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血清尿酸

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1 拼音

xuè qīng niào suān

2 英文参考

serum uric acid

SUA

3 概述

尿酸是嘌呤分解代谢的最终产物。由肾脏尿液排出体外。尿酸有两种存在形式,一为烯醇式,一为酮式。尿酸的醇式具有酸性,经常以其钾、钠等盐类形式排泄于尿中。健康成人体内尿酸含量约为1.1g,其中约15%存在于血液中,血液中尿酸经肾小球过滤后,大部分由肾小管重吸收。尿酸是血浆中非蛋白氮重要成分之一,在严重肾脏损害时,血中尿酸可显著升高。而轻度受损时变化不大。故血尿酸测定是诊断肾重度受损的敏感指标

4 血清尿酸的医学检查

4.1 检查名称

血清尿酸

4.2 分类

血液生化检查 > 氨基酸、氮化物、有机酸测定

4.3 取材

血液

4.4 血清尿酸的测定原理

(1)磷钨酸还原法:尿酸在碱性情况下,能被磷钨酸氧化成尿素和二氧化化碳,磷钨酸则被还原成钨蓝(tungten blue),后者生成量与尿酸含量成正比。

(2)尿酸酶-过氧化物酶偶联法:尿酸可被尿酸酶氧化,生成尿囊素和过氧化化氢,后者与4-AAP和3,5-二氯-2-羟苯磺酸(DHBS)在过氧化物酶作用下,生成醌亚胺化合物,其颜色深浅与尿酸含量成正比。

4.5 试剂

(1)磷钨酸还原法:

①磷钨酸贮存液:精确称磷钨酸50g溶于约400ml蒸馏水中,加浓磷酸40ml,及玻璃球数粒,回流2h,冷却至室温。用蒸馏水准确稀释至1000ml,贮存于棕色瓶中保存

②磷钨酸应用液:准确量取磷钨酸贮存液适量,以蒸馏水1∶10稀释即可。

③0.3mol/L钨酸钠溶液:称取钨酸钠(Na2WO4·2H2O)100g,用蒸馏水溶解后稀释至1000ml。

④0.33mol/L硫酸溶液:取18.5ml浓硫酸,加入500ml蒸馏水中,然后用蒸馏水稀释至1L。

⑤钨酸试剂:在800ml蒸馏水中,加入50ml 0.3mol/L钨酸钠溶液,0.05ml浓磷酸和50ml、0.33mol/L硫酸,混匀,置室温可稳定数月。

⑥100g/L碳酸钠溶液:称取100g无水碳酸钠,溶解在适量蒸馏水中,待完全溶解后,用蒸馏水稀释至1000ml,置塑料瓶中保存。

⑦6.0mmol/L尿酸标准应用液:取60mg碳酸锂AR)溶解在40ml蒸馏水中,加热至60℃,待其完全溶解。精确称取尿酸(MW168.11)100.9mg溶于碳酸锂溶液,移入100ml容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度,贮存于棕色瓶中保存。

⑧300μmol/L尿酸标准应用液:在100ml容量瓶中,加尿酸标准应用液5ml,加乙二醇33ml,然后以蒸馏水稀释至刻度。

(2)尿酸酶-过氧化物酶偶联法:

①干粉酶试剂:按要求复溶后含:尿酸酶160U/L,过氧化物酶1500U/L,0.4mmol/L 4-氨基安替比林,6mmol/L 2,4-二氯酚钠盐和防腐剂稳定剂

②磷酸盐缓冲液(pH 8.0),用蒸馏水或缓冲液复溶干粉酶。

③尿酸标准应用液:可购买专用的尿酸标准应用液。浓度多为300μmol/L。

4.6 操作方法

(1)磷钨酸还原法:

①取16mm×100mm试管3支,分别标明测定管“U”、标准管“S”、空白管“B”。

②于3支试管中各加入4.5ml钨酸试剂,然后测定管中加入0.5ml血清,标准管中加入0.5ml尿酸标准应用液,空白管中加入0.5ml蒸馏水,混匀后,静置10min,离心沉淀。

③另取3支16×100mm试管,标明测定管“U”、标准管“S”、空白管“B”,分别加入上清液各2.5ml,再于各管加入100g/L碳酸钠试剂0.5ml。

④混匀,室温放10min后,分别加入磷钨酸应用液0.5ml。

⑤混匀,室温放20min后,在660nm波长,以空白管调零,分别读取测定管和标准管吸光度。

(2)尿酸酶-过氧化物酶偶联法:

①将干粉试剂按说明书要求加入一定量的蒸馏水或缓冲液复溶,复溶后0.5h使用。

②取3支试管,分别标明测定管,标准管和空白管。

③测定管内加血清0.1ml,标准管内加尿酸标准液0.1ml,空白管内加蒸馏水0.1ml,各管均加入1.5ml酶试剂。

④充分混匀,放室温20min,500nm波长,以空白管调“0”,用分光光度计比色,分别读取各管吸光度。

4.7 正常值

(1)磷钨酸还原法:男150~420μmol/L;女90~357μmol/L。

(2)尿酸酶-过氧化物酶偶联法:成人90~420μmol/L。

4.8 化验结果临床意义

(1)血尿酸增高:

①急慢性肾炎血尿酸明显增高,且较BUN、Cr更显著,出现更早。其他肾病晚期,如肾结核肾盂肾炎肾积水等血尿酸亦增高。因肾外因素影响较大,故其升高程度并不与肾功能受损程度成正比。

痛风,由核蛋白及嘌呤代谢紊乱所致,血尿酸>595μmol/L。

白血病多发性骨髓瘤真性红细胞增多症等因核酸代谢分解增加使血尿酸增加。

④其他:氯仿、四氯化碳、铅中毒子痫妊娠反应、剧烈运动等。

(2)血尿酸减少:较少见,见于恶性贫血乳糜泻等。

4.9 附注

(1)磷钨酸还原法:

①为确保检测结果准确可靠,每次测定应包括质控血清,所得值需在允许范围。

②WHO推荐的OCV为±5%,RCV为±10%。我国推荐的RCV为7.5%。

红细胞中含有多种非特异性还原物质,因此应用血清或血浆作样本

草酸钾与磷钨酸反应,形成不溶性的磷钨酸钾,可造成显色液混浊。因此不能用草酸钾作抗凝剂

⑤血清和尿液尿酸在室温可稳定3天。尿液冷藏后,可引起尿酸盐沉淀析出。其解决方法为:将尿液pH调至7.5~8.0,并加热到50℃,使沉淀完全溶解,然后再行测定。

⑥尿酸在水中溶解度极低,配制标准液时,加碳酸锂加热助溶。如无碳酸锂,可用碳酸钾或碳酸钠代替。

⑦用钨酸沉淀蛋白时,部分尿酸可与蛋白一同沉淀,而且沉淀量随滤液pH值的不同而异。如滤液pH<3,尿酸回收率小于90%,pH值3.0~4.3,回收率93%~103%;pH值2.4~2.7,回收率74%~97%。

⑧钨酸钠质量要有保证。如含有钼,则可与血液中酚类物质起反应,影响测定结果。

⑨比色时间要严格掌握,室温放20~30min内比色效果最佳。

(2)尿酸酶-过氧化物酶偶联法:

①为确保满意的质量,每次测定都应同时测定质控血清,所得值应在允许范围。

②标准液浓度准确与否及吸取标本量的准确度,对测定结果影响很大,如果结果倾向偏高或偏低,应从标准液及吸取标准量上找原因。所用玻璃器材要清洁干燥,吸量管准确度要高。

③干粉试剂于2~6℃保存,至少可稳定6个月。复溶后的试剂在室温可用6~8h;在2~6℃可稳定12~24h,若发现干粉受潮结块,或有颜色出现,及复溶后与定值血清测定值不符,说明试剂已变质,应弃去不用

④最后的呈色反应属Trinder反应,故受氧化还原剂的影响很大,污染还原剂时,结果显著降低或不显色。而污染氧化剂时可使结果偏高或使试剂变红。

4.10 相关疾病

肾结核、肾积水、痛风、多发性骨髓瘤、真性红细胞增多症、乳糜泻

相关文献

开放分类:血液生化检查氨基酸、氮化物、有机酸测定化验及医学检查
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  • 评论总管
    2019/9/18 20:42:52 | #0
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本页最后修订于 2013年2月23日 星期六 19:49:36 (GMT+08:00)
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