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硫酸锌浊度试验

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1 拼音

liú suān xīn zhuó dù shì yàn

2 英文参考

Zinc sulfate turbidity test

3 概述

测定血浆蛋白的水平和分析其成分是肝脏疾病重要试验之一。有关这方面的测定在别外章节中已有详尽讨论,本节中主要叙述一些和蛋白质代谢有关的简单血清胶体稳定试验。

各种血清胶体稳定性试验的原理基本相同,但所用的试剂不同,促进和抑制絮浊的作用有差异,目前临床常用的有ZnTT试验。

4 检查名称

硫酸锌浊度试验

5 分类

血液生化检查 > 蛋白质测定

6 硫酸锌浊度试验的原理

肝脏疾病时,血清蛋白的质与量有所改变,当血清和麝香草酚巴比巴比妥液试剂作用时,麝香草酚可减低血清内脂类物质的分散力,而血清经低离子强度的巴比妥缓冲液稀释后,球蛋白的部分溶解度降低而产生沉淀,这种沉淀是球蛋白、脂类和麝香草酚复合体,使溶液变浊,其浑浊程度与沉淀的多少与肝病的严重程度有一定的关系。

7 试剂

(1)麝香草酚-巴比妥缓冲液(pH7.55±0.05)精确称取巴比妥3.09g、巴比妥钠1.69g及麝香草酚6g,倒入经煮沸除去二氧化化碳的1000ml热蒸馏水中,继续加热使溶解。室温静置过夜,若显混浊,可加麝香草酚细末少许。并激烈振荡使结晶析出,过滤后得透明溶液。此液pH7.55±0.05,装瓶内塞紧贮室温备用。若发现混浊丢弃不用

(2)48.1mmol/L氯化钡标准液:精确称取氯化钡二水合物1.175g,用水溶解并转移入100ml容量瓶内,再以水稀释至100ml刻度。

(3)0.1mol/L硫酸:用1mol/L氢氧化钠标定

8 操作方法

吸新鲜血清0.1ml,加入麝香草酚巴比巴比妥缓冲液6ml(如血清用半量,缓冲注亦用半量),混和。室温静置30min后,将测定管颠倒混匀数次后,用分光光度计于650nm进行比浊,将比色杯置于比色座的远光电管端。以水校正吸光度到零点,读取各管读数,从标准曲线上查出单位数。

(1)硫酸钡混悬原液的配制,于100ml容量瓶内,加入0.1mol/L硫酸约70ml,冷至10℃,滴加48.1mmol/L氯化钡溶液2.70ml(边滴边摇),再以0.1mmol/L硫酸稀释至刻度。混匀后即成具有麝香草酚浊度20u的原液。

(2)按下表(表1)将硫酸钡混悬液配成各种不同浓度的标准比浊液:

(3)用分光光度计于650nm进行比浊,比浊前将管内液体温和地颠倒混和10次,将比色皿置于比色座的远光电管端,以水校正吸光度到零点,读取各管吸光度读数,与其对应的单位数作图,绘成标准曲线。

9 正常值

2~12U。

10 化验结果临床意义

(1)显著增高:

①肝病:肝硬化、慢性肝炎活动期、肝细胞癌、急性肝炎、自身免疫性肝炎等。

②非肝病:慢性炎症胶原性疾病、结核类肉瘤病多发性骨髓瘤恶性肿瘤等。

(2)显著降低:肝内胆汁瘀滞、肝外胆汁瘀滞、多发性骨髓瘤、伴高度蛋白尿的疾病、长期使用肾上腺皮质激素、长期使用免疫抑制剂抗肿瘤药等。

11 附注

(1)配制硫酸钡标准比浊管时注意以下几点:①硫酸试剂的浓度硫酸在反应中虽然是过量的,但当浓度小于0.1mol/L,形成的硫酸钡浊度低;浓度大于0.1mol/L浊度增高。因此,硫酸试剂须严格校正至0.1mol/L。②反应温度:10℃时形成的硫酸钡颗粒细,浊度较高,结果重复性好。25℃、30℃、37℃时形成的颗粒较粗,浊度较低,重复性不易控制。③操作手法:混和方法不同,形成的硫酸钡颗粒大小不同,结果相差很大。所以,每次按规定操作可提高精密度

(2)麝香草酚缓冲液易变质,但如保存于冰箱中,可因结晶逐渐析出而降低敏感度,故平时使用时,仍应置室温中,如显混浊,即不能用。

(3)麝香草酚应为洁白晶体,如带黄色,须重结晶处理。可按下法重结晶精制:取麝香草酚100g,溶于100ml 95%乙醇中,以吸滤漏斗过滤。滤液中加入于100ml冷蒸馏水,混匀。静置20min后吸滤,用冷蒸馏水洗结晶两次,可得到洁白的结晶,置干燥器内待完全干燥后使用。

(4)用巴比妥配制的试剂不能久置,超过2周后,TTT结果有增高趋势,一个月后明显偏高。一般认为此试剂不稳定与巴比妥有关,因为久置后,巴比妥试剂的红外线吸收曲线已有明显变化。本文所介绍麝香草酚-Tris-HCl缓冲液,具有稳定性高,所配TTT试剂放室温至少可保存3个月,且浊度结果受室温变化的影响小。

(5)光电比浊法与光电比色法有所不同,比浊法混浊液除了吸收一部分入射光以外,悬浮的颗粒还能使一部分入射光反射折射,因此光电池所感受的光除了经过吸收以后的出射光外,还有折射的光,后者不是平行光束,混和液和光电池之间距离越大,则折射光的影响越小。所以在采用72型分光光度计比浊时,比色杯的位置应放在比色杯座的远光电池的一边,可以提高准确度

(6)麝香草酚缓冲液中麝香草酚含量是影响结果的重要因素之一。浊度单位高低和麝香草酚含量成正比,要求使用25℃的麝香草酚饱和溶液

12 相关疾病

肝硬化、肉瘤、多发性骨髓瘤

相关文献

开放分类:血液生化检查化验及医学检查蛋白质测定
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参与讨论
  • 评论总管
    2019/9/22 20:46:03 | #0
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本页最后修订于 2013年3月4日 星期一 17:51:34 (GMT+08:00)
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