血红蛋白抗碱试验

目录

1 拼音

xuè hóng dàn bái kàng jiǎn shì yàn

2 英文参考

Hemoglobin alkali resistance test

3 概述

HbF抗碱变性的能力比HbA2强,在碱性溶液中,其他Hb在碱性溶液中可变性而被沉淀剂沉淀。而HbF不易变性沉淀,测定其滤液中Hb含量,即为HbF的含量。可用比色法测定其含量。

4 检查名称

血红蛋白抗碱试验

5 分类

临床血液检查 > 红细胞

6 取材

血液

7 血红蛋白抗碱试验的原理

Hb F和Hb Bart抗碱变性能力比Hb A强,在血红蛋白溶液中加入碱性物质,作用1min后,用半饱和硫酸铵终止反应,将变性的Hb A等沉淀,过滤后取滤液用比色方法测定未变性的血红蛋白含量,求得Hb F或Hb Bart之含量。

8 试剂

(1)0.083mol/L NaOH或KOH(pH12.7)溶液:用摩尔溶液稀释,标定校正后,置于4℃冰箱贮存。若有沉淀或混浊,应弃去不用。

(2)酸性半饱和硫酸铵溶液。取硫酸铵400g加蒸馏水500ml,于37℃水浴24h,不时搅拌,便达到过饱和,再冷至25℃搅拌一次,使过饱和的硫酸铵析出沉淀,上清液为饱和溶液。

取饱和硫酸铵溶液      400ml

11mol/L  HCl(应标定)  20ml

混匀。pH为8.2。

9 操作方法

(1)取0.083mol/L KOH 1.6ml加于试管中,置25℃水浴。

(2)待5~10min后加0.1ml血红蛋白溶液,立即开动秒表,用吸管洗6次,轻轻摇动试管10s。此步操作需在20s内完成。

(3)准确计时60s后,加入酸性硫酸铵液3ml,立即颠倒混匀6次。

(4)用滤纸过滤,取滤液在540nm波长下比色,以蒸馏水作空白,读取抗碱血红蛋白的吸光度。

(5)另取血红蛋白溶液0.02ml,加入5ml水中,混匀,按上述方法比色,读出总Hb的吸光度。

(6)结果计算:抗碱Hb管的稀释度为1∶51,总Hb管的稀释度为1∶251,其比值为51∶251=0.203,故计算式如下:

10 正常值

见表1。

11 化验结果临床意义

(1)增多:α、β、A2F、γ-地中海贫血(δ-地中海贫血不增多)。

(2)轻度增多:急性白血病、再生障碍性贫血、红白血病、恶性肿瘤。

12 附注

(1)如滤液呈淡黄或淡红色,可能为血红蛋白含量高,但首先应检查所用碱液及酸性半饱和硫酸铵的质量,因碱液的碱度不足或酸性半饱和硫酸铵的浓度和酸度不足皆可导致滤液不呈水样透明而呈淡黄,淡红等颜色。使结果错误地增高。

(2)碱液浓度必须准确,其pH必须大于12,校准后最好是小分装密封保存,使用量和作用时间都必须十分准确。

(3)酸性半饱和硫酸铵必须准确配制,其pH应为3.0,最好小批量分装。

(4)过滤用纸应为化学试验用品。型号必须稳定,滤液必须清晰透明,否则应重新过滤1次或离心沉淀。

(5)试验所用试管,吸管等仪器不可沾污酸碱。

(6)每次试验最好重复做两份。

13 相关疾病

再生障碍性贫血

大家还对以下内容感兴趣:

用户收藏:

特别提示:本站内容仅供初步参考,难免存在疏漏、错误等情况,请您核实后再引用。对于用药、诊疗等医学专业内容,建议您直接咨询医生,以免错误用药或延误病情,本站内容不构成对您的任何建议、指导。