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血清脂蛋白-α

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1 拼音

xuè qīng zhī dàn bái -α

2 英文参考

Lipoprotein-α

3 概述

脂蛋白α在肝脏合成,是由载脂蛋白A和载脂蛋白B通过二硫键组成的特殊脂蛋白,成分类低密度脂蛋白。其主要功能是阻止血管内血块溶解,促进动脉粥样硬化形成。脂蛋白α水平持续升高与心绞痛心肌梗死脑溢血有密切关系。因为脂蛋白α与高血压、吸烟、高密度脂蛋白胆固醇低密度脂蛋白胆固醇等诸因素无明显相关,所以被视为冠心病独立危险因子。

4 血清脂蛋白-α的医学检查

4.1 检查名称

血清脂蛋白-α

4.2 分类

血液生化检查 > 脂类测定

4.3 血清脂蛋白-α的测定原理

用聚苯乙烯微量反应板为固相载体,以apo(a)单克隆抗体(McAb)包被,加入待测标本,使其中的apo(a)与圃相化的McAb结合,洗涤除去未结合的标本中其他蛋白质,再加入酶标记的apo(a)McAb,与结合到固相抗体上的apo(a)作用,洗涤除去未结合的酶标记物。加入酶的相应底物产生颜色反应,显色程度决定于结合在固相载体上的apo(a)量。

McAb应用杂交瘤技术制备,以超速离心结合层析法纯化的Lp(a)为抗原。所制备的McAb应与apoB及纤溶酶原(PMG)无交叉反应。混合数株识别apo(a)上不同抗原位点的McAb,用于建立血清Lp(a)双抗体夹心ELISA法

4.4 试剂

(1)包被缓冲液:0.02mol/L碳酸盐缓冲液,pH9.5。

(2)包被抗体与酶抗体:用McAb混合液,以硫酸铵沉淀法制备抗人apo(a)-IgG,部分作包被用,部分以过碘酸盐法交联辣根过氧化物酶(RZ≥3)得酶标抗体,-20℃保存稳定数月。

(3)稀释/封闭液:pH 7.4缓冲液含磷酸盐0.01mol/L及氯化钠0.15mol/L,临用前取适量缓冲液,加入适量小牛血清及吐温-20。

(4)底物溶液:0.1mol/L柠檬酸及0.2mol/L Na2HPO4缓冲液,pH 5.0,临用前每100ml缓冲液中加入邻苯二胺0.1g及30% H2O2 0.1ml。

(5)终止液:2mol/L H2SO4

(6)洗涤液:0.15mol/L NaCl,每升含吐温-20 0.5ml。

(7)参考血清:目前尚无公认的定值血清,可暂用商品(如BM公司产品,1410962)。

4.5 操作方法

(1)包被:聚苯乙烯板,96孔。抗apo(a)-IgG用包被液稀释成10μg/ml浓度,每孔加150μg/ml,4℃过夜。

(2)洗板及封闭:包被后的小孔用洗涤液洗3次,每次5min。每孔中加入封闭液0.15ml,37℃放置30min后,再用洗涤液洗3次。

(3)稀释:参考血清1∶200稀释起,用稀释液倍比稀释8管,作标准曲线用。血清标本可稀释成1∶100或1∶2000后复查。

(4)加样:每孔中加入稀释后的参考血清及标本各100μl,留空白孔只加稀释液,37℃ 1h可用洗涤液洗3次。

(5)加酶标抗体(稀释度因抗体效价而定,例如1∶20000):每孔100μl,37℃ 1h。

(6)显色:每孔中加底物溶液100μl,室温(25℃)避光放置15min。

(7)终止反应:每孔中加入终止液50μl。

(8)比色:在酶标比色计上以空白孔校零点比色,波长490nm,读取各孔吸光度(A)。

4.6 正常值

免疫透射比浊法:0~1g/L。

4.7 化验结果临床意义

(1)降低:见于严重肝病

(2)升高:见于动脉粥样硬化、脑梗死、脑动脉硬化急性心肌梗死急性风湿性关节炎外科手术等。

4.8 附注

脂蛋白α水平与人种及遗传有关;性别之间无明显差别,环境、饮食、药物等因素对脂蛋白α水平无明显影响。

4.9 相关疾病

脑梗死、急性心肌梗死

相关文献

开放分类:血液生化检查脂类测定化验及医学检查
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参与讨论
  • 评论总管
    2020/11/26 7:19:13 | #0
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本页最后修订于 2013年2月23日 星期六 11:39:12 (GMT+08:00)
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