血清游离甘油

1 拼音

xuè qīng yóu lí gān yóu

2 概述

血中脂肪酸的45%与甘油以酯化形成存在。

3 血清游离甘油医学检查

3.1 分类

血液生化检查 > 脂类测定

3.2 取材

血液

3.3 原理

酶法测定血清游离脂肪酸分三步反应，反应式如下：

（1）

（2）

（3）

3.4 试剂

以Boehringer mannheim游离甘油测定试剂盒为例：

（1）缓冲液Ⅰ：0.2mol/L pH7.5 KH₂PO₄（用5mol/L KOH调pH）。

（2）81mol/L ATP溶液：125mg ATP溶于2.5ml缓冲液Ⅰ中。

（3）10mmol/L MgCl₂溶液。

（4）10mmol/L pH6.5辅酶A溶液。

（5）50g/L Triton X-100溶液。

（6）酰基辅酶A合成酶  8.4ku/L（用缓冲液Ⅰ配制）。

（7）2-（N-吗啉代）乙烷磺酸（2-morpholi-noethanesulphonic acid，MES）缓冲液：0.2mol/L，pH7.5（用KOH调pH）。

（8）N-乙基顺丁烯二酰亚胺（N-ethylmaleimide，NEM），20mmol/L（用MES缓冲液配制）。

（9）4-氨基安替比林溶液，15mmol/L（用MES缓冲液配制）。

（10）2，4，6-三溴-3-羟基苯甲酸（TBHB）溶液60mmol/L（用MES缓冲液配制）。

（11）过氧化物酶溶液，2000u/ml。

（12）1g/L NaN₃溶液

（13）酰基辅酶A氧化酶溶液：约120u/ml（用缓冲液Ⅰ配制）。

3.5 操作方法

（1）混合试剂：

①试剂Ⅰ：含缓冲液Ⅰ 4.0ml、ATP 2.0ml、MgCl₂ 2.0ml、辅酶A 2.0ml、TritonX-100 4.0ml、酰基辅酶A合成酶2.0ml，加双蒸水4.5ml（共20.5ml）。

②试剂Ⅱ：含MES缓冲液10.0ml、4-氨基安替比林6.0ml、TBHB 8.0ml、NaN₃溶液2.0ml、TritonX-100 4.0ml、过氧化物酶溶液0.4ml，双蒸水10.0ml（共40.4ml）。

③试剂Ⅲ：NEM缓冲液2.1ml、酰基辅酶A氧化酶2.0ml（共4.1ml）。

上述三种混合试剂4℃避光保存可稳定3天。

（2）各管内加入试剂Ⅰ1ml与试剂Ⅱ2ml，混合，37℃10min。

（3）加入空白与血清标本各50μl，混合后37℃5min，在546nm测定吸光度为A₁。

（4）加入试剂Ⅲ 0.20ml，混合，待20～25min反应停止后在546nm测定吸光度为A₂。

3.6 正常值

3～10岁：65～228μmol/L（0.6～2.1mg/dl）；

＞11岁： 33～185μmol/L（0.3～1.7mg/dl）。

3.7 临床意义

升高：甲状腺功能亢进、慢性肾功能衰竭、糖尿病、肝硬化、高血脂症、肥胖。

3.8 附注

若血清游离脂肪酸浓度大于2mmol/L可适当稀释后再测。

3.9 相关疾病

肥胖     肝硬化     甲状腺功能亢进     慢性肾功能衰竭     糖尿病