠溃疡、中风、严重肝肾疾病、严重高血压、视网膜血管性病变。（3）妊娠妇女等。

4．出现过量情况时，可用注射盐酸鱼精蛋白或硫酸鱼精蛋白中和本品，1IU盐酸鱼精蛋白中和1.6AXaIU本品。

5．治疗期间，注意定期血小板计数及抗Xa因子活性测定。

3.5 剂量

俊?．血透时预防血凝块形成　　每次透析开始时，应从血管通道注入5000AXaIU本品，透析中不再增加剂量或遵医嘱。

2．预防深部静脉血栓形成。手术前1～2小时，皮下注射2500AXaIU，手术后每天皮下注射2500AXaIU，术后连续用药5天。腹壁皮下注射或遵医嘱。

3.6 标示量

其分子量小于8000的部分应不低于60％。按干燥品计算，每1mg低分子量肝素钠含抗Xa因子活性不得少于70AXaIU，抗Xa因子活性与抗Ⅱa因子活性比应不小于1.5

3.7 类别

3.8 制剂

俊?．血透时预防血凝块形成　　每次透析开始时，应从血管通道注入5000AXaIU本品，透析中不再增加剂量或遵医嘱。　　2．预防深部静脉血栓形成。手术前1～2小时，皮下注射2500AXaIU，手术后每天皮下注射2500AXaIU，术后连续用药5天。腹壁皮下注射或遵医嘱。