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载脂蛋白B

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1 拼音

zǎi zhī dàn bái B

2 英文参考

APOB

apolipoprotein B

3 概述

载脂蛋白是血浆脂蛋白部分,各类脂蛋白中均含有一种或几种不同特异性载脂蛋白。目前已经发现的载脂蛋白有20余种。ApoB是其中的一种。

4 载脂蛋白B的别名

APOB

5 载脂蛋白B医学检查

5.1 检查名称

载脂蛋白B

5.2 分类

血液生化检查/脂类测定

5.3 化验取材

血液

5.4 原理

载脂蛋白B的原理是抗原抗体按一定比例反应时,在溶液内生成细小颗粒的抗原抗体复合物均匀分散在溶液介质内。当光线通过这一浑浊液时,浑浊液内的颗粒能吸收光线,光线被吸收的量与浑浊颗粒的量呈正比,血清ApoA1或ApoB与相应的抗体结合,在一定条件下形成不溶性免疫复合物,使溶液浑浊,即浊度与吸光度成正比。

5.5 试剂

(1)巴比妥缓冲液离子强度0.05,pH8.6。

(2)10g/L琼脂糖(标准电内渗)用巴比妥缓冲液配制,加热溶化,混合后,分装10ml/管,冷后4℃贮存。

(3)0.15mol/L NaCl溶液。

(4)兔(或羊)抗人apoA Ⅰ抗血清效价不低于1∶16)及apoB抗血清(效价不低于1∶32)。

(5)校准血清(同比浊法)。

(6)染色液:考马斯亮蓝R-250 0.25g溶于甲醇45ml中,加入冰醋酸10ml及水45ml,混合,溶后备用。

(7)脱色液:每升含冰醋酸50ml及甘油100ml。

5.6 操作方法

(1)浇板:每板用10g/L琼脂糖10ml,沸水浴中融化,混匀,冷至50~55℃时加入apoA Ⅰ抗血清50μl,apoB抗血清8μl(用量视抗血清效价而定),迅速混匀后倒在预置在水平台上的玻璃板上,冷后放在4℃,20min后打孔,孔在板的阴极端,孔径3mm,孔间距至少5mm,孔容量5μl。把板放入电泳槽,用

滤纸搭桥

(2)稀释抗原:用0.15mol/L NaCl液将校准血清稀释成1∶100,1∶150,1∶200,1∶300,及1∶400(作校准曲线之用),血清标本按1∶200稀释,放4℃冰箱不得超过3天。

(3)加样:在低电流状态(10mA/板)将稀释好的定值血清及标本分别吸取5μl(准确),加入琼脂糖凝胶加样孔内。每板都要做一系列标准。

(4)通电:稳流24mA/板,端电压6~8V/cm,以流水冷却使琼脂糖保持15℃,电泳3~4h。

(5)脱杂蛋白及制干胶膜:电泳后的琼脂糖板浸泡在0.15mol/L NaCl中30min,将胶膜托置于聚酯薄膜上,用多层滤纸在轻轻加压下吸干胶内水分然后将滤纸、胶膜与聚酯膜三者一起自然干燥,或用热吹风器吹干,干后胶膜会自然与滤纸及聚酯膜分开。

(6)染色:将琼脂糖胶膜平铺浸泡于染色液内20~30min。

(7)脱色:用脱色液浸泡已染色的胶膜至火箭峰清晰,背景基本无色。可在水中用两片玻璃纸将胶膜夹住,晾干后可长期保存。也可以用流水浸泡脱色至背景干净。

5.7 正常值

ApoA1:1.00~1.50g/L;ApoB:0.50~1.10g/L。

5.8 化验结果临床意义

ApoA1水平与高脂血症冠心病呈负相关。ApoB水平与高脂血症及动脉硬化性疾病呈正相关。

5.9 附注

(1)购买效价高、单价特异的ApoA1、ApoB抗血清。

(2)为了准确测定ApoA1、ApoB,必须做标准曲线。

(3)免疫透射比浊应以多点定标。按曲线回归运算。

5.10 相关疾病

高脂血症

血浆脂蛋白

相关文献

开放分类:血液生化检查脂类测定化验及医学检查
词条载脂蛋白Bababab创建,由sun进行审核
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  • 评论总管
    2020/10/26 7:17:16 | #0
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本页最后修订于 2013年2月21日 星期四 11:38:49 (GMT+08:00)
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