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抗-SS-A

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1 概述

抗SS-A(Ro)识别的表位位于细胞内与小核核酸hY1、hY3、hY4、hY5形成复合物的两种蛋白质(60×103和52×103)上。这种核糖核酸蛋白颗粒的功能目前还未知,患者血清内的自身抗体可能针对其中一种,或者更常见的是同时针对两种蛋白复合物。从分子生物学观点看,两种蛋白及它们基因高度保守,有特征性重复,两者间并无密切联系。因此,同时出现抗两种蛋白的抗体并非由于交叉反应

2 抗-SS-A的别名

抗SS-A(Ro)抗体

3 抗SS-A(Ro)抗体的医学检查

3.1 检查名称

抗SS-A(Ro)抗体

3.2 分类

免疫学检查 > 自身抗体测定

3.3 抗SS-A(Ro)抗体的测定原理

用间接免疫荧光检测时,抗SS-A/Ro、抗SS-B/La阳性结果表现为核的细斑点型免疫荧光,但抗SS-A/Ro引起的荧光亮度较弱。其操作与原理均与抗核抗体检测相同。双向免疫扩散法仍为抗SS-A/Ro、抗SS-B/La的常用检测方法,但敏感性不高。目前常用免疫印迹法,其原理可参看抗Sm抗体测定。最近也有人用基因重组的52kD和60kD蛋白质建立ELISA法测定抗SSA/Ro抗体,用重组48kD蛋白质建立ELISA法测抗SS-A/La抗体,其敏感性较之免疫扩散法约高千倍,但因特异性问题(重组抗原中常含有细菌产物)未广泛应用。一种敏感性和特异性都很高的方法是放射免疫沉淀法,此法是用放射性36S-蛋氨酸32P-正磷酸盐标记组织培养细胞,标记上36S的代表所有蛋白质,标记上32P的代表磷酸化蛋白,此外,细胞内RNAs也标记上32P。将待测血清与标记上放射性核素组织细胞提取物混合,抗体与标记抗原反应,形成免疫复合物,用葡萄球菌A蛋白使免疫复合物沉淀,溶解后行SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳放射自显影,与自身抗体结合的放射性标记核抗原形成的条带即可显现出来,参照标准品形成的条带进行分析,即可做出诊断。此法目前还只限于实验室研究。

3.4 试剂

血清    1ml。

3.5 操作方法

(1)沉淀法:与抗Sm、抗RNP或抗SS-B等类似的检测方法不同,小牛、兔、胸腺提取物由于没有足够浓度的Ro抗原,不能用于免疫双扩散和反相免疫电泳,而主要从人脾组织或人培养细胞(WI-L2)获得。沉淀带与参考血清相同,核实为SS-A特异性。

(2)免疫印迹法:抗原采用细胞培养物如HeLa、MolT-4。当与参考血清有两条相同典型带(60×103和52×102)时,可确证为抗SSA(Ro)阳性。

(3)ELISA:可用亲和纯化或重组52×103和60×103蛋白,或相对纯化的hY-RNP颗粒作抗原。

3.6 正常值

正常人为阴性

3.7 化验结果临床意义

(1)干燥综合征SLE:根据方法灵敏度的不同,原发性干燥综合征患者体内抗SS-A(Ro)阳性率可达到70%~100%,而在SLE中为24%~60%。抗SS-A阳性的SLE患者常有干燥综合征或光敏感性疾病,尤以抗体为高滴度时。在这些病例中抗SS-B(La)通常也为阳性,并且有证据表明常常可据此与原发性干燥综合征相区别,虽然这还不是很明确。抗SS-A和抗SS-B阳性的原发性干燥综合征患者通常表现出更多的腺体症状,如脉管炎淋巴结病。

SLE变异型患者,如亚急性皮肤性狼疮(70%~90%)、伴补体C2或C4缺陷的SLE(50%~90%),其抗SS-A(Ro)阳性率在总体上常常比典型的SLE患者高,在这些病例中,抗SS-B(La)通常是检测不到的。1%的SLE患者,即使在活动期也不能查及ANA,但60%的这类病例可查及抗SS-A(Ro)。

(2)新生儿狼疮,先天性心脏病:抗SS-A(Ro)和抗SS-B(La)可作为孕妇的产前监视指标。孕妇或带有先天性心脏病或狼疮的新生儿,抗SS-A(Ro)阳性率达到100%,抗SS-B(La)也通常可查及,这些抗体认为是经胎盘获得自身免疫的典型实例。5%~10%抗SS-A阳性母亲可生产出具有这些症状的患儿,如抗SS-A(Ro)滴度较低,抗SS-B(La)阴性,或抗SS-A在免疫印迹法中未测及,这种风险会下降。在怀孕和生产时,大多数母亲不符合SLE或原发性干燥综合征诊断标准,很多人甚至完全无症状,一定时间后,大多数妇女可进展为有中等症状的SLE、原发性干燥综合征或结缔组织病

(3)HLA-DR3与抗SS-A(Ro)形成的关系:抗SS-A(Ro)形成的遗传背景与HLA-DR3有关。抗SS-A(Ro)阳性的SLE、亚急性皮肤性狼疮、原发性干燥综合征、先天性心脏病或新生儿狼疮患者DR3阳性较多,在后两种病例中,患儿母亲几乎都是DR3携带者,但患儿并非必定是携带者。

(4)抗SS-A(Ro)的临床特异性:这些疾病的临床特异性相对较低。即使应用灵敏度相对较低的免疫扩散法,健康妇女抗SS-A的阳性率也达0.44%,如果用灵敏度高的检测法,这个百分比还要提高。遗憾的是,抗SS-A检测不能区分原发性或继发性干燥综合征。

3.8 附注

抗SS-A(Ro)经常能在ANA阴性的SLE患者中查及,许多基质特别是常规甲醇固定的Hep-2细胞,在IFT反应中,抗SS-A不以ANA的形式表现。这是因为其滴度低,部分抗原位于胞质或者在固定的过程中抗原被洗掉。如临床怀疑为SLE,而ANA阴性,应检测抗SS-A(Ro)以及抗磷脂抗抗体

虽然已知抗SS-A(Ro)有两种不同的靶抗原(Ro52、Ro60),但大多数检测方法,如免疫扩散、反相免疫电泳、以纯化抗原建立的ELISA法,不能区分它们。免疫印迹法和以Ro52、Ro60两种重组抗原建立的ELISA法,可以分别检出两种抗SS-A(Ro)。根据免疫印迹法统计的资料报道,Ro52抗体与干燥综合征有更强的联系,而Ro60抗体与SLE相关性更密切。但由于30%的Ro阳性血清免疫印迹法为阴性,所以该结论有局限性,特别是由于Ro60抗原表位是部分构象性的,在免疫印迹法中被破坏。如采用足够灵敏的方法,绝大多数Ro阳性血清可以检测到两种抗体。

3.9 相关疾病

干燥综合征

相关文献

开放分类:化验及医学检查免疫学检查自身抗体测定
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  • 评论总管
    2020/10/28 8:42:12 | #0
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本页最后修订于 2013年2月23日 星期六 20:25:37 (GMT+08:00)
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