1 拼音
wèi yè rǔ suān tuō qīng méi tóng gōng méi
2 英文参考
Gastric juice lactate dehydrogenase isoenzyme
3 概述
乳酸脱氢酶有5种同工酶形式，即LDH1、LDH2、LDH3、LDH4、LDH5，可用电泳法进行分离。人体心肌、肾、红细胞以LDH1和LDH2为最多。肝和横纹肌则以LDH4和LDH5为主。脾、胰、甲状腺、肾上腺中LDH3较多。乳酸脱氢酶同工酶是观察心肌疾病、肝胆胃疾病等的指标之一。
4 胃液乳酸脱氢酶同工酶的医学检查
4.1 检查名称
胃液乳酸脱氢酶同工酶
4.2 分类
体液和排泄物检查 > 胃液和十二指肠引流液检查/胃液乳酸脱氢酶及同工酶
4.3 取材
胃液
4.4 胃液乳酸脱氢酶同工酶的测定原理
根据LDH各同工酶一级结构和等电点的不同，在一定的电泳条件下，使其在支持物上分离。以乳酸钠为底物，氧化型辅酶Ⅰ（NAD＋）作氢受体，LDH催化乳酸脱氢，生成丙酮酸，并使NAD＋还原为NADH。酚嗪二甲酯硫酸盐（PMS）将NADH的氢传递给氯化碘代硝基四唑（INT），使其还原成紫红色甲化合物。因此，有LDH活性的区带即显紫红色，其颜色深浅与酶活性成正比。由阳极至阴极其区带依次为LDH1、LDH2、LDH3、LDH4及LDH5。因电渗作用，LDH5位于加样槽之阴极端。
4.5 试剂
（1）巴比妥缓冲液（pH8.6，μ＝0.075）：称取巴比妥钠15.458g，巴比妥2.768g，溶于蒸馏水中，加热助溶，冷后稀释至1L。电泳用。
（2）巴比妥-盐酸缓冲液（pH8.2，0.082mol/L）：称取巴比妥钠17.0g，溶于蒸馏水中，加1mol/L盐酸24.6ml，蒸馏水稀释至1L。
（3）10mmol/L乙二胺四乙酸二钠：称取EDTA·Na2372mg，溶于蒸馏水中，稀释至100ml。
（4）5g/L缓冲琼脂糖凝胶：称取琼脂糖0.5g，加入50ml pH8.2巴比妥-盐酸缓冲液中，再加入EDTA·Na2溶液1.2ml及蒸馏水48.8ml，隔水煮沸溶解，不时摇匀，趁热分装于大试管中，待冷后横置冰箱备用。
（5）8g/L缓冲琼脂糖凝胶：称取琼脂糖0.8g，加入50ml pH8.2巴比妥-盐酸缓冲液中，再加入EDTA·Na2溶液2ml及蒸馏水48ml，配法同上。
（6）底物-显色液：
①DL-乳酸溶液：取85%乳酸（AR）2ml，用1mol/L氢氧化钠调至中性（约用1mol/L氢氧化钠23.6ml）。
①1g/L PMS：称取50mg PMS，加蒸镏水50ml溶解。
③10g/L AND＋：称取100mg AND＋溶于10ml新鲜蒸馏水中。
④1g/L INT：称取30mg INT，溶于30ml蒸馏水中。
以上试剂须贮棕色瓶中，置4℃冰箱保存。除10g/L NAD＋外，均可保存3个月以上。
底物-显色液：临用前取上列各试剂按下列比例混合而成。
A.液4.5ml
B.液1.2ml
C.液4.5ml（或AND＋45mg蒸馏水4.5ml）
D.液12.0ml
将以上4液混匀，共22.2ml。
（7）固定漂洗液：按乙醇∶水∶冰醋酸＝14∶5∶1（V/V/V）的比例混合，或按95%乙醇∶冰醋酸＝98∶2的比例混合。
4.6 操作方法
（1）制备凝胶玻片：取5g/L缓冲琼脂糖凝胶一管，置沸水浴中加热融化。吸取1.2ml融化的凝胶液，均匀地铺于拭净的7.5cm×2.5cm玻片上，待冷却凝固后，于凝胶板阴极端约1～1.5cm处挖槽，用滤纸吸去槽中水分。
（2）加样：用微量进样器加血清约40μl于槽内。
（3）电泳：电压75～100V，电流8～10mA/片，电泳30～40min，待血清白蛋白部分泳动3～4cm即可。
（4）显色：于电泳结束前5～10min，将底物显色液与沸水浴融化的8g/L缓冲琼脂糖凝胶按4∶5的比例混合，制成显色凝胶液，置热水（约50℃）中备用（注意避光）。
中止电泳后，取下凝胶玻片置铝盒内，立即用滴管吸取显色凝胶液约1.2ml，迅速滴于凝胶玻片上，使其自然铺展覆盖完全，待显色凝胶凝固后，加盖避光，置37℃水浴中，使铝盒浮于水面保温1h。
（5）固定和漂洗：取显色的凝胶玻片，浸入固定漂洗液中20～40min，至背景无黄色为止，再移至蒸馏水中漂洗多次，每次10～15min。
4.7 正常值
36～253U。
4.8 化验结果临床意义
（1）胃癌：LDH升高2～3倍，LDH5＞LDH4＞LDH3＞LDH2＞LDH1。
（2）萎缩性胃炎（中度或重度）伴肠上皮化生：LDH4＞LDH5＞LDH3＞LDH2＞LDH1。
4.9 附注
（1）同血清LDH。
（2）标本切忌溶血。
4.10 相关疾病
胃癌