特异性脂酶染色

目录

1 拼音

tè yì xìng zhī méi rǎn sè

2 英文参考

Specific Esterase Stain

3 名称

特异性脂酶染色

4 分类

血细胞化学染色

5 英文名

Specific Esterase Stain

6 概述

阳性反应几乎仅出现在各阶段的粒细胞中,比POX更具特异性,AS-DCE又称为粒细胞特异性酯酶。粒细胞内的氯醋酸AS-D萘酚酯酶水解基质液中氯醋酸AS-DCE萘酚后产生萘酚AS-D,后者再与稳定的重氮盐偶联,生成不溶性红色沉淀,定位于胞质中。

7 原理

氯乙酸AS-D萘酚被细胞内特异性酯酶(SE)水解,产生AS-D萘酚,后者与重氮盐(坚牢紫酱GBC)偶联,生成不溶性红色沉淀,定位于胞浆中。

8 试剂

(1)甲醛-甲醇固定液:10%甲醛与甲醇按1∶9混合。

(2)Veronal乙酸缓冲液:

甲液:乙酸钠(含3H2O)    1.94g

巴比妥钠          2.94g

蒸馏水            加至100ml

乙液:0.1mol/L盐酸:取盐酸(比重1.19)0.85ml,加蒸馏水至100ml。

取甲液50ml,乙液45ml,再加蒸馏水135ml,用1mol/L盐酸调整pH至7.5~7.6。

(3)作用液:

氯乙酸AS-D萘酚    10mg

丙酮               0.5ml

蒸馏水             5ml(使溶解)

Veronal乙酸缓冲液  5ml

坚牢紫酱GBC        10mg

溶解,不必过滤立即染色,一次用完。

9 操作方法

(1)固定:新鲜干燥涂片,用甲醛-甲醇固定液固定30s,或用甲醛蒸气薰5~10min。

(2)水洗,凉干。

(3)放入作用液,37℃ 30min。

(4)水洗,苏木素染液复染l~2min。

(5)水洗,晾干,镜检。

附注:

染色温度以38~39℃,此时酶反应强而无明显扩散,并且萘酚和坚牢紫酱GBC较低温时易溶解。

10 正常值

阳性反应为红宝石色颗粒,定位于胞浆中。

11 临床意义

特异性酯酶又称粒细胞酯酶,主要分布在粒细胞和肥大细胞内。原粒细胞为阴性或弱阳性反应,早幼粒细胞和中幼粒细胞呈强阳性反应,分叶核粒细胞酶活性减弱。嗜酸性粒细胞呈阴性,嗜碱性粒细胞、单核细胞和肥大细胞呈阴性或弱阳性反应。巨核细胞、血小板、浆细胞、红系细胞及淋细胞呈阴性。

本染色法主要用于鉴别急性白血病类型。急性粒细胞白血病时,原粒细胞和幼稚粒细胞均呈一定程度阳性,成熟粒细胞酶活性下降。急性单核细胞白血病和急性淋巴细胞白血病时呈阴性。急性粒-单核细胞白血病时,部分白血病细胞(原粒和早幼粒细胞)呈阳性,有些白血病细胞(原单核和幼单核细胞)呈阴性。

12 相关疾病

单核细胞白血病、急性淋巴细胞白血病

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