脑脊液脑膜炎球菌抗原

目录

1 拼音

nǎo jǐ yè nǎo mó yán qiú jūn kàng yuán

2 英文参考

cerebrospinal fluid meningococcal antigen

3 概述

由脑膜炎双球菌、结核分枝杆菌或其他化脓性细菌引起的蛛网膜、软脑膜化脓性炎症,分别称为流行性脑脊髓膜炎(流脑)、结核性脑膜炎和细菌性脑膜炎。细菌性脑膜炎的病原菌种类和发病年龄相关。临床表现为发热、头痛、呕吐、嗜睡、惊厥、意识障碍、脑膜刺激征、颈项强直等。流脑患者皮肤可见瘀点。结核性脑膜炎以低热、盗汗等症状开始。

4 脑脊液脑膜炎球菌抗原的医学检查

4.1 检查名称

脑脊液脑膜炎球菌抗原

4.2 分类

体液和排泄物检查 > 脑脊液检查

4.3 化验取材

脑脊液

4.4 脑脊液脑膜炎球菌抗原的测定原理

金黄色葡萄球菌的细胞壁中含有一种特殊的蛋白质抗原(staphylococcal protein A,SPA)。它具有与人和多种动物(哺乳类动物)的IgG Fc段结合的特性。若将特异性IgG型抗体吸附在SPA上,使其成为致敏载体,当与其抗体相应的抗原结合,即可出现凝集现象。

4.5 试剂

(1)SPA菌体试剂的制备:

①菌种选择:已知90%以上的金黄色葡萄球菌含有SPA,每个菌体细胞壁上约有8万个SPA分子,每个SPA分子能结合两个或更多个IgG分子。100u的比容菌体能结合0.8~1.5mg IgG。但不同菌株所含SPA的量有显著差异。国际上通用的标准菌株是Cowanl株(NCTC-8530和ATCC-12598),国内引进株编号为2611。对照用不含SPA的Wood46株,国内自行分离的No1800株为含SPA株,Z12株为不含SPA株。

②菌液制备:多采用酪蛋白培养基、牛心肌浸汤琼脂,或肉浸汤营养琼脂。

将选定菌种接种在琼脂平板上,37℃培养18h,选单个菌落移种于肉汤内,37℃16~18h再移种在琼脂平板上,37℃18~24h。用0.01mol/L pH7.2PBS或含10.0g/L葡萄糖、10.0g/L 2,3,5-三苯四氮唑的PBS洗下菌苔,以3500r/min离心30min。沉淀物用PBS洗2次,按比容用含0.5%甲醛PBS配成10%细菌悬液。放室温3h,再置56℃30min或80℃15min。取出用PBS洗3次,按比容配成10%悬液,加NaN3至1.0g/L,4℃保存。

(2)抗体标记:取上述10%菌悬液1ml,用PBS洗3次后恢复至原体积,加入特异性高效价抗血清0.1ml,充分混匀,37℃30min,不时振摇,离心,用PBS洗2次,按比容用含1.0g/L,NaN3的PBS配成10%菌悬液,此即为抗体标记的SPA应用液,4℃保存。

(3)各种对照用菌株、受检标本。

4.6 操作方法

(1)玻片法:

①将受检标本与SPA应用液各1滴于玻片上混匀,2min内观察结果。

②以十号多少表示凝集强度:(+)表示无明显凝集;(++)表示有明显凝集;(+++)及(++++)表示凝集颗粒大,出现快,液体澄清;(-)表示全无凝集。以(++)凝集为判断终点。

(2)试管法:

①将受检标本进行适当稀释,加入适量SPA应用液,混匀,放37℃水浴2~3h,每30min观察一次结果。

②在30min内有明显凝集颗粒者为强阳性;管内呈均匀混浊无凝集颗粒为阴性。

4.7 正常值

阴性。

4.8 化验结果临床意义

阳性见于流行性脑脊髓膜炎(流脑)。有助于流脑的早期诊断。

4.9 附注

(1)试验需作多种对照如未标记的SPA菌液,正常兔血清标记的SPA菌液,抗体标记的SPA菌液,抗体标记不含SPA的菌液,以证明其特异性。

(2)用前仔细检查试剂本身有无自凝颗粒。

(3)本试验的特异性取决于标记用抗血清的特异性,凝集反应的强弱取决于抗血清的效价高低,故应选用特异性强和效价高的抗血清。

(4)SPA与各种属IgG的亲和力有所不同,与猪IgG亲和力最强,依次为狗、兔、人、猴、豚鼠、小鼠和牛。与绵羊和大鼠IgG的亲和力较弱,与牛犊、马、山羊和鸡IgG则不起反应。国内常用诊断血清系用兔、山羊或马免疫制备,因此必须选用兔抗血清。

4.10 相关疾病

结核性脑膜炎、头痛、意识障碍

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