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血清补体旁路途径活性

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1 拼音

xuè qīng bǔ tǐ páng lù tú jìng huó xìng

2 英文参考

Serum complement alternative pathway activity

3 概述

本试验阻断补体传统活化途径,加入兔红细胞使B因子活化,导致补体旁路激活,兔红细胞遭受损伤发生溶血。溶血率与补体旁路活性之间的关系类似CH50。

4 血清补体旁路途径活性的医学检查

4.1 检查名称

血清补体旁路途径活性

4.2 分类

免疫学检查 > 细胞免疫测定

4.3 取材

血液

4.4 血清补体旁路途径活性的测定原理

将新鲜的受检血清作一系列稀释后,分别加入抗体致敏绵羊红细胞,经过一定时间的反应,根据溶血程度可判断受检血清中的总补体活性。

总补体测定现在用的是50%溶血活性测定,要比CH100敏感,这是因为溶血程度在30%~70%的范围内补体的用量稍有变动即能影响溶血程度,因而CH50单位比较准确。但是CH50操作要求比100%溶血试验要高。

4.5 试剂

(1)pH7.4巴比妥缓冲液(含钙、镁离子):巴比妥钠5.1g,氯化钠44.5mg,氯化钙42.5mg,氯化镁250mg,1mol/L盐酸(调pH)约30ml,加去离子水至1000ml,使用时取原液做1∶5稀释,当日用完。

(2)2%绵羊红细胞悬液:吸取经洗涤配制的2%羊红细胞悬液0.2ml,加入pH7.4巴比妥缓冲液5ml,混合后,倒入1cm比色杯,用721型分光光度计(波长542nm)比色。以巴比妥缓冲液作为空白,校正透光率到100%,读取测定管透光率,应为40%。如有差异,按比例给予调节。

(3)2u抗绵羊红细胞溶血素溶液:如溶血素的效价为1∶6000,则用巴比妥缓冲液稀释1∶3000即成。

(4)标准管制备:2%羊红细胞悬液2ml,加蒸馏水8ml,使其全溶血为100%全溶血管。取全溶血管上清2.5ml,加巴比妥缓冲液(pH7.4)2.5ml,即为50%溶血标准管。

4.6 操作方法

(1)将待检血清按1∶20稀释,吸取待检血清0.2ml于一试管中,加入巴比妥缓冲液3.8ml,混匀。

(2)取10支试管按(表1)加液混匀。

(3)将上述各管先与50%溶血标准管作初步目视比较,选择与标准管相接近的两管,用分光光度计在波长542nm读数,求出二者中更加接近标准光密度数的一管。根据此管中加入稀释血清的量按下式求出总补体值。

4.7 正常值

本法测得的健康人正常值为50~100u/ml。

4.8 化验结果临床意义

在许多病理情况下,血清补体含量可以发生变化,因此临床上观察补体含量的动态变化,如总补体活性、补体个别成分特别是C3和C4量的变化等,对一些疾病的诊断、病因研究及预后判断都有一定意义。但补体量的降低,并不一定就是免疫紊乱或免疫性疾病。现知缺血、凝固性坏死中毒性坏死,可使组织释放较多的蛋白分解酶,导致补体溶血活性和每个补体成分下降。某些先天性补体缺乏症也可出现某个补体成分的缺损,因此需对具体情况作详细分析

4.9 附注

(1)受检血清必须新鲜,如放置室温2h以上,会使补体活性下降。

(2)补体的溶血活性受多种因素的影响,如绵羊红细胞浓度及致敏抗体的量等。当每一致敏红细胞吸附的抗体分子低于100时,红细胞溶解程度随细胞浓度的增加而减少。当用高浓度抗体致敏时,溶血程度随细胞的增加而增加。红细胞浓度增加一倍,可使50%溶血补体量增加25%左右。钙、镁离子的存在可稳定溶血系统。但含量过多时,反而抑制溶血反应。因此在进行试验时,需对反应的各个环节作严格控制

(3)本试验不能测定补体蛋白的绝对值,也不能测定备解素系统中的成分。

相关文献

开放分类:化验及医学检查免疫学检查细胞免疫测定
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  • 评论总管
    2019/12/11 11:00:41 | #0
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本页最后修订于 2013年2月24日 星期日 11:25:04 (GMT+08:00)
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