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全血铅

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1 拼音

quán xuè qiān

2 英文参考

whole blood lead

3 概述

铅(plumbum,Pb),原子量207.19,银灰色软金属。比重11.35(20℃),熔点327.4℃,沸点1620℃。化合价2和4。不溶于水、稀盐酸硫酸。可溶于硝酸醋酸和碱液。加热到400~500℃时,即产生大量蒸气。铅蒸气在空气中迅速氧化成氧化铅(Pb2O)。常见的无机铅化合物一氧化铅(PbO,密陀僧)、二氧化铅、三氧化二铅(Pb2O3,樟丹)、四氧化三铅(Pb3O4铅丹)、氯化铅、硫化铅(PbS,黑铅丹黑锡丹)、硫酸铅、硝酸铅、醋酸铅及碱式碳酸铅[2Pb[O2·Pb(OH)2],铅白]等。日常生活中,从消化道(用含铅容器、食品、药物)和呼吸道如汽车废气吸收过量的铅>0.5mg/d,可引起铅中毒,对健康造成危害,主要损害神经系统血液系统

4 全血铅的医学检查

4.1 检查名称

全血铅

4.2 分类

血液生化检查 > 血液无机物测定

4.3 取材

血液

4.4 全血铅的测定原理

(1)红细胞卟啉荧光光度测定法:原卟啉(EP)为一荧光物质。用乙酸乙酯-乙酸混合液使红细胞破坏,卟啉溶出,再用盐酸提取其中之EP,在激发光403nm,发射光605nm处显示其荧光谱峰,可根据荧光强度进行定量。

(2)石墨炉原子吸收光谱法测定血铅:血样用基体改进剂溶液稀释后,直接注入热解涂层石墨管中,在设定的不同温度下,顺序进行干燥、灰化和原子化,然后在283.3nm波长下读取吸光度,在标准曲线下查出与吸光度值相对应的B-Pb浓度。

(3)红细胞ZPP快速测定:采用表面荧光法测定血液中锌原卟啉(ZPP)的含量。人体红细胞内含一定量ZPP,受特定蓝色光激发时,ZPP产生荧光,且荧光强度与ZPP含量成一定比例关系。测定荧光强度即可推算ZPP含量。

4.5 试剂

(1)红细胞原卟啉的荧光光度测定法:

均为分析纯水为蒸馏水

①浓盐酸。

②乙酸乙酯-乙酸混合液(4+1)。

③0.5mol/L盐酸。

生理盐水

⑤硅藻土生理盐水悬浮液,2.5g/100ml。

⑥原卟啉标准贮存液(EP 50μg/ml):称取原卟啉0.50mg,加浓盐酸1.2~1.3ml,待原卟啉溶解后,转入10ml容量瓶。加水到刻度。

⑦原卟啉标准工作液(EP 0.1μg/ml):临用时用乙酸乙酯-乙酸混合液将50μg/ml EP稀释500倍。

(2)石墨炉原子吸收光谱法测定血铅:

①基体改进剂溶液:含2g/L磷酸二氢铵,5ml/L Triton X-100,0.2%硝酸。

②铅标准液:

A.铅标准储备液(1000.0mg Pb/L):推荐使用标准计量单位(如中国计量科学研究院)提供的铅标准品。也可按实验室铅标准液制备标准操作规程(SOP)自配。准确称取高纯铅(光谱纯)0.1000g置于100ml石英烧杯中,溶于1.0ml浓H3NO3中,加重蒸馏水稀释至100ml。或称取0.1599g硝酸铅(100℃干燥2h),用1mol/L硝酸溶解并稀释至100ml。存于聚乙烯瓶中,冰箱内保存

B.铅标准应用液(Pb 1000μg/L):用基体改进剂溶液将铅储备标准液逐级稀释成Pb 1000μg/L。

(3)红细胞ZPP快速测定:红细胞ZPP标准物质

4.6 操作方法

(1)红细胞原卟啉的荧光光度测定法:

①仪器操作条件:930型荧光光度计10mm荧光比色皿。用42#(581光电比色计滤光片,420nm),为激发滤光片和55#(550±10nm)发射滤光片。

②测定:取10ml具塞试管按表1配制标准系列和测定管。各管分别置旋涡混合器上混合10~15s后,于2500r/min离心,取上清液,各加0.5mol/L盐酸4ml,加塞,再混合20~30s,吸去上层有机溶剂,取下层盐酸溶液测定荧光强度。标准管读数(格)减去空白管读数(格)后绘制标准曲线。

(2)石墨炉原子吸收光谱法测定血铅:

①仪器工作条件设置:原子吸收分光光度计(PE 3100型),具L'vov平台的热解涂层石墨管和自动进样品。测定B-Pb的仪器参数设置:波长:283.3nm;狭缝:1.3nm;积分吸收值信号:读数延迟0s,积分时间3.5s;灯电流10mA;重复3次;时间-温度程序(表2)持续时间:69s;10倍稀释样品注入体积:12μl;每份样品测定周期:106s。

②标准曲线制作:取8个具塞聚丙烯塑料离心管(1.5ml),按表3制备标准管,混合后从各管取出12μl,以手工进样或自动进样方式,按所设定的仪器操作条件,读取各管的积分吸光度值(A.s)。1~7号管的A.s分别减去“0”管的A.s。以铅的含量为横坐标,测得的吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。本法的标准曲线性范围可达100μg Pb/L。

③样品测定:将K2EDTA抗凝的静脉、血或末梢血充分混合后,取50μl,加450μl基体改进剂溶液,混合。手工进样时,取12μl注入石墨炉;采用自动进样方式时,自动进样器自动吸取12μl混合的稀释血样注入石墨管平台。按所设定的仪器操作条件,读取各管积分吸光度值(A.s)。

(3)红细胞ZPP快速测定:

①仪器:ZPP-3800型血液锌原卟啉测定仪(广东省职业病防治院研制):24mm×24mm盖玻片(上海产)。

②血样测定:取20~30μl末梢血样滴入盖玻片,盖满仪器测定区域,无气泡,搅拌后推入进样台,待读数稳定后读取(或打印)结果。

质量控制:用与血样测定相同的操作,测定红细胞ZPP标准物质的ZPP含量,结果应在其标称值范围内。

4.7 正常值

(1)红细胞原卟啉的荧光光度测定法:

①正常参考值:不接触铅者血EP范围57~511/μg/L(0.10~0.91/μmol/L),中位数为227μg/L(n=46)。全国范围的EP正常参考值调查结果为几何平均数(GM)=280μg/L(0.50μmol/L),P95参考值范围为<610μg/L(1.09μmol/L)(n=978)。

②可接受上限值:用判别分析法求得的职业铅接触人群的EP可接受上限值为1.29mg/L(2.30μmol/L)(n=902)。

③诊断下限值:用判别分析法求得的职业性铅中毒的EP诊断下限值为2.06mg/L(3.67μmol/L)(n=698)。

(2)石墨炉原子吸收光谱法测定血铅:为满足铅中毒防治工作的需要,需要制订B-Pb的三种水平(三值),即正常参考值,可接受上限值以及诊断下限值。

①正常参考值:由于不同国家和地区的地理环境、生活习惯以及社会与经济条件不同,各国报道的正常参考值差别较大。如1982年在严格的质控条件下进行了全球性B-Pb监测,世界十大城市教师B-Pb值几何均数,北京为0.31μmol/L(64μg/L),墨西哥城则为1.09μmol/L(225μg/L)。近年国外出版的有关专著中认为非接铅人群B-Pb正常参考值为100~200μg/L(0.483~0.965μmol/L)。根据1991~1993年全国不同地区非接铅正常人群1588人的B-Pb检测所求得的我国B-Pb正常值上限为0.90μmol/L(187μg/L)(表4)。吴荣桂等(1995)报道广西地区正常人群血铅正常值为0.403±0.178μmol/L(n=687),男B-Pb(0.473±0.200,n=389)明显高于女性(0.333±0.157,n=298)(P<0.01),与表4所列南宁地区B-Pb接近,说明一个地区正常人B-Pb在一个时期内相对较稳定。

②B-Pb可接受上限值:B-Pb可接受上限值也称“生物接触限值BEL)”,“生物接触指数(BEI)”或“生物学耐受量”,是指B-Pb超过正常参考值上限,但一般不会引起铅中毒的血铅水平,也就是说,这种B-Pb水平是可以接受的。我国铅中毒诊断标准修订协作组采用判别分析法得出的B-Pb可接受上限值为444μg/L(n=902)。美国ACGIH(1991)提出的B-Pb的BEI值为500μg/L(2.41μmol/L),同一时期美国CDC(1992)宜布将儿童B-Pb的可接受上限由原来的250μg/L(1.25μmol/L)降低到100μg/L(0.48μmol/L),原因是有报告称在100μg/L B-Pb浓度下,儿童失去学习能力

③B-Pb诊断下限值:B-Pb的诊断下限值国外目前尚无统一标准,一般认为B-Pb>3.86μmol/L(800μg/L)时可出现明显铅中毒表现。国内目前B-Pb采用2.41μmol/L(500μg/L)作为诊断下限值。近年一项全国性的关于慢性铅中毒断指标的大型调查显示,用判别分析法得出的B-Pb的诊断下限值为3.07

μmol/L(635μg/L,n=698)。

(3)红细胞ZPP快速测定:不接触铅的工厂工人血液ZPP浓度为0.774±0.24μmol/L(n=47)。铅中毒诊断标准修订协作组(1996)提出的血液ZPP正常参考值上限为1.34μmol/L(6.0μg/g Hb),可接受上限值为1.79μmol/L(8.0μg/gHb),诊断下限值为2.91μmol/L(13μg/g Hb)。

4.8 化验结果临床意义

(1)B-Pb的诊断意义:B-Pb是反映近期铅接触的敏感指标。国内一项调查显示,B-Pb与空气中铅浓度呈高度相关r=0.6379,P<0.01,n=895),与铅接触和铝中毒程度(症状)之间存在较好的剂量反应关系。B-Pb与其他指标如U-Pb(r=0.7935,P<0.0005,N=895),EP(r=0.7743,P<0.001,n=895)和ZPP(r=0.7326,P<0.0025,n=895)也呈显著相关。

目前在铅接触危害监测和诊断中,B-Pb测定已成为生物接触指标中的首选指标。在观察铅对职业性接触危害、妊娠胎儿)、儿童认知能力以及成人肾功能影响的研究中都把B-Pb作为主要的,或唯一的生物监测指标,而且都观察到这些有害影响与B-Pb浓度有关。1991年美国CDC在宣布把儿童铅可接触值由250μg/L降至100μg/L的同时,推荐B-Pb测定为筛检和诊断儿童铅接触的

最佳生物监测指标。此后,B-Pb测定的需求迅速增加。

(2)U-Pb的诊断意义:尿铅可反映铅从体内排出情况,能间接反映吸收的铅量多寡。但由于U-Pb浓度受测定方法、留尿时间、样品污染以及浓缩和稀释等因素的影响,结果波动大,不能灵敏可靠地反映体内铅水平。有时体内虽有大量铅蓄积,U-Pb排出量并不高,只有在作驱铅试验后才明显升高。目前U-Pb测定主要用于观察驱铅治疗效果。

(3)EP和ZPP的诊断意义:70~80年代国内外在职业性铅接触危害的监测和诊断中EP和ZPP这二项卟啉指标曾广泛应用。这是基于铅干扰卟啉代谢而影响血红素合成,导致红细胞中EP、ZPP浓度增高。尽管EP和ZPP的增高程度与病情严重程度不一定平行,但对铅中毒有诊断价值。1989年发布的我国国家标准(GB11504-89)将卟啉指标列为铅中毒诊断条件之一。80年代儿童铅可接触值为1.21μmol/L(250μg/L)的情况下,EP测定在儿童铅接触和铁缺乏的筛查中,也是很好的指标。但是进入90年代,在美国等国家,EP测定逐渐被淘汰,原因是美国CDC于1991年修正并颁布儿童血铅的可接受值,由原来的1.21μmol/L(250μg/L)降低到0.48μmol/L(100μg/L),并要求直接测定B-Pb,而不是用间接的方法(如ZPP)筛检B-Pb。加拿大某些地方也把儿童和成年女性的B-Pb可接受上限值定为0.48μmol/L,男性则为0.72μmol/L(149μg/L)。由于方法敏感性所限,ZPP不能筛检出B-Pb升高在048~1.21μmol/L之间的,有亚临床铅中毒的儿童和成年女性。但EP或ZPP在职业性铅接触危害筛检方面仍有较大价值。尤其在生产环境现场取末梢血作EP测定时样品不易受环境污染,测定结果与静脉血一致,而末梢血铅与静脉血铅相比,存在一定偏差。

近年来,由于操作简便、快速、准确的国产血液ZPP测定仪的研制成功并投入生产,促进了国内血ZPP测定在职业性慢性铅中毒筛检和诊断方面的应用。

(4)尿ALA的诊断意义:铅中毒时,红细胞δ-氨基乙酰丙酸脱水酶(ALA-D,EC4.2.1.24)的抑制导致红细胞、血浆和尿中δ-氨基乙酰丙酸(ALA)浓度先后升高。早年尿中ALA测定曾被作为筛查职业铅接触危害的重要手段。但是,拿今天的标准衡量,这项指标对检查铅毒性不够敏感,对早期诊断不够理想,因为只有当B-Pb浓度>1.93μmol/L(400μg/L)时,尿ALA浓度才显著升高。而且,要求定量收集24h尿,这一点也使其应用受到限制。但是由于测定方法简单,测试费用低,以及非侵入性取样等原因,在我国的基层普查中应用仍较多,其他一些国家也有应用。

4.9 附注

(1)红细胞原卟啉的荧光光度测定法:

①本法检测限为50μg/L EP,批间精密度变异系数CV)4.3%~7%。相对回收率96.6%。本法与荧光分光光度法测定结果之相关系数r=0.9796,P<0.001,呈非常显著相关,说明本法有较高的灵敏度,精密度和准确性,且仪器为国产品,价格适中,适宜于在国内推广应用。

②血样在0~4℃存放时间不宜过长,应在7天内完成分析。

③正常人红细胞原卟啉是游离的,故一般称游离原卟啉(FEP)。铅中毒或缺铁性贫血时,红细胞增加的原卟啉主要以锌原卟啉(ZPP)形式存在,但用乙酸乙酯和冰醋酸混合液破坏血中红细胞时,可使ZPP转变为EP,所以用萃取法测定时称为EP较妥。

(2)石墨炉原子吸收光谱法测定血铅:

①本法的特点是采用了平台石墨炉原子化技术,积分吸光度,样品和铅标准液用含磷酸二氢胺、Triton-X 100和硝酸的基体改进剂稀释,以及简单的连续背景校正,这些都是稳定温度平台石墨炉(STPF)技术的基本条件。方法学评价结果:最低检测限约5μg/L(0.025μmol/L),精密度:批内CV0.4%~5.4%,批间CV 1.0%~4.7%;准确度:低浓度铅质控物(靶值约为70μg/L)的实测值在靶值±10μg/L范围内;高浓度铅质控物(靶值>200μg/L)的实测值在靶值±6%靶值范围内。本法与具Zeeman背景校正的AAS(4100 2L型)所测B-Pb的相关

性良好(y=1.005X+0.089,r2=0.997,n=44)。

②本法灰化程序中,在“热解”后增加“冷却”这一步骤是为了减少沿石墨炉热梯度的影响。这一步骤适用于有纵向加热石墨炉(longitudinally heated furnance)的AAS(如PE 3110型AAS)。侧面加热石墨炉(side heated furnance)无此热梯度(如PE 4100 2L型AAS),热解后可不作冷却处理。

③用连续背景校正的AAS作B-Pb测定时,有时出现分析结果偏低,或分析信号低于基线,这种情况一般是由于光源未调直引起的干扰。应细心调整仪器,使背景校正器的光束与空心阴极灯的光束恰好重叠。

④方法建立后要用标准物质评价方法的准确度和精密度;样品测定过程中要用标准物质作质量控制检查。中国预防医学科学院环境卫生监测所有国家计量局授权生产的“全血铅镉成分分析标准物质(GBW 09132~09134)”供应。

(3)红细胞ZPP标准物质

①仪器需经常用ZPP标准物质校验,保证仪器性能良好。

②盖玻片的本底值直接影响ZPP的测定结果,用前需清洗筛选,弃去本底值过高者。

4.10 相关疾病

脱水、缺铁性贫血

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开放分类:血液生化检查血液无机物测定化验及医学检查
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  • 评论总管
    2020/11/27 0:06:24 | #0
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本页最后修订于 2013年3月4日 星期一 11:28:00 (GMT+08:00)
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