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血清白细胞介素8

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1 拼音

xuè qīng bái xì bāo jiè sù 8

2 英文参考

serum interleukin-8

serum IL-8

3 概述

IL-8是一种低分子量(6~8kD)的多肽单核细胞淋巴细胞纤维细胞内皮细胞等多种细胞受LPS、TNF或IL-1刺激后都可产生这种细胞因子。IL-8的特征性生物效应是趋化和激活中性粒细胞,因而参与中性粒细胞介导的组织损伤。在许多慢性炎症性疾病,如类风湿性关节炎银屑病等,病变局部或血清IL-8产生异常,定量检测IL-8对于研究这些疾病的发生、发展及指导治疗均有重要意义。

4 血清白细胞介素8的医学检查

4.1 检查名称

血清白细胞介素8

4.2 分类

免疫学检查 > 细胞免疫测定

4.3 取材

血液

4.4 血清白细胞介素8的测定原理

鉴于生物学检测的局限性,近年来发展了ELISA和放射免疫法检测IL-8含量。目前国外已有商品化的ELISA试剂盒或特异的IL-8多抗和单抗。国内北医免疫教研室等也成功地制备了基因重组IL-8,为制备IL-8多抗或单抗创造了条件。下面介绍Deforge等(1991)建立的ELISA测定法。

4.5 试剂

(1)兔抗IL-8IgG。

(2)生物素化的兔抗IL-8IgG。

(3)亲和素-HRP。

(4)rIL-8标准品

4.6 操作方法

(1)包被兔抗人IL-8IgG(1μg/ml),以碳酸盐缓冲液稀释,加入酶标板各孔中,50μl/孔。4℃过夜。

(2)封闭  用洗液(PBS-0.05% Tween20)洗板3次,加入封闭液(含2%牛血白蛋白的PBS)200μl/孔,37℃2h。

(3)加样  加入待检样品和系列稀释的rIL-8标准品,50μl/孔,所有样品及各稀释度标准品均为复孔或三孔,37℃1h。

(4)洗板3次,加入生物素化兔抗IL-8IgG(35μg/ml)50μl/孔,37℃温育30min。

(5)洗板3次,加入1∶5000稀释的亲和素-HRP,100μl/孔,37℃温育30min。

(6)洗板3次,加入底物液100μl/孔,室温显色5min,每孔加入50μl 2mol/L H2SO4终止反应

(7)用酶标仪测A490nm。

4.7 正常值

ELISA:8.1~21.3μg/L。

4.8 化验结果临床意义

升高:类风湿性关节炎、肾病综合征出血热。

4.9 附注

该法特异性强,敏感度高。最小检出量约为100pg/ml,重复性好。其关键在于制备高效价,高纯度的兔抗IL-8 IgG

4.10 相关疾病

类风湿性关节炎、银屑病、肾病综合征

相关文献

开放分类:化验及医学检查免疫学检查细胞免疫测定
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  • 评论总管
    2020/10/28 8:31:25 | #0
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本页最后修订于 2013年2月24日 星期日 11:43:07 (GMT+08:00)
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