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血清γ-谷氨酰转肽酶

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1 拼音

xuè qīng γ-gǔ ān xiān zhuǎn tài méi

2 英文参考

serum γ-glutamyl trans peptidase

3 概述

γ-谷氨酰转移酶(GGT)临床上常称为γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT),广泛存在于肾、前列腺、胰、肝、盲肠和脑等组织中,在肾脏胰腺和肝脏中含量之比约为100∶8∶4。血清GGT测定主要用于肝胆疾病的诊断,其测定方法主要为比色法和连续监测法。

4 血清γ-谷氨酰转肽酶医学检查

4.1 分类

血液生化检查 > 酶类测定

4.2 取材

血液

4.3 原理

4.3.1 (1)比色法

GGT催化L-γ谷氨酰-α-萘胺,使γ-谷氨酰基转移到双甘肽分子上,同时释放出α-萘胺,后者与重氮试剂呈红色反应

4.3.2 (2)连续监测法

GGT可使L-γ谷氨酰-3-羧基硝基苯胺中的谷氨酰基转移到受体双甘肽分子上,同时释放出黄色的2-硝基-5-氨基苯甲酸,在405nm处其吸光度的增高速率与GGT活性成正比。

4.4 试剂

4.4.1 (1)比色法

缓冲液(pH 8.0,25℃):称取Tris 9.1g,双甘肽3.96g,溶于400ml蒸馏水中,再加蒸馏水至500ml,加氯仿1ml,置冰箱保存

②底物缓冲液(pH 7.8~7.9):称取L-γ-谷氨酰-α-萘胺(无结晶水,MW272.3)217mg,置小烧杯中,加1mol/L HCl约4ml,待完全溶解后,再加上述Tris双甘肽缓冲液90ml,于25℃用1mol/L HCl调节至pH8.0±0.1,然后加水至100ml,置冰箱保存。

③2g/L对氨基苯磺酸醋酸溶液(含醋酸20%),置冰箱保存。

④1g/L亚硝酸钠水溶液,置冰箱保存。

⑤显色剂:取4液4ml,加3液100ml混匀,当天配制。

4.4.2 (2)连续监测法

试剂成分和反应液中的参考浓度:Tris-HCl缓冲液110mmol/L;L-谷氨酰-3-羧基对硝基苯胺6mmol/L;双甘肽110mmol/L;pH8.1(25℃)。

目前已有试剂盒,按说明用稀释液溶解,置冰箱保存。

4.5 操作方法

4.5.1 比色法

取试管6支,按表1操作。

以上各管混匀,10min后用530nm波长,1cm比色杯,用空白管调零,读各标准管吸光度,以吸光度为纵坐标,相应单位为横坐标,绘制标准曲线。

附注:

(1)缓冲液种类不同,酶反应的最适pH亦不同,以Tris缓冲液最为适宜。

(2)底物缓冲液中游离的α-萘胺不稳定,且对酶有抑制作用。故配制时应注意温度的影响,如试剂空白管吸光度>0.08,则应将L-γ-谷氨酰-α-萘胺重结晶,以除去游离α-萘胺。

(3)1g/L亚硝酸钠溶液不稳定,应每周配制1次。

(4)标本易采用血清,并可用EDTA-Na2(1mg/ml)抗凝血浆,其他抗凝剂可影响结果。

(5)GGT较稳定,室温放置2天,4℃ 1周酶活力无变化,但65℃ 1min全部失活。

4.5.2 连续监测法

各实验室可根据本室的分析仪型号及操作说明书而定,主要参数:波长405nm,吸样量500μl,温度37℃,样本与试剂体积比为1∶10。

4.6 正常值

(1)比色法:成年男性:3~17U/L,女性2~13U/L。

(2)连续监测法:男11~50U/L,女7~32U/L。

4.7 临床意义

GGT测定主要用于胆汁淤滞及肝占位性病变的诊断。

(1)阻塞性黄疸:肝内外阻塞性黄疸患者血清GGT均显著升高,其幅度与阻塞程度呈正相关,阻塞越重,升高越显著。

(2)病毒性肝炎和肝硬化:急性肝炎、慢性活动性肝炎和进行性肝硬化GGT亦可升高,但不及阻塞性黄疸明显。急性肝炎恢复期,若GGT仍高于正常,提示肝炎仍未痊愈。慢性肝炎、肝硬化若其值持续升高,示病情不稳定或有恶化趋势;逐渐下降,提示肝内病变向非活动性移动。

(3)药物性、酒精性肝病脂肪肝等:GGT也升高,显著性升高是酒精性肝病的重要特征。

(4)肝癌:肝癌患者GGT活性显著升高,尤其是恶性肿瘤肝转移及肝癌手术复发时更明显,阳性率可达90%。GGT升高幅度与癌组织大小及范围有关,当肿瘤切除后,GGT可降至正常,复发时又升高,故动态观察可监测疗效、判断预后。

4.8 相关疾病

GT、肝癌、肝硬化、黄疸、酒精性肝病、脂肪肝

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  • 评论总管
    2019/10/16 0:50:43 | #0
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本页最后修订于 2013年2月24日 星期日 12:58:44 (GMT+08:00)
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