全血镍

目录

1 拼音

quán xuè niè

2 英文参考

whole blood nickel

3 概述

目前已知的人体必需微量元素有14种,镍微量元素与临床医学各科密切相关。

4 全血镍医学检查

4.1 分类

血液生化检查 > 血液无机物测定

4.2 取材

血液

4.3 原理

(1)甲基百里香酚蓝比色法(MTB):血清中的镍离子在碱性溶液中与甲基百里香酚蓝(MTB)结合,生成一种蓝色的络合物。加入适量8-羟基喹啉,可消除镁离子对测定的干扰,与同样处理的镍标准液进行比较,求得血清总镍含量。

(2)邻甲酚酞络合酮直接比色法:邻甲酚酞络合酮(OCPC)是金属络合染料,也是酸碱指示剂,在pH11.0溶液中与镍螯合,生成紫红色螯合物。作镍测定时,在试剂中加入8-羟基喹啉以消除标本中镁离子的干扰。与同样处理的镍标准液比色,可求得血清镍含量。

(3)乙二胺四乙酸二钠滴定法:标本中镍离子在碱性溶液中与钙红指示剂结合成为可溶性复合物,使溶液成淡红色。乙二胺四乙酸二钠盐(EDTA-Na2)对镍离子的亲和力很大,能与该复合物中的镍离子络合,指示剂重新游离而使溶液呈现蓝色。所以在滴定镍时,加入镍红为淡红色,用ED-TA-Na2滴定转变为蓝色时,为滴定终点。与同样处理的镍标准液滴定,计算出标本中的镍的含量。

(4)离子镍测定:离子选择电极是一种化学传感器,它能将溶液中某种特定离子的活度转变成电位信号,然后通过仪器来测量。电极电位随溶液中离子活度变化的关系服从Nernst方程。

选择电极的电位(E)与溶液中被测离子活度的对数成线性关系。

血液抽出后,溶解于其中的CO2气体会释放到空气中,使血液pH值变碱性,而血液pH值则与离子镍浓度之间成负相关的关系,pH值增加0.1,离子镍浓度约降低4%~5%。所以新型的离子型的离子镍分析仪都是在测定血清离子镍浓度的同时,测量血清pH值,再计算出pH7.4时的标准化离子镍(Ni)浓度。

离子浓度分析仪通常采用比较法来测定样品溶液中离子镍和pH值,即先测量二个已知浓度标准液中的离子镍和pH的电极电位,在仪器程序内建立一条斜率曲线,然后测量样品溶液中离子镍和pH的电极电位,从已建立的斜率曲线上求出样品溶液中离子镍浓度和pH值,并计算出标准化离子镍浓度,直接在仪器上显示出结果或打印出分析报告。

(5)同原子吸收分光光度法原理。

4.4 试剂

(1)甲基百里香酚蓝比色法(MTB):

①MFB试剂:取去离子水20ml,加浓盐酸1.2ml,再加8-羟基喹啉1.45g溶解。另取去离子水500ml,加甲基百里香酚蓝络合剂0.114g使溶,再加聚乙烯吡咯烷酮(PVP)1.5g溶解,混合两液,加16.75g/L乙二胺四乙酸二钠水溶液2.2~2.4ml混匀,加去离子水至1L。

②显色基础液:取去离子水700ml加无水亚硫酸钠24g溶解,加单乙醇胺200ml混匀,用去离子水稀释至1L。

③镍标准液(2.5mmol/L):精称恒重的镍(Ni)0.25g,加稀盐酸(1份浓盐酸加9份去离子水)7ml溶解后,加去离子水900ml,然后用500g/L醋酸铵溶液调pH至7.0,移入1L容量瓶中,再用去离子水稀释至刻度,混匀。

(2)邻甲酚酞络合酮直接比色法:

①邻甲酚酞络合酮显色剂:称取8-羟基喹啉0.5g,置烧杯中,加浓盐酸5ml,使其溶解并转入500ml容量瓶中,再加入邻甲酚酞络合酮25mg,待完全溶解后,加Triton X-1001ml,混匀,然后加去离子水至刻度。置聚乙烯瓶内保存。

②1mol/LAMP碱性缓冲液:称取2-氨基-2-甲基-1-丙醇(AMP)89.14g,加500ml去离子水溶解后移入1L容量瓶中,再用去离子水稀释至刻度,置聚乙烯瓶中室温保存。

③显色应用液:应用时根据标本的多少将上述两液等量混合。

④镍标准液(2.5mmol/L)见MTB法。

⑤5g/L EGTA溶液:称取乙二醇二乙醚二胺四乙酸盐(EGTA)0.5g于100ml去离子水中,此试剂用于测定混浊标本。

(3)乙二胺四乙酸二钠滴定法:

①0.2mol/L的氢氧化钠溶液:称取氢氧化钠8g,用去离子水溶解并稀释至1L。

②镍红指示剂:称取镍0.1g,溶于甲醇20ml中,置棕色瓶中保存。

③乙二胺四乙酸二钠溶液:称取ED-TA-Na2 0.1g,加去离子水50ml,加1mol/L氢氧化钠2ml,待完全溶解,加去离子水至100ml。

④镍标准液(2.5mmol/L):配法同MTB法。

(4)离子镍测定:各厂家生产的仪器所需试剂都是配套供应的,其配方未完全公开。

4.5 操作方法

(1)甲基百里香酚蓝比色法(MTB):

按表1操作。

混匀,静置5min后,用波长610nm或红色滤光板,光径1.0cm比色,以空白管调吸光度至0点,分别读取各管吸光度。

(2)邻甲酚酞络合酮直接比色法:

按表2操作。

混匀,5min后用波长575nm或红色滤光板,光径1.0cm比色,以空白管调吸光度至0点,分别读取各管吸光度。

如果标本混浊,黄疸或溶血,需作校正试验,即:于空白管及测定管中各加入5g/LEGTA溶液0.05ml,再测吸光度,两次读取的吸光度差,即为校正吸光度。

(3)乙二胺四乙酸二钠滴定法:

按表3操作。

混匀,管内液体呈淡红色,迅速用乙二胺四乙酸二钠溶液滴定至溶液呈淡蓝色为终点,记录各管EDTA-Na2用量(ml)。

(4)离子镍测定:商品的离子镍分析仪所用的镍电极都采用中性载体作镍电极的活性材料制成聚氯乙烯(PVC)电极膜,电极的寿命约半年左右:pH电极由特殊玻璃毛细管制成;参考电极采用银/氯化银制成。

各种型号的离子镍分析仪的试剂配方、试剂用量、操作方法有所不同,一般要进行下列步骤。本法以一种国产的离子镍分析仪为例。

①接上电源,仪器首先进行显示及电子线路检测,结束后即可进行二点斜率定标。

②斜率定标时,推出吸样针先后将其浸入盛有低、高二个浓度斜率定标仪的小瓶中,吸取斜率定标液,待仪器发出“嘟”声后移去。吸样针推回原处,仪器自动进行斜率定标。

③定标通过后,可进行样品测量。

A.毛细血管血测量:将毛细管血混匀,推出吸样针,取掉两端塞子,一头装上接头,将接头另一端装在取样针上,按“测量”键至样品完全充满样品测量腔后,再松开“测量”键,进样泵即停止工作。此时应检查样品测量腔内的样品是否有气泡,如有气泡存在,应在松开“测量”键8s内,再按“测量”键,继续吸取样品,直至排除气泡为止。移去样品,擦净吸样针并推回原位,在进样结束8s后即显示测量数据并打印结果。

B.血清测量过程同全血测量。

④标本测量结束,仪器冲洗管路和样品测量,冲洗好后即可进行下一个样品的测量。

⑤在最后一次定标或血样测量结束后10min不操作仪器,仪器将进入“休眠”状态。此时如需进行血样测定,必须先进行一点定标。若没有血样测定,仪器每隔30min自动进行一次一点定标。

(5)同原子吸收分光光度法。

4.6 正常值

分光光度法(AAS):0.15~7.7μmol/L  (0.9~44.5μg/dl)。

4.7 临床意义

(1)升高:急性心肌梗死(镍一过性上升,发作后12~36h后血清浓度达峰值)、脑卒中、烧伤、急性肝炎、败血症、妊娠中毒、血液透析的慢性肾脏疾病等。

(2)降低:尿毒症、肝硬化、长期口服避孕药等。

4.8 附注

血清水平测定多用作营养学调查和毒理学分析。

4.9 相关疾病

败血症     肝硬化     急性心肌梗死     烧伤

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