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血清肌钙蛋白I和肌钙蛋白T

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1 拼音

xuè qīng jī gài dàn bái Ihé jī gài dàn bái T

2 英文参考

Serum troponin I and troponin T

3 概述

肌钙蛋白肌肉收缩的调节蛋白,由三个结构不同的亚基组成,即肌钙蛋白T(TnT)、肌钙蛋白I(TnI)和肌钙蛋白C(TnC),它附在收缩的横纹肌细微组织上,TnI是一种结构蛋白,它与肌动蛋白原肌球蛋白互相作用。TnI与肌动球蛋白在静止状态时相结合,抑制肌动球蛋白的ATP酶(ATPase)活性。TnC有四个能结合钙离子的结合点,当它与细胞内的钙离子结合时,能导致整个肌钙蛋白构造上的变化。肌钙蛋白放松了肌动球蛋白,让肌动球蛋白与肌浆球蛋白互起作用,而造成肌肉收缩。肌钙蛋白具有的3种同分异构体,其中两种同分异构体是骨骼肌所特有的,一种同分异构体是心肌所特有的,这3种肌钙蛋白的同分异构体存在着结构上的差异。心肌中的T和I亚基结构不同于其他肌肉组织,心肌钙蛋白T、I(CTnT、CTnI)由于分子量小,分别为37000D和24000D,所以发病后血中浓度迅速升高,目前已得到抗CTnT和CTnI的特异抗血清,应用免疫层析与酶免技术可进行快速检测与定量测定,具有快速、灵敏、特异等特点。

4 血清肌钙蛋白I和肌钙蛋白T的别名

TnI;TnT

5 血清肌钙蛋白I(TnI)和肌钙蛋白T(TnT)医学检查

5.1 检查名称

血清肌钙蛋白I和肌钙蛋白T

5.2 分类

血液生化检查 > 蛋白质测定

5.3 化验取材

血液

5.4 原理

(1)心肌钙蛋白T、I的快速检测:应用免疫层析方法测定样品中的特异抗原(CTnT、CTnI)。测试时滴加血清样品于样品槽,样品通过毛细管效应沿试纸膜运动,如果样品中含有特异抗原,试验部位就出现色带,在对照区域内应该有另一颜色条带作为实验对照。

(2)心肌钙蛋白T的ELISA法测定:生物素与亲和素作用下的双抗体夹心ELISA,用链霉亲和素-生物素化的抗TnT单克隆抗体包被物,依次于样品中TnT抗原和酶标TnT单克隆的抗体反应然后加入底物色原。酶催化底物显色,由系列TnT标准制定的标准曲线,定量测定CTnT含量。

5.5 试剂

(1)心肌钙蛋白T、I的快速检测:CTnT免疫层析试纸条(德国宝灵曼公司专利)。

CTnI免疫层析试纸条(进口)。

(2)心肌钙蛋白T的ELISA法测定:

①生物素-亲和素CTnT单克隆抗体包被板。

②孵育缓冲液

③浓缩洗涤液。

④酶标结合物。

⑤CTnT标准品

⑥底物色原:ABTS(二氨2,2叠氮)。

5.6 操作方法

(1)心肌钙蛋白T、I的快速检测:

①将包装纸打开,标记上样品编号。

②加5~6滴血清样品到样品槽中。

③在10~15min内观察色带出现情况。

附注:

①试纸条只能用1次,重复使用无效。

②试纸条试验区和对照区均不出现色带,取另一试纸条重复检测仍无结果,则表示试纸条失效。

③免疫层析技术测定CTnT、CTnI适合床边快速试验,但只是定性或半定量,要真正了解病情严重程度及选择治疗措施还需定量测定。

(2)心肌钙蛋白T的ELISA法测定:

①在包被板中分别加入标准血清,对照血清和病人标本于相应的孔内各50μl。

②每孔各加孵育缓冲液50μl,并轻轻混匀。

③室温下孵育60min后洗涤三次,10min内完成。在吸水纸上用力拍打微孔。以除去残留水滴。

④每孔各加入酶结合物100μl,轻轻混匀。

⑤倒空微孔板中的孵育液,用洗涤液将微孔洗三次,在吸水纸上用力拍打微孔,以除去残留水滴。

⑥将200μl色原底物溶液加入相应的孔中,避光,轻轻混匀,静置30min。

⑦用酶标仪在10min内,于405nm和630nm双波长下测定吸光度值(OD值)。

附注:

①CTnT待测标本最好用血清,不要用抗凝血浆,因为抗凝剂如:肝素、EDTA等对CTnT有影响。

②由于CTnT是心肌细胞损伤释放出来的,所以尽量避免标本溶血,如果标本溶血很可能造成检测结果增高。

③配制好孵育液不要冷冻保存,应放在2~8℃冷藏。

④实验前应注意试剂有无失效,如变质,其颜色加深。

⑤为了提高CTnT检测的可靠性,应注意加样的准确及其他操作过程,比色最好选用双波长。

5.7 正常值

干片法:TnI阴性 免疫法:TnT0~0.15μg/L 。

5.8 化验结果意义

升高:心肌缺血损伤,如心肌梗死、急性心绞痛不稳定型心绞痛心脏手术后等。心肌损伤后、血中出现TnI、TnT时间最早、持续时间长,因此TnI、TnT是心肌损伤的一个较特异和较灵敏的指标,TnI较TnT更敏感

(1)急性心肌梗死AMI),发病后血中浓度很快增高,GTnT、CTnI,3~6h超过参考值上限值,GTnT 10~24h达峰值,10~15天恢复正常。CTnI 14~20h达峰值,5~7天恢复正常。即出现早,和CK-MB相当或稍早;消失慢,持续时间超过LD1,诊断的窗口期特别长,兼有CK-MB和LD1的优点。灵敏度GTnT为50%~59%(0~6h),CTnI为6%~44%;特异性GTnT为74%~96%,CTnI为93%~99%。据报道GTnT在诊断AMI时比CK-MB更为灵敏,但有报道在肾脏疾病病人血样中发现GTnT,所以特异性较差。GTnT比LD1/LD2比率在诊断AMI中更为灵敏,且在肾病及其他疾病患者血液中未发现CTnI,所以CTnI是心脏受损时唯一的特异性标志物。由于GTnT和CTnI消失慢,所以,可作为心肌梗死后期标志物。

(2)GTnT和CTnI可作为心脏手术中心肌梗死症状出现的指示物,当病人接受动脉搭桥手术时,若GTnT和CTnI含量增加,表明出现心肌梗死,而此时CK-MB含量并无变化。

5.9 相关疾病

急性心肌梗死

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开放分类:化验及医学检查
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  • 评论总管
    2019/9/18 11:44:46 | #0
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本页最后修订于 2013年2月24日 星期日 10:52:12 (GMT+08:00)
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