梅毒螺旋体制动试验

目录

1 拼音

méi dú luó xuán tǐ zhì dòng shì yàn

2 英文参考

treponema pallidum immobilizing test

3 概述

梅毒螺旋体(treponema pallidum,TP)属密螺旋体属,是人类梅毒的病原体,梅毒是人类的主要性病之一。梅毒患者血清中有两类抗体;一类是反应素,是IgA与IgM型混合抗体,能与哺乳动物心肌提取的心类脂抗原发生非特异反应,对机体无保护作用,但可供血清学诊断筛选试验用。另一类是梅毒螺旋体特异性抗体,在厌氧条件下和有补体存在时,能抑制活的梅毒螺旋体运动,并能将其杀死或溶解,可以用来对梅毒进行确证实验。梅毒螺旋体培养非常困难,故主要用血清学诊断方法进行诊断。

4 别名

密螺旋体活动试验;TPIT

5 检查名称

梅毒螺旋体制动试验

6 分类

血清学检查 > 其他

7 化验取材

血液

8 梅毒螺旋体制动试验的原理

用活的梅毒螺旋体Nichols株与患者灭活血清及新鲜补体混合,在厌氧条件下孵育16h,然后在暗视野显微镜下观察有活动力的螺旋体的百分数,并与正常人血清对比。若血清内有梅毒螺旋体抗体,则可抑制梅毒螺旋体,使其失去活动力。若有活动力的螺旋体数为对照组的40%或40%以下,则为阳性。

9 试剂

本试验有商品试剂盒。2~10℃避光可保存1年。但试剂瓶开启后应及时使用。

10 操作方法

(1)用吸收剂对业经56℃水浴30min灭活的被检血清作1∶5稀释,充分混匀。

(2)加0.03ml分别用PBS和吸收剂作1∶5稀释过的非特异性控制血清于固着抗原螺旋体的玻片反应圈内。此为阴性对照。

(3)加0.03ml经吸收剂作1∶5稀释过的最小反应性(+)控制血清于玻片反应圈内。此为阳性对照。

(4)加0.03ml经吸收剂作1∶5稀释过的被检血清于玻片反应圈内。

(5)将此玻片置于湿盒内,36℃±1℃,保温30min。

(6)将玻片置于玻片架上,用PBS(pH值7.2±0.1)冲淋玻片5s,然后浸入此PBS中5min。再拎出、浸没玻片,濯洗30次。

(7)用业经120℃ 15min消毒的蒸馏水冲淋5min。用吸水纸轻轻将玻片吸干。

(8)加0.03ml异硫氰酸荧光素标记的抗人IgG(FITC-标记抗人IgG)于每个反应圈内。重复5~7步骤。

(9)加固定液1小滴于玻片上,再复上盖玻片,切勿形成气泡。

(10)将玻片置荧光显微镜下,先用钨灯为光源,在暗视野下寻找Nichols螺旋体。然后改用高压汞灯,经滤光片选取紫外光段即可观看荧光结果。读片应在4h内完成。

11 正常值

阴性。

12 化验结果临床意义

本试验敏感性和特异性均高,但操作复杂,临床上少用,仅用于疑难病人的诊断和研究工作。

13 附注

早期梅毒菌先出现阳性,特异性为94%~100%。

14 相关疾病

梅毒

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