痰液细胞学检查

目录

1 拼音

tán yè xì bāo xué jiǎn chá

2 概述

痰脱落细胞学检查是诊断某些呼吸系统疾病的重要方法。方法简便,且不给病人带来任何痛苦,可反复检查。尤其诊断肺癌阳性率可达80%以上,其中诊断小细胞肺癌阳性率90%、鳞癌阳性率82.2%、腺癌阳性率69.4%、未分化癌阳性率71.4%,诊断假阳性率1.8%。中心型肺癌阳性率高于周边型肺癌,分别为82.9%和62.8%。痰细胞学检查也可作为判断治疗疗效或早期复发的指标之一。但传统的痰细胞学检查易受取材、保存、制片、染色及检查人员素质等因素的影响,灵敏度仅为20%~30%,因此,改进痰细胞学的检查方法是非常重要和必须的。

3 操作名称

痰液细胞学检查

4 禁忌证

采集痰标本没有禁忌证,但如果病人在行支气管镜检查之后,立即进行痰细胞学检查,往往会混有一些嗜酸性的细胞碎片和炎性细胞,而误认为高分化鳞癌。最好在支气管镜检查5~10天后再行痰细胞学检查

5 准备

痰标本采集,向患者介绍检查目的和方法,取得患者的合作。

6 方法

1.痰标本采集。要求患者清晨收集肺深部咳出的痰。医务人员必须认真指导患者如何从肺深部咳痰,咳痰前不能吃任何东西,最好先用清水漱口3次,以去除口腔杂物。之后做2~3次深呼吸,再用力咳嗽,将肺深部的痰咳出,遗弃第1口痰,留第2、3、4口痰做标本。如患者咳痰困难,可用3%~5%氯化钠溶液雾化吸入,诱导痰液排出。目前多数医院痰留置于干净的玻璃器内,或置于95%乙醇内。留置器皿内的痰应于1~2h内送化验室。如不能及时送检,则必须保存在4℃冰箱内。涂片要由有经验的技术员进行,选择带血丝的痰或灰白色痰块涂片,涂片要均匀,并立即置于固定液内,再用巴氏或苏木素和伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色。置于乙醇的痰标本可送病理科,进行石蜡包埋后染色。

2.痰液收集方法已有很快进展,1963年Saccomanno建立了保存痰液的方法,已被广泛应用于临床及肺癌筛查中。2000年协和医院对Saccomanno法进行了相应改良,加入了解黏剂,使细胞学检查阳性率有明显提高。但长期保存有17.7%标本受损。

我院痰储存固定常用50%乙醇和2%多聚乙醇的混合液。每个收集管内置固定液20ml,可留取7~8口痰,便于进行多项目检查。已留痰的收集管立即保存于4℃冰箱。解黏处理这一步非常重要,否则将收集不到纯脱落细胞,进行细胞形态及痰基因分析,目前解黏处理常用美国PROMEGA公司生产的DTT(DL Dithiothreitol),工作浓度为5%,DTT可打断黏蛋白之间的二硫键连接,而不损伤细胞。

20世纪90年代中期发展的液基细胞学与计算机辅助细胞学诊断系统(CCT)的应用,可使痰细胞学检出的阳性率达97.1%。液基细胞学包括薄层细胞学检测系统(TCT)和自动细胞学检测系统(LCT),均已获美国FDA批准,应用于临床。可将痰标本中的黏液、血液和炎性细胞分离,收集痰脱落细胞制成薄片,用于细胞学检测,使痰的采集、制片、染色等步骤实现标准化和自动化,并应用计算机技术,对痰涂片给予分析,提高了精确度。

3.留取痰次数。一般认为送检4~6次,据报道1、2、3、4次的阳性率分别为47.2%、72.7%、84.5%、91.5%。当晚期中心型肺癌支气管完全阻塞或合并气道感染时,肿物表面有多量坏死物及脓痂,痰细胞学往往呈阴性,待抗炎、化学治疗或放疗后,气道稍通畅,继续不断多次留痰,有可能得到细胞学阳性诊断。

4.痰检肺癌相关基因的分子生物学。目前痰脱落细胞分子生物学检查有广阔的发展前途,北京协和医院已进行免疫标记技术在肺癌筛查中应用研究。

(1)不均一核糖蛋白(heterogeneous nucleal ribonucleoprotein,hnRNP)A2/B1:是一种RNA结合蛋白,在肺癌组织中表达增高,痰脱落细胞阳性者表达为57%。肺癌高危人群监测中已证实,痰脱落细胞呈鳞状化生和不典型增生时有hnRNPA2/B1表达。国外报道肺癌病人在临床确诊前2年收集的痰标本中已有hnRNPA2/B1阳性表现。

(2)痰P53基因突变测定:应用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)单链多肽性(single-strand comformation polymorphism,SSCP)银染肺癌痰检出率55.5%,诊断灵敏度55.56%,特异性98.25%。并有1例患者于临床诊断肺癌前1年,痰脱落细胞P53点突变已呈阳性;变性高压液相色谱法(denaturing high performanle liquid chromatography,DHPLC)可检测痰细胞Rb2/P130及P53突变,两者结合特异性100%,灵敏度51.43%。

7 注意事项

1.痰标本应尽快涂片,在室温下,可以保存2~4小时,在冰箱内可保存两天;痰液量一般以2ml~3ml(2~3口痰)为宜。

2.采痰时应采用内面涂蜡的痰盒,可防止痰液被吸收而难于挑痰制片。

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