血红蛋白F细胞酸洗脱染色试验_化验及医学检查、血液检查、红细胞

1 拼音

xuè hóng dàn bái Fxì bāo suān xǐ tuō rǎn sè shì yàn

2 概述

HbF的抗碱性及抗酸性都较正常血红蛋白（HbA）为强，因此，血片经酸洗脱后，含HbF的红细胞因抗酸而不被脱色，能被伊红染成红色。含HbA或只含及少量HbF的红细胞则被酸洗脱，仅留下红细胞膜的空影。

3 别名

HbF酸洗脱试验

4 血红蛋白F细胞酸洗脱染色试验的医学检查

4.1 检查名称

血红蛋白F细胞酸洗脱染色试验

4.2 分类

临床血液检查 > 红细胞

4.3 取材

血液

4.4 血红蛋白F细胞酸洗脱染色试验的测定原理

Hb F除抗碱能力强外，抗酸能力也较Hb A为强。因此，将血片在酸性缓冲液中浸洗后，只有含Hb F的红细胞不被洗脱而染色。

4.5 试剂

（1）80% 乙醇固定液。

（2）0.1mol/L柠檬酸：取无水柠檬酸9.6g，溶解于少量蒸馏水中。待完全溶解后。加蒸馏水至500ml。

（3）0.2mol/L磷酸氢二钠：取Na₂HPO₄·12H₂O 35.81g溶于少量蒸馏水中，待完全溶解后，加水至500ml。

（4）磷酸盐柠檬酸盐缓冲液pH3.3±0.2

0.2mol/L磷酸氢二钠 12.3ml

0.1mol/L柠檬酸 37.7ml

（5）苏木素染色液：取1g苏木素溶于10ml无水乙醇中，取2g明矾溶于200ml蒸馏水中，混合上述二液，煮沸后即加氧化汞0.5g，热至染液变成深紫色，随即放入冷水中，使之变凉，次日过滤。

（6）伊红染液1%伊红Y溶液200ml中加1滴冰乙酸。

4.6 操作方法

（1）按常规法制备血涂片，自然干燥1h，再用80%乙醇固定5min（柠檬酸盐抗凝血在4℃冰箱内保存3天可以使用），水洗待干。

（2）将固定后血膜放37℃，pH3.3的磷酸盐柠檬酸缓冲液中，保温浸洗5min。

（3）冲洗干燥后，在苏木素染色液中染白细胞1min，以免误认为阳性红细胞。

（4）水洗后，用伊红染液染红细胞1min，再水洗，干后镜检。

（5）在油镜下，含有Hb F的红细胞被伊红染液染成鲜红色，为阳性红细胞；仅留下淡影的细胞膜为阴性红细胞。计数1000个红细胞中阳性红细胞所占百分率。

4.7 正常值

着色细胞：0～＜1%。

新生儿： 2/3。

4.8 化验结果临床意义

（1）多数红细胞染成红色：β-地中海贫血重症型。

（2）少数红细胞染成红色：β-地中海贫血轻症型、再生障碍性贫血、溶血性贫血。

（3）染色深：遗传性HbF增多症纯合子型。

（4）染色浅：遗传性HbF增多症杂合子型。

（5）染色深浅不均匀：β-地中海贫血轻症型。

4.9 附注

（1）血片制成后，在2h内染色，否则可出现假阳性反应。要求涂片薄，细胞平铺分散。

（2）缓冲液的pH、温度、洗脱时间应严格控制，否则影响测定结果。