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纤维蛋白溶酶

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1 纤维蛋白溶酶概述

纤维蛋白溶酶(Plasmin,PL)是PLG在其激活物(PA)的作用下产生的,是导致纤维蛋白降解最直接的因子。生理状态下,PL与PLG、t-PA等结合在血管内皮细胞表面,一旦有少量纤维蛋白形成,PLG被激活为PL,后者则在局部将纤维蛋白降解,以避免血栓形成,保证血流通畅。

2 纤维蛋白溶酶医学检查

2.1 分类

血液生化检查 > 酶类测定

2.2 原理

纤维蛋白可与染料刚果红结合成不溶于水的复合物,被检血浆中的纤维蛋白溶酶可水解纤维蛋白释放出刚果红,在酸性条件下刚果红显蓝色,其颜色的深浅与血浆纤维蛋白溶酶活性成正相关

2.3 试剂

(1)硼酸缓冲液(pH7.8):硼酸6.184g,KOH 7.456g,蒸馏水500ml,0.1mmol/L

NaOH溶液53ml,加蒸馏水至1000ml。

(2)1g/L刚果红溶液:刚果红0.5g加生理盐水500ml。

(3)1mol/L HCl溶液。

(4)50g/L CaCl2溶液。

(5)基质粉制备:血浆与生理盐水、50g/L CaCl2溶液按10∶100∶5比例混匀,37℃水浴60min,用玻棒将纤维蛋白全部卷出,用生理盐水洗涤两次后,挤干,置56℃温箱中烘干备用。取10g纤维蛋白,加1g/L刚果红溶液100ml,37℃水浴中不断搅拌,保温30min,3000r/min离心10min,弃去上清液,用pH7.8硼酸缓冲液反复洗涤至上清无色为止,将与刚果红结合的纤维蛋白置56℃温箱烘干备用。

(6)分光光度计。

2.4 操作方法

(1)按表1操作:

(2)离心上述溶液,取上清,分光光度计600nm波长比色,空白调0,测其吸光度值,查标准曲线即可得出纤维蛋白溶酶活性。

附注:

检测前禁止服用抗凝药物,如阿斯匹林等。

2.5 正常值

纤维蛋白溶酶活性:85.55%±27.83%

(发色底物法)

21.1~48.9U

(刚果红显色法)

2.6 临床意义

(1)运动对纤溶系统的影响:Weiss等为探讨运动程度(中、重)与凝血、纤溶系统的关系,检测了12例健康男性在骑踏车1h前后反映血浆凝血酶、纤维蛋白和纤维蛋白溶酶形成的指标。结果显示,在中等度的运动中t-PA抗原从3.7±0.5ng/ml升高到14.6±1.8ng/ml,P<0.01,PAP从2.1±0.3nmol/L升高到4.2±0.7nmol/L,P<0.01。然而,血浆凝血酶原片段1+2(pro-thrombin fragment1+2,F1+2)、凝血酶-抗凝血酶Ⅲ复合物(thrombin-antithrombinⅢ complexes,TAT)和纤维蛋白肽A(fibrin-opeptide A,FPA)却无明显变化。重度运动后,t-PA和PAP的水平分别超过正常高限的2.5倍及2倍,而血浆中F1+2、FAT、FPA却在正常范围内明显增高(P值分别<0.01、<0.05、<0.01)。研究认为:在健康的年轻个体中,运动导致凝血活性增高的同时也引起纤溶活性增高,中等强度运动仅导致纤维蛋白溶酶形成,而重强度运动时纤维蛋白溶酶的形成超过了凝血酶和纤维蛋白的形成。

(2)在纤维蛋白溶解亢进症的意义:机体内纤溶系统活性是由于纤维蛋白溶酶出现的结果,而纤维蛋白溶酶在血中的活性是由释放入血的激活物而调控。因此各种原因导致的纤溶亢进症,无论是先天性还是后天获得性,无论是原发还是继发性,最终结果是纤维蛋白溶酶生成过多而导致纤维蛋白溶酶活性增强。上海瑞金医院肝病患者纤维蛋白溶酶的检测结果显示:急性肝炎、慢性肝炎和肝硬化病人血浆纤维蛋白溶酶明显升高,表明此时患者纤维蛋白溶酶活性增强。

(3)在血栓前状态及血栓性疾病中的意义:血栓前状态及血栓性疾病中常由于t-PA活性及含量减低和PAI-1活性增高而导致纤维蛋白溶酶活性(PL)减低。缺血性脑病患者α2-AP水平降低而纤维蛋白溶酶-α2-AP复合物(PAP)增高,有资料表明,缺血性脑病患者PAP水平(1.09±0.45mg/L)明显高于正常对照组(0.59±0.13mg/L)。血栓性疾病,如急性心肌梗死肺梗死、深静脉血栓肾病综合征DIC等引起的继发性纤溶亢进时PAP水平增高。Oikawa等对42例肾病综合征患儿检测了血浆PAP(PL-α2-AP)和D-Dimer等,发现在肾病综合征的活动期PAP(0.67±0.48μg/ml)及D-Dimer(154±105ng/ml)水平与其静止期(PAP 0.43±0.18μg/ml,D-Dimer 72±48ng/ml)比较具有显著性差异(P<0.01,P<0.001)。尽管临床上尚未发现血栓形成,但PAP、D-Dimer水平升高却能反映肾病综合征时的血液高凝状态。

(4)血栓性疾病溶栓治疗中的意义:在血栓性疾病如急性心肌梗死、肺栓塞静脉血栓形成等应用溶栓药物(如链激酶尿激酶、t-PA或重组t-PA等)进行溶栓治疗时,由于外源性纤维蛋白溶酶原激活物的作用使纤维蛋白溶酶原转变为纤维蛋白溶酶,由此而降解纤维蛋白(原)达到溶解血栓的目的。因此溶栓后纤维蛋白溶酶活性增高。纤维蛋白溶酶-α2-AP复合物(PAP或PIC)增高,有报道α2-AP与纤维蛋白溶酶形成的复合物(PAP)是可以灵敏地反应纤溶系统激活的分子标志物。应用溶栓药物治疗时血浆PAP可明显增高。

2.7 相关疾病

FA     肺栓塞     肝硬化     急性心肌梗死     静脉血栓     静脉血栓形成     肾病综合征     血栓形成

3 岩栖蝮毒素·纤维蛋白溶酶

3.1 分子中文名

纤维蛋白溶酶

3.2 分子英文名

Fibrinolytic enzyme, FLE

3.3 蛋白质序列

参考文献:

于德涵, 赵文阁,王广慧, 李贺. 2011. 岩栖蝮蛇毒纤维蛋白溶酶基因克隆序列分析及真核表达载体的构建与鉴定[J]. 中国农学通报, 27(14): 17-21.

3.4 生物学活性

高溶栓活性和低溶血毒性的天然优势特性。

参考文献:

Swenson S, Markland JFS 2005. Snake venom fibrin (ogen) olytic enzymes[J], Tbxicon, 45:1021-1039.

Leonardi A, Fox J, W, Trampu?-Bakija A, Kri?aj I. 2007. Ammodytase, a metalloprotease from  Vipera ammodytes ammodytes venom, possesses strong fibrinolytic activity. Toxicon, 49(6): 833-842.

3.5 可能的中毒症状

短时间出现烧灼胀裂样剧痛,肢体肿胀明显,扩展迅速,伤口附近可出现水泡、血泡。全身症状很快出现,常见有全身不适、畏寒发热胸闷气促等。重者可出现全身广泛性出血,如齿龈出血、血尿、皮下瘀斑等,甚至休克

参考文献:

中国中西医结合学会急救医学专业委员会蛇伤急救学组. 2002 .毒蛇咬伤的临床分型及严重程度评分标准(修订稿)[J]. 中国中西医结合急救杂志, 9(1):19.

3.6 可能的治疗方案

早期治疗(被咬后4小时前):局部近心端大面积包扎(被咬后30min前),切开冲洗,尽快吸出毒液,烧灼伤口(野外无条件下),应用抗眼镜蛇毒血清胰蛋白酶局部注射及环封,局部切开减压,引留排毒和中草药治疗为主。中期治疗(被咬伤后4小时至需要手术修复局部组织坏死缺损创面日期)控制感染,消除局部的坏死组织、换药,促进肉芽组织生长为主,根据局部组织的坏死和缺损情况、制定相应的方案。后期治疗(手术日至治愈为止)主要为手术修复局部组织坏死照成的局部组织缺损。

参考文献:

中国中西医结合学会急救医学专业委员会蛇伤急救学组. 2002. 毒蛇咬伤的临床分型及严重程度评分标准,修订稿. 中国中西医结合急救杂志, 9(1): 19.

3.7 相关物种

岩栖蝮

3.8 数据来源

中国科学院昆明动物研究所

4 纤维蛋白溶酶药品说明书

4.1 药品名称

纤维蛋白溶酶

4.2 英文名称

Fibrinolysin

4.3 纤维蛋白溶酶的别名

纤溶酶;纤维蛋白溶解酶溶血酶;Plasmin;Actase;Serum Tryptase;Throblysin

4.4 分类

血液系统药物 > 纤维蛋白溶解药

4.5 剂型

5万U。

4.6 纤维蛋白溶酶的药理作用

纤维蛋白溶酶是由提纯的链激酶激活纤维蛋白溶酶原而得,是一种蛋白水解酶。纤维蛋白溶酶可使纤维蛋白分解成纤维蛋白降解物,而使纤维蛋白溶解。

4.7 纤维蛋白溶酶的药代动力学

(尚不明确)

4.8 纤维蛋白溶酶的适应

用于血栓性疾病和抗凝疗法辅助剂。

4.9 纤维蛋白溶酶的禁忌

凝血障碍、出血状态、严重肝肾功能不全、麻醉和手术后忌用。

4.10 注意事项

(尚不明确)

4.11 纤维蛋白溶酶的不良反应

发热、出血、恶心呕吐、心动过速、低血压眩晕头痛、肌痛、黄疸过敏反应等。

4.12 纤维蛋白溶酶的用法用量

静脉点滴,剂量取决于临床反应,一般每小时5万~10万U,每天用1~6h,连用3~4天,并密切监测凝血功能。

4.13 药物相互作用

(尚不明确)

4.14 专家点评

纤维蛋白溶酶是由提纯的链激酶激活纤维蛋白溶酶原而得,是一种蛋白水解酶。可使纤维蛋白分解成纤维蛋白降解物,而使纤维蛋白溶解。主要用于血栓栓塞性疾病,也可作为抗凝血药治疗的辅助药。

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  • 评论总管
    2019/10/19 1:17:45 | #0
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本页最后修订于 2016年9月22日 星期四 22:15:45 (GMT+08:00)
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