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尿C肽

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1 拼音

niào Ctài

2 英文参考

Urine C-peptide

3 概述

CP不受外源性胰岛素及胰岛素抗抗体干扰,故判断B细胞功能最真实、最全面、最敏感的指标之一。

4 尿C肽的医学检查

4.1 检查名称

尿C肽

4.2 分类

体液排泄物检查 > 尿液检查

4.3 化验取材

尿液

4.4 尿C肽的测定原理

放射性标记物125I-CP和标本(或标准品)中的C肽与有限的C肽抗体竞争性结合,达到平衡后,加入分离剂,测定沉淀物中放射活性,与标本中C肽含量成负相关

4.5 试剂

(1)0标准品:含硫柳汞的BSA硼酸缓冲液(冻干)。用20ml蒸馏水去离子水溶解,静置15~20min直至完全溶解。用前充分混匀,溶解后的试剂放-15℃以下保存

(2)人胰岛素C-C-肽标准品:人胰岛素C-C-肽标准品溶于含稳定剂的BSA-硼酸盐缓冲液中(冻干)浓度范围0.6~20ng/ml,用方法B,还需一低浓度标准品0.15ng/ml,每瓶标准品用1ml蒸馏水或去离子水溶解,静置15~20min直至完全溶解,用前充分混匀,溶解后的试剂放-15℃以下保存。

(3)兔抗胰岛素C-C-肽血清:兔抗胰岛素C-C-肽血清溶于含硫柳汞的BSA-硼酸盐缓冲液中(冻干),已加绿色染料,用14ml蒸馏水或去离子水溶解,静置室温15~20min直至完全溶解,用前充分混匀。溶解后的试剂放-15℃以下保存。

(4)125I胰岛素C-C-肽:125I标记的人胰岛素C-C-肽溶于含硫柳汞的BSA-硼酸盐-EDTA缓冲液中(冻干)。用14ml蒸馏水或去离子水溶解,静置15~20min,直至完全溶解,用前充分混匀,溶解后的试剂放-15℃以下保存。

(5)羊抗兔抗体与沉淀混合液(GAR-PPT):羊抗兔抗血清PEG混合溶于含防腐剂的BSA-硼酸盐缓冲液中(冻干)。用35ml蒸馏水或去离子水溶解。充分混匀直至悬浊液混合均一,然后置室温至少30min并不断混匀,溶解后的试剂放-15℃以下保存。

(6)质控血清(质控-Ⅰ、质控-Ⅱ):含NaN3和其它稳定剂(冻干),用1.0ml蒸馏水或去离子水溶解、混匀,置室温15~20min,直至完全溶解,用前充分混匀,将质控血清当作未知标本进行测定,每批的具体数值可从各试剂的质控图上找到。溶解后的试剂放-15℃以下保存。

(7)PEG(25%)。

2~8℃以下保存。

4.6 操作方法

(1)方法1:

①溶解冻干的试剂或将冻存的试剂彻底复融,操作温度不得高于25℃,用前轻轻混匀。

②将试管编号,均做双管。

③加入试剂:

A.总计数管:放置一旁至步骤④。

B.非特异性结合管(NSB):100μl 0标准品。

C.0标准品:100μl 0标准品+200μl兔抗胰岛素C-C-肽血清。

D.胰岛素C-C-肽标准品(A-E):100μl标准品+200μl兔抗胰岛素C-C-肽血清。

E.质控和待测标本:100μl血清或尿标本+200μl兔抗胰岛素C-C-肽血清。

④每管加200μl 125I胰岛素C-C-肽。

⑤轻轻混匀,试管中不能产生气泡,2~8℃孵育16~24h。

⑥沉淀剂用前充分混匀,除总计数管外每管加500μl沉淀剂。

⑦轻轻混匀,试管中不得有气泡,20~25℃孵育15~20min。

⑧在20~25℃以760×g离心20min。

⑨倾出管内上清液体(总计数管除外),用吸水纸吸干。

⑩用γ计数器计数沉淀和总计数管。

(2)方法2:

①溶解冻干的试剂或将冻存的试剂彻底复融。操作温度不得高于25℃,用前轻轻混匀。

②将试管编号,均做双管。

③加入试剂。

A.总计数管:放置一旁至步骤⑤。

B.非特异性结合管(NSB):100μl 0标准品。

C.0标准品:100μl 0标准品+200μl兔抗胰岛素C-C-肽血清。

D.胰岛素C-C-肽标准品(A-E):100μl标准品+200μl兔抗胰岛素C-C-肽血清。

E.质控和待测标本:100μl血清或尿液标本+200μl兔抗胰岛素C-C-肽血清。

④2~8℃孵育16~24h。

⑤每管加200μl 125I胰岛素C-C-肽。

⑥轻轻混匀,不得有气泡,2~8℃孵育16~24h。

⑦沉淀剂用前充分混匀,除总计数管外,每管加500ml。

⑧轻轻混匀,不得有气泡,20~25℃孵育15~25min。

⑨在20~25℃以760×g离心20min。

⑩倾出管内上清液(总计数管除外),用吸水纸吸干。

⑪用γ计数器计数沉淀和总计数管。

4.7 正常值

45~117μg/24h。

4.8 化验结果临床意义

(1)升高:胰岛细胞瘤、胰岛素自身免疫综合征

(2)降低:1型糖尿病

4.9 附注

留尿送检时,并需注明是否用胰岛素治疗。

4.10 相关疾病

1型糖尿病、糖尿病

相关文献

开放分类:化验及医学检查体液和排泄物检查尿液检查
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  • 评论总管
    2019/10/16 11:02:45 | #0
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本页最后修订于 2013年3月3日 星期日 0:30:18 (GMT+08:00)
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