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脑脊液蛋白电泳

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1 拼音

nǎo jǐ yè dàn bái diàn yǒng

2 英文参考

cerebrospinal fluid protein electrophoresis

3 概述

中枢神经系统发生病变时(如感染炎症肿瘤外伤出血水肿等),脑脊液中的化学成分都可能发生变化,可通过测定脑脊液中的某些化学成分的变化,作为临床诊断、治疗疾病和预后观察的依据。脑脊液蛋白成分变化就是其中之一。

4 脑脊液蛋白电泳的医学检查

4.1 检查名称

脑脊液蛋白电泳

4.2 分类

体液排泄物检查 > 脑脊液检查

4.3 化验取材

脑脊液

4.4 脑脊液蛋白电泳的测定原理

带电粒子在电场中的移动现象称为电泳。带负电荷的粒子向电场的正极移动;带正电荷的粒子则向负极移动。

蛋白电泳是利用不同蛋白的分子大小和表面电荷的差别,在直流电场中的不同泳动速度进行蛋白质分离。蛋白电泳的速度与蛋白质分子的电荷多少、分子量的大小、分子的形态及等电点有关。带电荷越多泳动越快;分子量和体积越大的蛋白分子泳动速度越慢;等电点低的蛋白分子泳动快,等电点高的泳动慢。按其泳动速度可从正极端起,依次分离出白蛋白,α1、α2、β和γ球蛋白五个组

分,它们的分子量及等电点见表1。

电泳过程中电渗流从阳极向阴极流动,与蛋白电泳的方向相反,因此泳动最慢的γ-球蛋白常位于原点,甚至移向负极。

蛋白电泳支持介质的种类近年来发展很多,如琼脂糖、聚丙烯酰胺醋酸纤维素等,而以后者临床检验多用。醋酸纤维素薄膜分辨力较好,即使通电时间较短(一般0.5~1h),区带界限也很清楚。其另一优点为对蛋白质的吸附很少,拖尾现象轻微,洗脱后几乎可得到无色的背景。便于扫描或洗脱定量。

4.5 试剂

(1)巴比妥-巴比妥钠缓冲液(pH8.6±0.1,离子强度0.06):称取巴比妥2.21g,巴比妥钠12.36g于500ml蒸馏水中,加热溶解,待冷至室温后,再用蒸馏水补足至1L。

(2)染色液

①丽春红S染色液:称取丽春红S0.4g及三氯醋酸6g,用蒸馏水溶解,并稀释至100ml。

氨基黑10B染色液:称取氨基黑1080.1g,溶于无水乙醇20ml中,加冰醋酸5ml,甘油0.5ml,使溶解。另取磺基水杨酸2.5g,溶于74.5ml蒸馏水中,再将二液混合摇匀。

(3)漂洗

①5%(V/V)醋酸溶液:适用于丽春红染色的漂洗。

甲醇45ml、冰醋酸5ml和蒸馏水50ml,混匀。适用于氨基黑10B染色的漂洗。

(4)透明液:称取柠檬酸(C6H6Na3O7·2H2O)21g和N-甲基-2-吡咯烷酮150g,加蒸馏水溶解,并稀释至500ml。亦可选用十氢萘或液体石蜡透明。

(5)0.4mol/L氢氧化钠溶液。

4.6 操作方法

使用醋酸纤维素膜操作法。

4.7 正常值

前清蛋白 0.02~0.06;

清蛋白 0.55~0.66;

球蛋白α1 0.03~0.08;

α2 0.06~0.09;

β 0.10~0.18;

γ 0.04~0.13。

4.8 化验结果临床意义

升高:前清蛋白升高,见于先天性或梗阻性脑积水,脑萎缩等;清蛋白升高,见于椎管内阻塞、脑肿瘤等;α球蛋白升高,见于脑部急性炎症(如细菌性脑膜炎脊髓灰质炎等);β球蛋白升高,见于小脑萎缩、脊髓小脑变性肌萎缩侧索硬化症动脉硬化脑血栓等;γ球蛋白升高,见于脑瘤、多发性脑膜炎麻痹性痴性痴呆结节病及慢性脑膜炎等。

4.9 附注

(1)每次电泳时应交换电极,可使两侧电泳槽内缓冲液的pH值维持在一定水平。然而,每次使用薄膜的数量可能不等,所以其缓冲液经多次使用后,就将缓冲液弃去。

(2)电泳槽缓冲液的液面要保持一定高度,过低可能会增加γ-球蛋白的电渗现象(向阴极移动)。同时电泳槽两侧的液面应保持同一水平面,否则,通过薄膜时有虹吸现象,将会影响蛋白分子的泳动速度。

(3)电泳失败的原因:①电泳图谱不整齐:点样不均匀、薄膜未完全浸透或温度过高致使膜面局部干燥水分蒸发、缓冲液变质;电泳时薄膜放置不正确,使电流方向不平行;②蛋白各组分分离不佳:点样过多、电流过低、薄膜结构过分细密、透水性差、导电差等;③染色后白蛋白中间着色浅:由于染色时间不足或染色液陈旧所致;若因蛋白含量高引起,可减少血清用量或延长染色时间,一般以延长2min为宜。若时间过长,球蛋白百分比上升,A/G比值会下降;④薄膜透明不完全:将标本放入烘箱,温度未达到90℃以上,透明液陈旧和浸泡时间不足等;⑤透明膜上有气泡,玻璃片上有油脂,使薄膜部分脱开或贴膜时滚动不佳。

4.10 相关疾病

脊髓灰质炎、肌萎缩侧索硬化麻痹性痴呆、痴呆、结节病

相关文献

开放分类:化验及医学检查体液和排泄物检查脑脊液检查
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  • 评论总管
    2021/1/21 18:00:43 | #0
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本页最后修订于 2013年3月4日 星期一 17:17:23 (GMT+08:00)
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