1 拼音
niào huán lín xiàn gān
2 英文参考
urine adenosine cyclophosphate
3 概述
环腺苷酸作为肽类激素的第二信使，在激活蛋白激酶，使核糖体中蛋白质磷酸化，加速“翻译”过程和促进特异性蛋白质的合成等方面起着非常重要的作用。临床上测定环腺苷酸对多种疾病诊断和疗效判断有一定意义。
4 别名
尿环磷酸腺苷
5 尿环磷腺苷的医学检查
5.1 检查名称
尿环磷腺苷
5.2 分类
体液和排泄物检查 > 尿液检查
5.3 尿环磷腺苷的测定原理
cAMP是一种小分子半抗原，其特异性抗体是以人工合成的2＇-0-ScAMP-BSA结合物免疫动物所获得。抗体对2＇-0-位有取代基的cAMP的亲和力较无取代基的cAMP约大100倍。为提高测定方法的灵敏度高，测定时应将[3H]标记cAMP，样品和标准同时进行琥珀酰化反应，然后和抗体反应。从标准曲线查出样品中的浓度。
5.4 试剂
（1）抗血清：
①ScAMP的合成：取cAMP20mg，琥珀酸酐100mg至反应瓶中，加去离子水2ml，三乙胺0.2ml，磁力搅拌反应30min。置真空干燥内减压除去三乙胺。加水20ml，放24h，用1mol/L NH4OH调至pH7.0。即刻用强碱型聚苯乙烯阴离子交换柱层析。0.3mol/L甲酸淋洗，收集258nm流出液。合并，冷冻干燥，产物为ScAMP。
②取ScAMP：经偶联剂作用和BSA结合，作为免疫原，注射山羊或家兔，制备抗血清。
（2）[3H]-ScAMP：取[3H]-cAMP（中国原子能研究院产品）92.5kBq（2.5μCi）至瓶中，加琥珀酸酐5mg，去离子水0.1ml，三乙胺10μl，即刻混合，用力摇45s，加50mmol/L pH6.2醋酸缓冲液至10ml，临用前配制。
（3）50mmol/L pH6.2醋酸盐缓冲液：取AR级无水醋酸钠4.1g于800ml蒸馏水中，加茶硷1.44g，溶解后用2mol/L醋酸调至pH6.2，加蒸馏水至1000ml，4℃保存。
（4）标准cAMP液（320nmol/L）：取纯化cAMP1.11mg，加50mmol/L pH6.2醋酸盐缓冲液10ml，微温至溶，放－20℃可长期保存。
（5）标准cAMP（320pmol/瓶）：取标准cAMP液0.2ml至10ml容量瓶中，加去离子水至10ml刻度。取5ml带塞瓶，每瓶加50μl，放37℃干燥，4℃水箱可保存3年内稳定。
（6）酰化试剂：取200mg/ml琥珀酸酐丙酮液2.5ml，三乙胺0.9ml混合，临用前新配。
（7）闪烁液：取PPO 4g，POPOP 100mg，加AR级二甲苯1000ml。
5.5 操作方法
（1）尿液采集：稀释后取尿液3ml，即刻加至预先放有0.25mol/L EDTA Na250μl的冷试管中，迅速混匀，放－20℃保存。
取尿液1ml至提取管中，加无水乙醇3ml，置快速混匀器上1min，离心，上清液倾至15ml蒸发皿中，向沉淀物中加75%乙醇3ml重复提取一次。上清液合并，置55℃水浴上吹干。残渣溶于0.5ml50mmol/L pH6.2醋酸盐缓冲液。
（2）组织样品处理：活组织取得后即刻置氮气中，快速称取30～50mg于研磨器中，加50mmol/LpH6.2醋酸盐缓冲液1ml，制成匀浆后即刻放沸水浴中3～5min。离心，取上清液放－20℃保存。
（3）标准工作液：取标准cAMP一瓶，加50mmol/L pH6.2醋酸盐缓冲液1ml。另取试管7只，各加50mmol/L pH6.2醋酸缓冲液0.5ml，从标准液中吸出0.5ml至第一管，依次作倍比稀释。此系列标准液50μl中含有0.125～8pmol。临用前稀释。
（4）10mm×100mm玻璃试管，NSB管加缓冲液150μl，S0管加缓冲液50μl，S1～7管加不同浓度标准液50μl测定管加待测样品50μl。
（5）向每管加酰化试剂10μl，即刻用力摇5～10s。各管加[3H]-ScAMP液50μl。
（6）除NSB管外，各加抗血清100μl。混匀，放4℃反应2.5h。向每管加冷缓冲液1ml。
（7）将反应液滴加至联接抽气泵的微孔滤膜上抽滤，再加2ml冷缓冲液洗涤反应管，亦加至膜上抽滤。取下滤膜，放80℃ 30min。
（8）将滤膜放至预先加有5ml闪烁液的计数瓶中，放2h后在自动液体闪烁测量仪上测放射性。
（9）以B0/B为纵坐标，标准管浓度为横坐标，在普通方格纸上作图，可得y轴截距为1的直线。依样品管的B0/B值，从标准曲线上得至相对应的浓度。再乘10得cAMPnmol/L。
5.6 正常值
3H-标记法：2.5～4.7nmol/mg·肌酐
5.7 化验结果临床意义
（1）升高：尿毒症、高钙血症。
（2）降低：甲状腺功能减退、支气管哮喘、甲状旁腺功能减退。
5.8 附注
（1）酰化试剂必须新鲜配制。琥珀酸酐丙酮液放4℃冰箱保存不应超过1个月。
（2）微孔薄膜分离B·F成本低廉，闪烁液可重复使用5次以上。该法为非均相测量，测量放射性的效率约20%～25%。
5.9 相关疾病
高钙血症、支气管哮喘