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唾液白蛋白

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1 拼音

tuò yè bái dàn bái

2 英文参考

Saliva albumin

3 概述

唾液中的蛋白质以黏蛋白为主,其他蛋白质含量较低。迄今已发现十余种唾液蛋白质和酶可作为遗传标记物,对人类遗传学和法医学研究具有一定意义。

4 唾液白蛋白的医学检查

4.1 检查名称

唾液白蛋白

4.2 分类

体液排泄物检查 > 唾液与泪液检查

4.3 取材

唾液

4.4 唾液白蛋白的测定原理

激光散射光系指一定波长的光通过溶液时遇到抗原-抗体复合物,光线被折射发生偏转。偏转角度可以从0~90°,这种偏转的角度可因光线波长和离子大小不同而有所区别。散射光的强度与抗原抗体复合物的量成正比,同时也和散射夹角成正比,和波长呈反比。测定方法有终点法和速率法两种。

4.5 试剂

(1)稀释液:0.2mol/L Na2HPO4 63ml,0.2mol/L NaH2PO4 37ml,0.5mol/L NaCl 100ml,NaN21.0g,蒸馏水加至1000ml,经0.45μm微孔滤膜过滤,分装,4℃保存备用。

(2)反应液:聚乙二醇PEG分子量6000)4.6g溶于稀释液中,略微加热助溶,补足100ml,用0.45μm微孔滤膜过滤分装。4℃保存备用。

(3)校正唾液:自制校正唾液时,可根据ICS校正卡上所列各种蛋白成分的含量,应用国产标准参考唾液,根据公式C1V1=C2V2换算成校正卡上含量,略作调正。使与校正卡上含量一致,然后过滤分装,低温保存。

(4)质控唾液:可将数十份正常人唾液混合,加1g/L NaN3,直接用C或D稀释度即可。

(5)抗血清:可用国内特异性好,亲和力强,效价高的抗血清,选择最适稀释度,用0.45μm微孔滤膜过滤。以已知含量参考血清作为标准抗原,用ICS手动或自动方式测出该成分的含量,使与校正卡上所列含量一致,然后分装4℃保存。

4.6 操作方法

(1)自动速率散射比浊法:以Beckman ICS-Ⅱ型为例,可用进口配套试剂,也可用自制试剂,经校正后使用,按照操作说明书进行。现以免疫球蛋白G(IgG)为例。

①先用电脑稀释器将待测样本稀释至1∶36或1∶216。

②将待测的IgG校正电脑卡及IgG的抗血清电脑卡先后插入仪器内,有关的试验参数及标准曲线即自动记录在微处理机中。

③将带有搅拌棒的600μl反应液的反应管插入反应室中。

④用42μl加样器将欲测定的稀释标本和IgG抗血清分别注入反应管中,透过显示屏,于60s内自动显示IgG的含量。

(2)手动散射比浊测定法:由于自动试剂受到许多限制,手动操作可替代自动试剂,对于微量蛋白质测定的继续开发是十分重要的。

①抗原制备:为了确定抗血清的使用比例,须确定最适合的抗原含量。ICS最佳检测范围应是0.2~20mg/L之间,最适抗原中点浓度为2mg/L(指反应管中的终浓度)。其计算公式为:

稀释倍数=

例如:参考唾液IgG值为12g/L时代入公式则

将参考唾液用稀释液稀释后,备用,并以同样方法配制其他浓度,选择多点,制作校正曲线。该样品应清澈透明,其本底速率值(RU)不应超过50,散射值(SU)不应超过30,才为合用。

②抗血清制备:取特异性强。效价高的抗血清进行适当稀释,经0.45μm微孔滤膜过滤后,选择最适增益卡(M11、M22、M33、M44),以已知含量的参考血清作为标准抗原,用手动方式将ICS专用抗血清与自制抗血清对同一抗原,测其速率单位(RU)。以自制抗血清的RU除以Beckman抗血清的RU,即为自制抗血清的稀释倍数。如上海生物制品研究所生产的抗血清(批号890201),其抗IgG 1∶15稀释,抗IgA 1∶6稀释,抗IgM 1∶21稀释较佳。

③参考曲线的制备:将已知抗原稀释成不同浓度,分别与抗血清反应,测定的RU值为纵坐标,相应的抗原浓度为横坐标、划曲线。

④标本测定:所有体液皆可测定,一般血清标本可按反应管中最佳检测浓度稀释。脑脊液(CSF)可不作稀释,直接测定,测得RU值查标准曲线所得mg数乘以稀释倍数即为标本测量值。

(3)手动速率散射比浊法:表1。

完成上面操作后,即完成一次样品测定,另测标本时再重复6~10步骤操作。取得的速率值查校正曲线,即得未知标本浓度。

4.7 正常值

<10mg/L。

4.8 化验结果临床意义

唾液腺炎症肿瘤等时,血液唾液屏障被破坏,血浆白蛋白蛋白进入唾液,白蛋白增高。口眼干燥综合征(Sjogren综合征患者唾液白蛋白增高与腺体破坏程度呈正相关

4.9 附注

(1)当60g/L的白蛋白标准与BCG结合后,溶液光径1cm,在630nm处测定吸光度应为0.811±0.035,如达不到此值,表示灵敏度较差。

(2)此法测定正常血清标本的批间变异系数为6.3%左右。

(3)试剂中聚氧化乙化乙烯月桂醚也可用其他表面活性剂代替,如吐温-20等,用量为2ml/L。

相关文献

开放分类:化验及医学检查体液和排泄物检查唾液与泪液检查
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  • 评论总管
    2019/10/22 2:55:42 | #0
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本页最后修订于 2013年3月3日 星期日 16:38:47 (GMT+08:00)
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