1 概述
5＇-核苷酸酶（5＇-NT）是一种对底物特异性不高的水解酶，可作用于多种核苷酸。此酶广泛存在于人体组织，如肝、胆、肠、脑、心、胰等。定位于细胞质膜上，在肝内此酶主要存在于胆小管和窦状隙膜内。5＇-NT测定主要是比色法，操作麻烦，难以自动化，但试剂易得，适用于基层单位应用。
2 别名
5＇-NT
3 5＇-核苷酸酶的医学检查
3.1 检查名称
5＇-核苷酸酶
3.2 分类
血液生化检查 > 酶类测定
3.3 5＇-核苷酸酶的测定原理
5＇-核苷酸酶比色法：5＇-NT作用于5＇-磷酸腺嘌呤单核苷酸（5＇-AMP），生成腺嘌呤核苷和磷酸，利用测无机磷的方法使其显色，颜色深浅与5＇-NT活性呈正相关。
3.4 试剂
（1）0.04mol/L巴比妥缓冲液（pH 7.5）：称取巴比妥钠8.25g，溶于0.2mol/L HCl 140ml，调pH至7.5（37℃），加蒸馏水稀释至1000ml。
（2）10mmol/L AMP基质液：精称5＇-AMP 347mg，加0.1mol/L NaOH 18ml，加蒸馏水至100ml，置冰箱保存。
（3）0.1mol/L氯化镍溶液：称取氯化镍（NiCl·6H2O）4.75g，用蒸馏水溶解并稀释至200ml。
（4）0.02mol/L硫酸锰溶液：称取MnSO4·H2O 338mg，用蒸馏水溶解并稀释至100ml。
（5）100g/L三氯醋酸。
（6）2.4mol/L醋酸盐缓冲液（pH4.0）：称取硫酸铜（CuSO4·5H2O）2.5g，醋酸钠（CH3COONa·3H2O）46g，加2mol/L醋酸（冰醋酸115ml，以蒸馏水稀释至1L）至1000ml，用结晶醋酸钠或冰醋酸调pH至4.0。
（7）50g/L钼酸铵溶液：称取5g钼酸铵[（NH4）6Mo7O24·4H2O]溶于蒸馏水并稀释至100ml。
（8）还原剂：称米吐尔（硫酸对甲基氨基酚AR）2g，溶于80ml蒸馏水中，加亚硫酸钠（Na2SO3·7H2O）10g（或无水亚硫酸钠5g），加蒸馏水至100ml，过滤后置棕色瓶内冰箱保存，如变为棕色且有沉淀，则还原性降低，应重配。
（9）磷标准贮存液（6mmol/L）：精称KH2PO40.408g，用蒸馏水溶解并稀释至500ml，加氯仿数滴防腐。
（10）磷标准应用液（0.06mmol/L）：取磷标准贮存液1ml，加100g/L三氯醋酸溶溶液至100ml，4℃冰箱可稳定4周。
3.5 操作方法
按表1操作。
混合后5min，用680nm波长比色，以蒸馏水调零，读取各管吸光度。
3.6 正常值
2～17U/L。
3.7 化验结果临床意义
5＇-NT测定主要用于肝胆系统疾病的诊断和骨骼疾病的鉴别诊断。血清5＇-NT活性升高主要见于肝胆系统疾病，如阻塞性黄疸、肝癌、肝炎等，其活性变化与ALP一致。但骨骼系统疾病，如肿瘤转移、畸形性骨炎、佝偻病、甲状旁腺功能亢进等，通常ALP活性升高，而5＇-NT正常。因此ALP和5＇-NT同时测定有助于肝胆和骨骼系统疾病的鉴别诊断。
3.8 附注
（1）用血浆测定可引起混浊，与金属离子螯合的抗凝剂会干扰镁的激活作用。
（2）米吐尔也可以用1-氨基-2-萘酚-4-磺酸代替。
（3）本法酶促反应也可用30min，其计算结果时的系数应改为20。
3.9 相关疾病
黄疸、畸形性骨炎