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去白细胞的红细胞制备

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去白细胞的红细胞制备

1 制备方法

全血或压积红细胞内去除白细胞的方法较多,其去除效果各不相同,但任何一种方法都不可能把白细胞全部除去。一般认为去除70%以上即可避免因白细胞凝集所致的发热反应

1.1 离心

是一种简单而较为有效的制备方法。

(1) 正位离心法:①用三联塑料袋采集全血。②以1160g离心8min,温度控制在20℃。③分出上层血浆至2号转移袋内。④挤出白膜层及靠近白膜层1.0-1.5cm厚的红细胞至1号转移袋内。⑤为提高白细胞除去率,可再将2号转移袋内的血浆返回血袋。⑥充分混匀后重复步骤②~④。⑦以原血浆配制成70%比容的去白细胞的红细胞。

(2)倒置离心法:①用特制三联塑料袋采集全血。②将血袋倒置(底部朝上)离心,离心速度、时间和温度同正位离心法。③将血袋放在倒置挤压器上,夹住2号转移袋通路,并打开1号袋通路,使血袋下部少含白细胞的红细胞流入1号转移袋,当白膜层离血袋下口约剩4cm时,适当减慢血流速度,以免形成旋涡而影响白细胞除去效果。④当白膜层离血袋下口只有2cm时,夹住通向1号转移袋通路,打开2号转移袋通路,让白膜流入2号转移袋。此时可用手指推挤白膜,尽量使更多的白膜挤入2号转移袋内,直至连接管呈现粉红色时,夹住通向2号转移袋的塑料管。⑤从挤压板上取下血袋,将去除白细胞的红细胞返回原血袋内。⑥充分混匀后重复步骤②-④,以提高白细胞去除率。⑦将血浆与红细胞一起正位离心,从血袋分出部分血浆置于红细胞袋内,配制成70%比容的去白细胞的红细胞。

1.2 过滤

使血液通过特制过滤器,利用吸附或阻挡白细胞等原理,将白细胞除去,而制得去白细胞的红细胞。过滤法简单、方便,效果又好,它将有效地代替其他方法。

(1)尼龙纤维过滤器:根据尼龙纤维在钙离子存在下,能选择性地吸附白细胞这一特性,使血液通过尼龙纤维过滤器,将白细胞吸附,而获得去白细胞的红细胞。方法为:①用肝素抗凝采集全血1个单位,过滤前不要将此血冷却。②取出事先放入温箱加温至37℃的滤器,再用37℃盐水灌注。③将血袋和滤器连接,于1h内将血液进行过滤,即获得红细胞。

(2)棉花纤维过滤器:可用于保存期内任何抗凝血。据文献报道,接近贮存末期的血液去除白细胞的效果更好。一般过滤后的血液可除去95%以上白细胞,并保留95%以上红细胞。

(3)微聚物过滤器:全血以5000g离心 7min后,置入4℃±2℃冰箱保存,于输血前将血液通过1个孔径为20-40μm的微聚物过滤器进行过滤。

(4)用带有白细胞滤器的输血器输注浓缩红细胞

1.3 沉降法

使用沉降剂,如大分右旋糖酐(分子量为15万~20万)或羟乙基淀粉 (分子量为30万-40万)或羧甲基淀粉钠,促使红细胞快速下沉,而白细胞仍保留在血浆中,分出上层富含白细胞、血小板血浆,下层即为去白细胞的红细胞。所得红细胞可用生理盐水配制70%比容的红细胞悬液。本法技术简单,操作时间短,不需昂贵设备,效果好;缺点是沉降剂分子量大,抗原性强,易引起变态反应。若使用低分子或中分子右旋糖酐或羟乙基淀粉,则沉降效果差。

1.4 洗涤法

用洗涤法制备洗涤红细胞,以及解冻红细胞也属于去白细胞的红细胞。

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  • 评论总管
    2020/10/30 15:44:30 | #0
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本页最后修订于 2010年1月25日 星期一 23:00:06 (GMT+08:00)
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