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酸性磷酸酶

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1 拼音

suān xìng lín suān méi

2 英文参考

acid phosphatase

酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP)主要存在于巨噬细胞,定位于溶酶体内。

在溶酶体膜稳定完整时,底物不易渗入,ACP活力微弱或无活性,经固定,在合适pH条件下,膜本身变为不稳定,逐渐改变其渗透性,底物可以渗入,酶活力被显示。

ACP在酸性条件下(pH4.7)可使作用液中的底物β-甘油磷酸钠磷酸根解离出来,进而与溶液硝酸铅结合形成磷酸铅沉淀,因其是难溶解的无色沉淀物,需要与黄色的硫化铵作用,生成棕黑色PbS沉淀而被显示出来。

3 血清酸性磷酸酶

3.1 英文缩写

ACP

3.2 标本采集

静脉血2ml,2h内分离血清进行测定,或加入适量的酸性稳定剂,2~8℃可保存7天。

3.3 正常参考值

Bodanaky法 0~1.1 U

King-Armstrong 法1~4 U

3.4 临床意义

酸性磷酸酶(ACP)是由两个相同的亚单位构成的糖蛋白,存在于前列腺、肝、肾、骨等各种组织细胞中,当细胞损伤时,ACP 释放入血。正常人血浆ACP主要来自红细胞白细胞血小板。血清酸性磷酸酶活性不受酒石酸抑制,而来自前列腺的异构酶,又称前列腺酸性磷酸酶PAP),最适pH为5,能水解磷酸脂,其活性可被酒石酸抑制,根据这一特性可测定出血清中的ACP。

增高见于:前列腺癌特别是转移性前列腺癌,ACP明显增高,而PAP对前列腺癌的诊断更敏感;前列腺肥大、前列腺炎,血清ACP可增高;变形性骨炎甲状旁腺功能亢进、溶血性疾病、急慢性粒细胞性白血病急性尿潴留等,ACP也可增高。

4 精浆酸性磷酸酶

磷酸苯二钠法

4.1 原理

酸性磷酸酶在酸性条件下分解磷酸苯二钠产生游离酚和磷酸,酚在碱性溶液中与4-氨基安替比林作用,经铁氰化钾氧化成红色醌的衍生物,根据红色深浅测出酶活力的高低。

4.2 试剂

1、0.2mol/L枸掾酸缓冲液(pH4.9)

2、0.01mol/L磷酸苯二钠基质

3、 碱性溶液

4、 铁氰化钾溶液

将精浆用等渗盐水稀释1000倍后按表操作

4.3 酸性磷酸酶测定步骤

测定管

对照管

稀释精浆(ml)

0.01

-

枸掾酸缓冲液(ml)

0.5

0.5

37℃水浴5min

预温至37℃基质液(ml)

0.5

0.5

混匀37℃水浴15min

碱性溶液(ml)

1.0

1.0

铁氰化钾溶液(ml)

1.5

1.5

混匀,510nm波长,对照管调零点读取吸光度。

4.4 结果及参考值

以测定管吸光度-对照管吸光度,查标准曲线求酶活力。

参考值:48.8-208.6μ/ml

4.5 临床意义

精浆酸性磷酸酶活力高低可反映前列腺的功能,精浆酸性磷酸酶活力下降,说明前列腺功能低下,如其活力显著增高,对于诊断前列腺癌及前列腺良性增生有重要意义。

5 酸性磷酸酶染色(ACP)

5.1 原理

血细胞内的酸性磷酸酶在酸性条件下,将基质中的磷酸萘酚AS-BI水解,释放萘酚AS-BI,萘酚AS-BI与六偶氮付品红偶联,形成不溶性红色沉淀,定位于胞质内,如果血细胞的胞质呈红色为阳性反应,无红色为阴性反应。抗酒石酸酸性磷酸酶染色是用相同方法制备2份基质液,一份再加入适量L-酒石酸,另一份不加L-酒石酸。取两张相同标本的涂片,分别用这2种不同基质液作酸性磷酸酶染色。如果血细胞内的酸性磷酸酶耐L-酒石酸抑制的都呈阳性反应。如果不耐L-酒石酸抑制的,不加L-酒石酸的呈阳性反应,而加L-酒石酸的呈阴性反应。

5.2 标本采集

选择髂前上棘或髂后上棘或腰椎棘突或胸骨骨髓穿刺,抽取骨髓液0.1~0.2ml,制成薄涂片。

5.3 正常参考值

原始粒细胞阴性;早幼粒、中幼粒和晚幼粒细胞中度阳性;成熟中性粒细胞弱阳性;幼稚及成熟单核细胞弱至强阳性;淋巴细胞极弱阳性;浆细胞及原核细胞中度阳性;血小板弱阳性;幼红细胞及成熟红细胞则为阴性。

5.4 结果判断

阳性结果为胞质中出现鲜红色颗粒沉淀:①(一)胞质无色。 ②(+)胞质出现淡红色颗粒。③(++)胞质布满鲜红色颗粒。④(+++)胞质充满深红色颗粒。

5.5 正常血细胞的染色反应

粒细胞、单核细胞、淋巴细胞、巨核细胞、血小板、浆细胞、巨噬细胞呈阳性。

5.6 临床意义

1)帮助鉴别戈谢细胞和尼曼-匹克细胞,前者酸性磷酸酶染色为阳性反应,后者为阴性。

2)帮助诊断多毛细胞白血病,多毛细胞白血病时多毛细胞的酸性磷酸酶染色为阳性反应,此酶耐L-酒石酸的抑制作用。淋巴肉瘤细胞和慢性淋巴细胞白血病的淋巴细胞,酸性磷酸酶染色也呈阳性反应,但此酸可被L-酒石酸抑制。

3)网状细胞吞噬细胞、组织细胞和单核细胞均呈阳性反应,故该试验有助于急性单核细胞性白血病、组织细胞性白血病、淋巴瘤恶性组织细胞病的诊断。

4)帮助鉴别T淋巴细胞B淋巴细胞,T淋巴细胞呈阳性反应医学敎^育^网收集整理,而B淋巴细胞为阴性反应。

6 抗酒石酸酸性磷酸酶染色

酸性磷酶(ACP)与细胞许多生理功能和病理变化有关。用聚丙酰胺凝胶电泳证明,血细胞的ACP,由7种同工酶组成(ACP、0、1、2、3、3b、4、5、)。在某些血液病时,同功酶的出现与疾病特点和占优势的细胞类型有关。1970年发现毛细胞胞浆里含有一种能对抗酒石酸抑制作用的ACP,经证明为ACP5,并认为用细胞化学染色技术显示此酶,在毛细胞白血病的诊断中有重要意义。如果患者的细胞为中度或弱阳性反应,则不能诊断为毛细胞白血病。毛细胞的酶反应积分值与患者的白细胞总数和毛细胞绝对数量有关,但只要有少数毛细胞(2个以上)为强阳性反应,就可考虑诊断为毛细胞白血病。

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开放分类:化验及医学检查
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  • 评论总管
    2019/9/20 18:36:04 | #0
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本页最后修订于 2011年3月19日 星期六 17:03:55 (GMT+08:00)
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