直接胆红素

目录

1 拼音

zhí jiē dǎn hóng sù

2 英文参考

DBIL

3 检查名称

直接胆红素

4 分类

血液生化检查/色素测定

5 别名

DBIL

6 概述

血清中的胆红素大部分来源于衰老红细胞被破坏后产生出来的血红蛋白衍化而成,在肝内经过葡萄糖醛酸化的叫做直接胆红素。直接胆红素又称结合胆红素。未结合胆红素在肝细胞内转化,与葡糖醛酸结合形成结合胆红素,结合胆红素用凡登伯定性试验呈直接反应,故将这种胆红素称为直接胆红素。胆红素在肝细胞内经结合转化后,从脂溶性转变成水溶性,因而不易透过生物膜,这样既具有解毒作用,又利用胆红素从胆道中排泄。测定直接胆红素主要用于鉴别黄疸的类型。结合胆红素的升高,说明经肝细胞处理和处理后胆红素从胆道的排泄发生障碍。

7 原理

血清中结合胆红素可直接与重氮试剂反应,产生偶氮胆红素;在同样条件下,游离胆红素需有加速剂使胆红素氢键破坏后与重氮试剂反应。咖啡因、苯甲酸钠为加速剂,醋酸钠维持pH同时兼有加速作用。抗坏血酸(或叠氮钠)破坏剩余重氮反应,终止结合胆红素测定管的偶氮反应,防止游离胆红素的缓慢反应。加入碱性酒石酸钠使最大吸光度由530nm转移到598nm,非胆红素的黄色色素及其他红与棕色色素产生的吸光度降至可略而不计,使灵敏度和特异性增加。最后形成的绿色是由蓝色的碱性偶氮胆红素和咖啡因与对氨基苯磺酸之间形成的黄色色素混合而成。

8 试剂

①咖啡因-苯甲酸钠试剂:称取无水醋酸钠41.0g(或CH3COONa·3H2O 63.0g),苯甲酸钠38.0g,乙二胺四乙酸二钠(EDT-ANa2)0.5g,溶于约500ml蒸馏水中,再加入咖啡因25.0g,搅拌使溶解(加入咖啡因后不能加热溶解),用蒸馏水补足至1000ml,混匀。用滤纸过滤,置棕色瓶,室温保存。

②碱性酒石酸钠溶液:称取氢氧化钠75.0g,酒石酸钠(Na2C4H4O6·H2O)263.0g,用蒸馏水溶解并补足至1000ml,混匀。置塑料瓶中,室温保存。

③5.0g/L亚硝酸钠溶液:称取亚硝酸钠(NaNO2)5.0g,用蒸馏水溶解并稀释到100ml,混匀,置棕色瓶中,冰箱保存,稳定不少于3个月。作10倍稀释成0.5g/L,贮冰箱稳定不少于2周。

④5.0g/L对氨基笨磺酸溶液:称取对氨基苯磺酸(NH2C6H4SO3H·H2O)5.0g/L,溶于800ml蒸馏水中,加入浓盐酸15ml,用蒸馏水补足至1000ml。

⑤重氮试剂:临用前取5.0g/L亚硝酸钠溶液0.5ml和5.0g/L对氨基苯磺酸溶液20ml混合。

⑥5.0g/L叠氮钠溶液:称取叠氮钠0.5g,以蒸馏水溶解并稀释至100ml。

⑦胆红素标准液

A.一般用游离(非结合)胆红素配制标准液,因此配制标准液的稀释剂需含白蛋白。可用牛血清白蛋白(40g/L)或人血清代替人血清白蛋白。后者方法如下:收集无溶血、无黄疸、无脂浊的新鲜血清,混合,必要时可用滤菌器过滤。取过滤后的血清1ml,加入24ml新鲜生理盐水,混合。在414nm波长,1cm光径,以生理盐水调零点,其吸光度应小于0.100;在460nm的吸光度应小于0.04。

B.配制标准液的胆红素须符合下列标准:纯胆红素的氯仿溶液,在25℃条件下,光径10±0.01mm,波长453mm,摩尔吸光系数应在60700±1600范围内;改良J-G法偶氮胆红素的摩尔吸光系数应在74380±866。

C.胆红素贮存标准液,171μmol/L(10mg/dl):准确称取符合要求的胆红素10mg,加入1ml二甲亚砜,用玻璃棒搅拌,使成混悬液。加入0.05mol/L碳酸钠溶液2ml,使胆红素完全溶解,移入100ml容量瓶中,以稀释用血清洗涤数次并入容量瓶中,缓慢加入0.1mol/L盐酸2ml,边加边摇(勿用力,以免产生气泡)。最后以稀释用血清补足至100ml。配制过程中应尽量避光,贮存容器用黑纸包裹。置4℃冰箱3天内有效,但要求配后尽快作标准曲线。

9 操作方法

按表1操作。

充分混匀后,波长600nm,对照管调零,读取各管吸光度;或用蒸馏水调零,读取测定管及对照管吸光度,用测定管吸光度与对照管吸光度之差(AU-AC),在标准曲线上查出相应的胆红素浓度。

10 正常值

0~6.84μmol/L。

11 化验结果临床意义

升高:见于肝细胞性黄疸、阻塞性黄疸、新生儿高胆红素血症、转子(rotor)综合征、慢性活动性肝炎、肝硬化、败血症、恶性疟疾、大面积烧伤和甲状腺功能低下等。

以直接胆红素升高为主常见于原发性胆汁型肝硬化、胆道梗阻等。肝炎与肝硬化病人的直接胆红素都可以升高。

病便参考:胆红素总量增高、直接胆红素增高时,可疑为肝内及肝外阻塞性黄疸,胰头癌,毛细胆管型肝炎及其他胆汁瘀滞综合征等。

12 附注

(1)样本要求:宜用血清标本,避免样品光照和溶血,溶血对测定有干扰。

(2)生理性波动:日间变异40%。标本储存直接受到光线照射引起降低。

(3)药物影响:引起肝损害或溶血的药物。

13 相关疾病

黄疸

肝硬化

败血症

疟疾

烧伤

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