血液葡萄糖

目录

1 拼音

xuè yè pú táo táng

2 英文参考

blood-glucose

blood sugar

3 概述

血清葡萄糖,其测定方法有邻甲苯胺法、葡萄糖氧化酶法、已糖激酶法、葡萄糖脱氢酶法和干化学法。其中已糖激酶法为国际推荐的参考方法,但试剂比较昂贵,我国推荐的葡萄糖氧化酶法在国内外应用甚广,目前有些单位仍沿用邻甲苯胺法。

4 血液葡萄糖的医学检查

4.1 检查名称

血液葡萄糖

4.2 分类

血液生化检查 > 糖类测定

4.3 血液葡萄糖的测定原理

(1)葡萄糖邻甲苯胺(O~TB)法测定:葡萄糖与邻甲苯胺在强酸溶液中加热;葡萄糖醛基与邻甲苯胺缩合成葡萄糖基胺,后者脱水生成席夫氏(Schiff)碱,再经结构重排列,生成有色化合物,吸收峰在630nm。

(2)葡萄糖氧化酶(GOD)法:葡萄糖氧化酶(GOD)能催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸,并产生一分子过氧化化氢。在过氧化物酶(POD)和色原性氧受体(如联大茴香胺,4-氨基安替比林偶联酚)的存在下,过氧化化氢分解,释放出初生态氧,氧化色素原,生成有色化合物。其反应如下:

醌亚胺在480~550nm波长有最大吸收,所产生的颜色强度与血清中葡萄糖量成正比,与同样处理的标准液比较,经计算可求出血清葡萄糖的含量。

4.4 试剂

4.4.1 (1)葡萄糖邻甲苯胺(O~TB)法测定

①邻甲苯胺试剂:940ml冰醋酸中加入硫脲1.5g,邻甲苯胺60ml混合,直至硫脲完全溶解,置棕色瓶中,室温保存。新配试剂应放置24h后(待老化)使用。此试剂腐蚀性极强,避免接触皮肤,应用自动吸管加液。

②12mmol/L苯甲酸溶液:于900ml蒸馏水中加入苯甲酸(MW=122.12)1.46g加热助溶,冷却后置于1L容量瓶中,加蒸馏水至刻度。

③葡萄糖标准贮存液及应用液:同血清葡萄糖氧化酶法。

4.4.2 (2)葡萄糖氧化酶(GOD)法

可用成套试剂盒,也可自己配制,配制方法如下:

①0.1mol/L(pH7.0)磷酸盐缓冲液:溶解无水磷酸氢二钠8.67g及无水磷酸二氢钾5.3g于800ml蒸馏水中,用1mol/L氢氧化钠或盐酸调节pH至7.0,然后用蒸馏水稀释至1L。

②酶试剂:取葡萄糖氧化酶1200U,过氧化物酶1200U,4-氨基安替比林10mg,叠氮钠100mg,加上述磷酸盐缓冲液至80ml左右,调节pH至7.0,加磷酸缓冲液至100ml。置冰箱保存,至少可稳定3个月。

③酚试剂:重蒸馏酚100mg溶于100ml蒸馏水中(酚在空气中氧化成红色,可先配成500g/L的溶液,用时稀释)。贮存于棕色瓶中。

④酶酚混合试剂:酶试剂及酚试剂等量混合,在冰箱内可以存放一个月。

⑤葡萄糖标准贮存液(100mmol/L):无水葡萄糖(预先置80℃烤箱内干燥恒重,移置于干燥器内保存)。称取1.802g,以12mmol/L苯甲酸溶液溶解并移入100ml容量瓶内,再以12mmol/L苯甲酸溶液稀释至100ml刻度处,放置2h后方可应用。

⑥葡萄糖标准应用液(5mmol/L):吸取葡萄糖标准贮存液5ml,于100ml容量瓶中,用12mmol/L苯甲酸溶液稀释至刻度,混匀。

4.5 操作方法

(1)葡萄糖邻甲苯胺(O~TB)法测定:

取数支16mm×150mm试管,按表1进行操作。

混匀后,置沸水中,加热12min,取出置冷水中冷却5min。分光光度计波长630nm,比色杯光径1.0cm,空白管调零比色,读取标准管与测定管吸光度。

(2)葡萄糖氧化酶(GOD)法:

取数支16mm×100mm试管,按表2进行操作。

混匀,置37℃水浴中,保温15min,用分光光度计波长505nm,比色杯光径1.0cm,以空白管调零比色,分别读取标准管及测定管吸光摩。

4.6 正常值

(1)空腹:

①邻甲苯胺法(O-TB):   3.89~6.11mmol/L

②葡萄糖氧化酶法(GOD):3.89~6.11mmol/L

③分光光度法(AAS):    3.88~5.8 mmol/L

④自动生化仪:         3.89~6.11mmol/L

(2)进食后2h:<6.7mmol/L   (<120mg/dl)

4.7 化验结果临床意义

(1)升高

①胰岛素分泌不足:真性糖尿病。

②糖类皮质激素增多:肢端肥大症、甲状腺功能亢进、库欣综合征、巨人症等。

③肾上腺素过多:嗜铬细胞瘤。

④肝摄取减少:肝硬化、重症肝炎、血色病。

⑤颅内压升高:脑外伤、脑瘤、脑出血、重症化脓性脑膜炎等。

⑥维生素B1缺乏:Wernicke脑病(脑性出血性脑灰质炎)。

⑦胰腺癌、急慢性胰腺炎、胰岛α细胞瘤等。

⑧应激状态:烧伤、休克、感情创伤、麻醉等。

⑨药物与化学毒物中毒:咖啡因、茶碱、ACTH、一氧化化碳和重金属中毒等。

(2)降低:

①胰岛素分泌过多:胰岛β细胞瘤、胰外肿瘤(肾上腺癌、胃癌、纤维肉瘤)、倾倒综合征、早期糖尿病、功能性血糖过低症、滋养性血糖过低症、胰高血糖素缺乏症等。

②对抗胰岛素的内分泌不足:垂体前叶功能减退症、艾迪生病、胰岛α细胞功能减退症、甲状腺功能减退症(呆小症、黏液性水肿)。

③肝脏葡萄糖供应不足:原发性肝癌、肝硬化后期、重症肝炎、重症脂肪肝、糖原贮积病(Von Gier Ke病)、半乳糖血症、长期营养不良等。

④其他:蛛网膜下腔出血、脑炎后综合征、荔枝病、亮氨酸过敏、食物摄入不足、运动、饥饿、药物(服用胰岛素或降糖药过量)。

4.8 附注

(1)葡萄糖邻甲苯胺(O~TB)法测定:

①除葡萄糖外,其他糖在反应过程中亦能产生有色化合物,它们吸光度比率分别为:葡萄糖=1.00;果糖=0.06;甘露糖=0.96;半乳糖=1.42;蔗糖=0.16;麦芽糖=0.09;乳糖=0.39;木糖=0.12。但是,在这些糖中葡萄糖、果糖和半乳糖存在于正常人血清,而后者在正常人血液中含量甚微,不影响实际测定结果。

②测定液的显色强度与反应条件有关,邻甲苯胺的批号、邻甲苯胺试剂的新、老(如试剂配制后过久,颜色变浅)以及加热温度和加热时间等都会影响显色强度。因此,测定管,标准管、空白管的加热时间与温度必须完全一致。每批测定管数不宜过多,以便能较好地控制反应条件。有些批号冰醋酸会产生棕色反应,影响测定结果。

③最终反应液偶尔会产生混浊,最常见原因是高脂血症。此时,可向3ml显色液中加入1.5ml异丙醇,充分混匀,溶解脂质可消除浊度,所测吸光度乘以1.5。注射右旋糖酐时,由于右旋糖酐不溶于邻甲苯胺试剂而产生混浊。冷水浴太冷时也可出现混浊。

④轻度溶血不影响测定,但1g/L血红蛋白能假性增高葡萄糖测定结果

0.11mmol/L,胆红质也能增高测定管吸光度,342μmol/L胆红质能假性增高葡萄糖测定结果1.39mmol/L,血标本中含有EDTA(>1mg/ml),氟化钠(>5mg/ml)时,能增高显色强度,麝香草酚抑制颜色生成。

⑤邻甲苯胺法的测定结果基本上与葡萄糖氧化酶法和已糖激酶法相同,但尿毒症患者,邻甲苯胺法的测定结果略有偏高。

⑥邻甲苯胺试剂有毒并有致癌性,操作应避免皮肤接触或直接吸入。

(2)葡萄糖氧化酶(GOD)法:

①葡萄糖氧化酶对β-D葡萄糖高度特异,溶液中葡萄糖约36%为α型,64%为β型。葡萄糖的完全氧化需要从α型到β型的变旋反应。国内某些商品葡萄糖氧化酶试剂盒含葡萄糖变旋酶,可加速这一反应,但在终点法中延长孵育时间可达到完成自发变旋过程。新配制的葡萄糖标准液主要是α型,故须放置2h以上(最好过夜),待变旋平衡后方可应用。

②葡萄糖氧化酶法测定的特异性较高,能干扰测定结果的物质很少,溶血标本血红蛋白的浓度达10g/L,黄疸标本胆红质浓度达342μmol/L。氟化钠浓度达2g/L,尿素浓度达46.7mmol/L(280mg/dl),尿酸浓度达2.95mmol/L,半胱氨酸的浓度达50mg/dl,甘油三酯浓度达500mg/dl,对测定结果均无影响,维生素C、谷胱甘肽、10mg/dl左旋多巴可能引起测定结果的负偏差。

③如果测血浆中糖,标本以草酸钾-氟化钠为抗凝剂较好。取草酸钾6g,氟化钠4g,加水溶解至100ml,吸取0.1ml到玻璃试管内,在80℃以下烤干使用,可使2~3ml血液在3~4h不凝固并抑制糖分解。

④方法学评价:GOD法线性范围至少可达19mmol/L;回收度94%~105%;变异系数批内为0.7%~2.0%;批间为2%左右;日间为2%~3%。准确度与精密度都能达到临床需要,操作简便,适用于常规检验。

4.9 相关疾病

脱水、糖尿病、肢端肥大症、库欣综合征、嗜铬细胞瘤、肝硬化、血色病、脑出血、化脓性脑膜炎、胰腺癌、慢性胰腺炎、烧伤、胃癌、肉瘤、倾倒综合征、甲状腺功能减退症、原发性肝癌、脂肪肝、糖原贮积病、半乳糖血症、蛛网膜下腔出血、高脂血症、黄疸

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