抗-HEV

目录

1 概述

戊型肝炎病毒(hepatitis E Virus,HEV)为经肠道传播引起戊型肝炎的病原体,呈球形,表面无囊膜,二十面体立体对称,表面有突起结构,内部核酸为单股RNA,属嵌杯状病毒科的嗜肝RNA病毒属。HEV有表面抗原HEVAg,可刺激机体产生抗体。

2 别名

抗-HEV

3 抗戊型肝炎病毒抗体的医学检查

3.1 检查名称

抗戊型肝炎病毒抗体

3.2 分类

血清学检查 > 病毒的血清学检查

3.3 化验取材

血液

3.4 抗戊型肝炎病毒抗体的测定原理

夹心法。包被板上的戊型肝炎抗原(HEVAg)与待测血清中的抗-HEV结合后,再与酶标记抗-人IgG(HRP-抗-人IgG)结合,形成 HEVAg·抗-HEV·HRP-抗-人IgG复合物,经与底物作用后呈现橘黄色反应为阳性。待测血清中无抗-HEV时则不呈色为阴性。

3.5 试剂

(1)包被板:用3块板分别包被HEVAg A、B和阴性对照蛋白。

(2)稀释液:Tris缓冲液(含热处理的正常羊血清、牛血清白蛋白和稳定剂)。

(3)酶结合物:HRP-抗-人IgG,用时以稀释液作1∶1000稀释。

(4)底物液:1片OPD加入5ml底物缓冲液中溶解混匀。为无色液体。

(5)洗涤液:0.01mol/L PBST缓冲液(一块板用300ml)。

(6)终止液:1mol/L H2SO4溶液。

3.6 操作方法

(1)每个待检血清同时做3块板。

(2)加样品。

①3块板上的每孔加200μl稀释液。

②各板上的A1B1孔加10μl稀释液为空白,C1D1孔加10μl阴性对照血清,E1F1孔加10μl阳性对照血清,G孔以后加10μl待测血清(1∶21)混匀,封板,置37℃温箱中30min。

(3)洗涤板:用PBST洗涤液洗板6次,拍干。

(4)加酶结合物:每孔加HRP-抗-人IgG稀释液100μl,封板,置37℃温箱中30min。

(5)洗涤板:同3。

(6)加底物显色:每孔加新鲜配制的底物液100μl,封板,置室温暗处15min,每孔加终止液50μl。

(7)比色:用酶联检测仪波长为492nm测每孔A值。

3.7 正常值

A值<0.3,阴性。

3.8 化验结果临床意义

戊型肝炎(hepatitis E,HE)是由戊型肝炎病毒(HEV)引起的病毒性肝炎。抗-HEV是HEV感染人体后产生的特异性抗体,在急性期时增高,恢复期时下降。在急性肝炎患者中的检出率约为30%左右(北京地区),与甲型肝炎近似。抗-HEV可做为HEV感染的早期特异性诊断指标。

3.9 附注

(1)严格遵守操作规程。

(2)质量控制空白孔A值<0.2,阴性对照A值>0和<0.2(减去空白),阳性对照A值>0.8(减去空白)。

(3)未用完的包被板放入含有干燥剂的原袋中密闭保存。

(4)加样品和试剂后勿在水浴中保温。

(5)底物片和底物液勿放在强光下,用非金属的小镊子取OPD片。

(6)其它同ELISA法。

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