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糖化血清蛋白

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1 拼音

táng huà xuè qīng dàn bái

2 英文参考

Glycosylated Serum Protein

3 概述

糖化血清蛋白为血清葡萄糖白蛋白及其他血清蛋白分子N末端的氨基发生非酶促糖化反应,形成高分子酮胺结构。因为血浆蛋白尤以白蛋白半衰期短(19天),因此可反映糖尿病治疗的较近期效果,了解糖尿病控制1~2周的血糖水平。据报道糖化血清蛋白与GHb相关性良好。

4 英文名

Glycosylated Serum Protein

5 糖化血清蛋白

5.1 分类

血液生化检查 > 蛋白质测定

5.2 原理

糖化血清蛋白能在碱性环境中与硝基四氮唑蓝(NBT)发生还原反应,生成甲物以1-脱氧-1-吗啉果糖(DMF)为标准参照物,进行比色测定。

5.3 试剂

(1)0.1mol/L碳酸盐缓冲液(pH10.8):无水碳酸钠9.54g,碳酸氢钠0.84g,溶于蒸馏水并稀释至1000ml。

(2)0.11mol/L NBT试剂:称取氯化硝基四氮唑蓝100mg,用上述缓冲液溶解并稀释至1000ml,置冰箱保存,至少可稳定3个月。

(3)4mmol/L DMF标准液:称取DMF99.6mg,溶于40g/L牛血清白蛋白溶液100ml中。

5.4 操作方法

测定管加待检血清(血浆)0.1ml,空白管加蒸馏水0.1ml,各加37℃预温的NBT试剂4m1,混匀,置37℃准确水浴15min取出,流水冷却(低于25℃)。冷却后15min内于分光光度计波长550nm,10mm光径比色杯以空白调零,读取测定管吸光度。从标准曲线查得结果。以果糖胺mmol/L报告。

附注:

(1)DMF可以自己合成,方法是称取无水D-葡萄糖90g,吗啡啉58g,加蒸馏水1L,溶解后在60~70℃水浴上搅拌,开始为黄色糊状物,后颜色逐渐加深。20min后,移去水浴,缓慢地加入丙二酸18g,整个加入过程需在10min以上。再置水浴并使温度上升至80℃,不断搅拌,颜色由黄绿色转变为琥珀色。10min后,加无水乙醇70ml,维持75℃30min,再加入丙酮70ml。此时可见到结晶析出,此即为DMF。放4℃冰箱过夜。收集结晶,并用无水乙醇重结晶3次,使产物脱色纯化,干燥备用。熔点146~147℃,分子式C10H19O6N,分子量249D。

(2)pH值、反应温度、反应时间对本试验影响较大,必须严格控制。

(3)血清蛋白经非酶促糖化反应可形成酮胺结构。DMF在适当的pH值及温度条件下,经过结构重排也可以由氧环式结构形成1-脱氧-1-氨基-2-酮基的酮胺结构。因此用它作为标准参照物是合理的。

(4)用定值冻干糖化血清蛋白作标准,测定结果更稳定。因为用不同标准物时所测得结果不完全一致,最好建立实验室的参考值

5.5 正常值

1.9±0.25mmol/L。

5.6 临床意义

(1)由于血清蛋白半衰期较短,本试验可有效反映患者过去1~2周内血糖的水平。

(2)本试验不受临时血糖浓度波动影响,故为临床糖尿病人的诊断和较长时间血糖控制水平的研究,提供了一个很好的指标。同一患者前后连续检测结果的比较更有价值。

5.7 相关疾病

糖尿病

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参与讨论
  • 评论总管
    2020/10/30 22:30:54 | #0
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本页最后修订于 2012年3月11日 星期日 16:27:40 (GMT+08:00)
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