血清丙氨酸氨基转移酶

目录

1 概述

丙氨酸氨基转移酶(ALT)是通常所称谷丙转氨酶(CPT),存在于各组织细胞,以肝脏含量最多,其次是心肌细胞内,血清中酶活性很低。当这些组织病变,细胞坏死或通透性增强时,细胞内酶释放入血,使血清中ALT活性增高。血清ALT测定主要用于肝脏病的诊断。其测定方法有比色法和连续监测法。前者操作简单,不需特殊试剂和仪器,但结果不够准确,重复性不理想;后者快速,结果准确,是公认的好方法,但对试剂和仪器要求较高。

2 别名

血清丙氨酸氨基转移酶

3 血清谷丙转氨酶的医学检查

3.1 检查名称

血清谷丙转氨酶

3.2 分类

血液生化检查 > 酶类测定

3.3 取材

血液

3.4 血清谷丙转氨酶的测定原理

(1)比色法测定:ALT催化基质中的丙氨酸和α-酮戊二酸反应,生成谷氨酸和丙酮酸,后者与2,4-二硝基苯肼作用,生成苯腙,在碱性条件下显色。

(2)连续监测法:在ALT催化的反应中生成的丙酮酸,被LDH还原成乳酸,并使NADH氧化成NAD,在340nm波长下吸光度降低,NADH的氧化速率与ALT活力成正比。

3.5 试剂

(1)比色法测定:

①0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.4)。

A液:称磷酸二氢钾13.6g,溶于水中,加水至1000ml,冰箱保存。

B液:称磷酸氢二钠(含两个结晶水)17.6g,溶于水中,并加水至1000ml,冰箱保存。

取A液80ml,B液420ml混合,置冰箱内保存即可。

②ALT基质液:精确称取DL-丙氨酸1.79g和α-酮戊二酸29.2mg,溶于50ml磷酸盐缓冲液中,用1mol/L NaOH溶液(约0.5ml)校正pH7.4,再加磷酸盐缓冲液至100ml,可稳定2周。加麝香草酚90mg,可延长使用时间。

③1mol/L 2,4-二硝基苯肼(DNPH)溶液:称取DNPH 19.8mg,溶于1000ml 1mol/L HCl中,置室温保存。

④0.4mol/L NaOH溶液:溶解16.0g NaOH于水中,并加至1000ml,置带塞塑料瓶内,置室温保存。

⑤2mmol/L丙酮酸标准液:可购买或自配。准确称取22.0mg丙酮酸钠(AR),置于100ml容量瓶中,加0.05mol/L硫酸至刻度。

(2)连续监测法:

①基质液的成分和浓度(IFCC):100mmol/L Tris缓冲液(pH7.5),15mmol/L α-酮戊二酸,500mmol/L L-丙氨酸,0.18mmol/L NADH,0.1mmol/L磷酸吡哆醛,1200U/L乳酸脱氢酶。

②市售试剂盒:按说明书用蒸馏水或稀释液溶解,用后置冰箱保存,一般可稳定4天。

3.6 操作方法

(1)比色法测定:其基质液37℃预温,按表1操作。

混匀,置37%水浴20min,各管加0.4mol/L NaOH溶液5ml,混匀,置室温5min后,在505nm处用对照管调零点,读取各管吸光度,查标准曲线即得ALT活力单位。

(2)连续监测法:各实验室可根据本室的分析仪型号及操作说明书而定。主要参数:340nm波长,37℃,样本与试剂体积比为1∶10。

3.7 正常值

(1)比色法测定:5~25卡门单位。

(2)连续监测法:成人5~40U/L(基质中含P-5’-P时为8~50U/L)。

3.8 化验结果临床意义

ALT测定对肝炎的诊断、疗效观察和预后估计均具有重要价值。

(1)急性肝炎显著升高,尤其对无黄疸、无症状肝炎的早期诊断更有帮助,其阳性率高,阳性出现时间较其他试验早,其活性的高低随肝病的进展和恢复而升降,据此可观察病情及预后。ALT持续处于高水平或反复波动,表示病变仍在进行或转为慢性肝炎。若黄疸加重,ATL反而降低,即所谓的“胆酶分离”现象,常是肝坏死的先兆。

(2)慢性肝炎、肝硬化、肝癌等ALT活性轻度升高。

(3)胆道疾病、心肌和骨骼肌损伤也可引起ALT升高。

3.9 附注

比色法测定:

(1)严重黄疸、溶血、脂血标本可使测定结果偏高,以自身血清作对照可消除之。

(2)超过正常的标本应复查,>150U时应用生理盐水稀释后重新测定,其结果乘以稀释倍数。

(3)定期校正仪器、加样器和吸管,更换仪器或基质液时应重新绘制标准曲线。

3.10 相关疾病

黄疸、肝硬化

大家还对以下内容感兴趣:

用户收藏:

特别提示:本站内容仅供初步参考,难免存在疏漏、错误等情况,请您核实后再引用。对于用药、诊疗等医学专业内容,建议您直接咨询医生,以免错误用药或延误病情,本站内容不构成对您的任何建议、指导。