衣原体检查法

目录

1 拼音

yī yuán tǐ jiǎn chá fǎ

2 名称

衣原体检查法

3 适应证

衣原体检查法适用于非淋球菌感染者。

4 禁忌证

无特殊禁忌。

5 准备

采集待检的标本。

6 方法

6.1 1.直接涂片染色法

(1)用灭菌生理盐水洗净尿道口。戴消毒手套后,用手指由阴茎根部向尿道口方向挤出脓液,用接种环或棉拭子蘸取脓液,轻轻涂于载玻片上。

(2)标本涂片,自然干燥后甲醛固定10~15min。

(3)当日配制的姬姆萨溶液染色1h。

(4)再用95%乙醇溶液淋洗涂片,干燥。

(5)油镜下阳性标本中可在上皮细胞内找到1~3个或更多呈蓝色、深蓝色或暗紫色的包涵体。

6.2 2.衣原体抗原检测法

(1)取材。

①男性患者从尿道取材时,可用细小棉拭子伸入尿道2~4cm,轻轻转动后取出分泌物(应略带黏膜)。

②女性患者取材时,先用阴道窥器暴露宫颈口,用无菌棉拭子拭去宫颈口表面的分泌物,另取一棉拭子插入宫颈口内1~2cm,转动并停留10~20s取出。

③直肠取材时,应将棉拭子插入肛门2~3cm。

④检查衣原体性咽炎时,应从扁桃体及扁桃体窝取材。

⑤对青春期前女童可采集阴道处分泌物标本。

(2)用商品试剂盒检测,检测前先将试剂盒和测试卡等室温下复温30min。

(3)加试剂至塑料管刻度处(约0.6ml),将拭子标本浸入管内摇匀,置80℃水浴,10~20min取出,转动拭子并沿管壁挤压,弃去拭子,提取液置室温冷却后盖上管盖。

(4)将测试卡置台面,加入5滴提取液于检体窗,静置30min后观察结果。

(5)质控窗和结果窗均显示一条蓝带为阳性,结果窗无变化为阴性。

6.3 3.免疫荧光法

(1)将标本涂于玻片凹孔中或圆圈中,自然干燥,丙酮或无水甲醛固定5min,漂洗,再干燥。

(2)加30μl荧光素标记的沙眼衣原衣原体单克隆抗体试剂覆盖凹孔,玻片置湿盒中或37℃下作用15min,去掉多余试剂,用蒸馏水淋洗涂片,自然干燥,加一滴封固液,盖上盖玻片,置荧光显微镜下检查。

(3)阳性标本在高倍镜下可见上皮细胞内的衣原体颗粒,为单一、针尖大小、明亮的绿色荧光,在油镜下为荧光均匀、边缘光滑的圆盘样结构,也可见网状体等其他形态的衣原体颗粒。

7 注意事项

1.分泌物涂片时不要用力涂擦,涂片厚薄要合适。

2.女性宫颈分泌物、咽和直肠标本在涂片中由于杂菌较多,故推荐用培养法。

3.分离培养取材时拭子伸入尿道或宫颈的深度一定要足够。

4.培养时,取材后应立即接种,标本离体的时间越短越好。

5.分离培养应采用加抗生素的选择性培养基。

6.氧化酶试剂应为新鲜配制(现用现配),在棕色瓶中避光保存。

7.氧化酶试剂遇铁也会变红,故接种环应非铁丝所制。

8.对症状不典型的男性患者取材,最好在其晨起排尿前或排尿4h以后。

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