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尿前列腺素

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1 拼音

niào qián liè xiàn sù

2 英文参考

Urinary prostaglandin

3 概述

PG是一族属于不饱和脂肪酸的生物活性物质,它具有多种生理功能,又可作为信息调节分子,通过调节遗传信息(RNADNA)、神经递质激素水平而影响机体盼发育生长、繁殖和一系列神经内分泌效应。PG广泛存在于许多组织体液中,其中以精液中浓度最高。目前已发现有20余种,根据其五碳环结构的不同分为A、B、C、D、E、F、G、H型,以PGE、PGF、PGA、PGB四型为最重要,又按侧链所含双键数目不同再分为三种化合物如E型可分为PGE1、PGE2、PGE3。PGE1、PGE2、F1a、F2a等广泛分布于脑、脊髓、外周神经及CSF中,其中以E2α含量最丰富。PGE2a是脑血管收缩剂,脑血管痉挛时,可见CSF中TGF2a的浓度增加。

4 尿前列腺素的别名

UPG

5 尿前列腺素的医学检查

5.1 检查名称

尿前列腺素

5.2 分类

体液和排泄物检查 > 尿液检查

5.3 化验取材

尿液

5.4 尿前列腺素的测定原理

前列腺素是一类由20个碳原子所组成的脂肪酸,是花生四烯酸代谢的产物,参与多种生理生化代谢过程。依其环戊烷上的取代基和双键的位置不同划分为九类,在前列腺素后按英文字母A、B……I排列。前列腺素在生物样品浓度甚微,目前测定方法要经有机溶剂提取,然后溶于PBS中,以高比放射活性3H标记品为示踪剂,以非衡顺序温育结合法测定样品中的浓度。

5.5 试剂

(1)抗血清:取前列腺素E2(或E1、F、A)经碳二亚胺为偶联剂和蛋白质结合,制成免疫原免疫家兔,获得抗血清。抗体必须高度特异,E2和E1,以及F、A之间均无交叉反应

(2)[3H]-前列腺素标记物:为英国Amersham公司产品,E1和E2高比放射活性5.55TBq(150Ci)/mmol∶F2a高比放射活性5.92TBq(160Ci)/mmol。临用前取37kBq(1μCi)加PBS 10.5ml。

(3)50mmol/L pH7.4PBS 取Na2HPO4·7H2O8.2g,NaH2PO4·H2O 2.7g,NaCl 9.0g,NaN3 1.0g,白明胶(Sigma产品)1.0g至800ml蒸馏水中,放37℃水浴中至完全溶解,调至pH7.4,加蒸馏水至1000ml。

(4)消炎痛-肝素液:取消炎痛100mg至20ml蒸馏水中,滴加1mol/L NaOH液至溶,再加肝素钠1g,NaCl 8.5g,蒸馏水至100ml。经G6漏斗抽滤,分装,放-20℃保存

(5)重蒸馏乙酸乙酯:取AR级乙酸乙酯(北京化工厂)2500ml,加无水KCO3 100g,放24h,过滤后重蒸馏。

(6)标准液:取前列腺素E2(或F2a·E1)100μg溶于100ml 70%乙醇中,分装每安瓶100μl(含100ng)。

(7)标准工作液 取标准液8μl至10mm×100mm管中,氮气吹干。然后加1ml PBS充分振荡至溶。另取试管6只,各加PBS 0.5ml,将标准液依次作倍比稀释。即得S1~7浓度100μl含有12.5~800pg。临用前配制。

(8)闪烁液:取PPO 4g,POPOP 80mg,萘60g溶于1000ml甲苯中,加AR级无水乙醇570ml。

(9)分离剂:取100~120目活性炭500mg加至10ml PBS中,再加入BSA200mg,搅拌20min。

5.6 操作方法

(1)样品提取:取稀释后尿液1ml至提取管中,尿液样品加1mol/L HCl 0.1ml。用5ml乙酸乙酯提取两次。提取液合并,吹干,残渣溶于1ml PBS中,尿样品溶于PBS后再用3ml AR级石油醚提取1次,除去中性脂肪,保留水相待测。

(2)取8mm×75mm玻璃试管,编号,按表1顺序加入样品和试剂。

(3)加入分离剂后混匀,放4℃ 15min,离心3500r/min 15min。将上清液全部倾出至预先加有11ml闪烁液的计数瓶中,混匀,放12h后在液体闪烁计数器测放射性。

(4)从计数器上的放疫程序可以直接给出待测样品浓度。或以B/B0为纵坐标,标准曲线各点浓度为横坐标,绘制标准曲线,查出样品管值。如果是组织样品,根据100μl样品值,再计出每毫克组织中的浓度。

5.7 正常值

生物样品中前列腺素A、E和F2a的浓度,各作者报告的正常参考值差别较大。这种差别与样品的预处理、测定方法和抗血清的特异性不同相关。因此,在各实验室应建立自己的对照组或正常参考值。以下列出解放军总医院报告的正常参考值,可供使用3H标记试剂盒子测定结果的参考:

尿液(ng/24h)

前列腺素E 489.5±123

前列腺素F2a 1702±669

前列腺素A

5.8 化验结果临床意义

(1)升高:恶性肿瘤妊娠、低氧血症、心绞痛分娩尿毒症心肌梗死巴特综合征(高醛固酮症和低血钾碱中毒肾小球旁器增生综合征)、原发性高血压、肾移植排斥反应肾病综合征糖尿病高脂血症等。

(2)降低:原发性高血压、动脉硬化症、心绞痛、血栓性血小板减少性紫癜溶血性尿毒症综合征等。

5.9 附注

(1)采血时空针加消炎痛是作为环氧化酶的抑制剂,以抑制前列腺素类物质在体外继续合成。

(2)前列腺素类物质在血浆稳定性差,应尽量在较短时间内提取,吹干。提取后的样品在-20℃下保存至少3个月内稳定。

(3)本法亦可适用于尿液样品的测定。取24h混合尿1ml,加1mol/L HCl调至pH3.5,按和组织匀浆相同方法提取和测定。

5.10 相关疾病

巴特综合征、原发性高血压、肾病综合征、糖尿病、高脂血症、血栓性血小板减少性紫癜、血小板减少性紫癜

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开放分类:化验及医学检查体液和排泄物检查尿液检查
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参与讨论
  • 评论总管
    2019/7/23 15:38:28 | #0
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本页最后修订于 2013年3月1日 星期五 16:49:23 (GMT+08:00)
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