1 拼音
Gm 、Km yīn zǐ jiàn dìng
2 注解
3 操作名称
Gm、Km因子鉴定
4 用品及准备
试管，抗D血清，O型R1R2红细胞，96孔V型反应板，磷酸盐缓冲液。
5 方法及内容
1．制备致敏红细胞
(1)取12mm×75mm试管1只，加入已知Gm或Km因子的抗D血清。
(2)再向试管中加入新鲜O型R1R2红细胞1份。
(3)混匀37℃温育1h。
(4)红细胞洗涤3次，配成2％浓度的红细胞悬液待用。
2．抗Gm、Km抗体的标定
(1)取96孔V型微量板1块，向每孔中加磷酸盐缓冲液25μl。
(2)抗Gm、Km抗体作倍量稀释。
(3)向每孔中加入0.5％的致敏红细胞25μl，振荡混匀30s。
(4)室温下反应10～15min。
3．血凝抑制反应，检定Gm、Km因子
(1)取待检血清离心。
(2)96孔V型微量板每孔中加磷酸盐缓冲液25μl。
(3)将待测样本用稀释管从1：1倍比稀释至成1：32，共稀释2排。
(4)第1排在1：16，1：32孔中加入最佳稀释度的抗Gm、Km抗血清25μl。
(5)第2排为阴性对照，各孔加入磷酸盐缓冲液25μl。
(6)振荡混匀30s，中和10～15min
(7)每孔加入2％致敏的红细胞悬液25μl。
(8)2000r/min离心5min。
(9)将微量板倾斜呈45°，5min后观察结果。
6 结果判读
无拖尾现象为阳性，表示无相应Gm、Km因子；有拖尾现象为阴性，表示有相应Gm、Km因子。