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抗-HBs

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1 概述

HBV感染免疫注射HBV疫苗都可产生抗-HBsHBsAb)。HBsAb有IgMIgG两型,前者发生在感染早期,后者发生稍后,它是一种保护性抗体,有良好的中和作用,并能在血清中长期存在。抗HBs是HBV感染后主要的保护性抗体,一般出现于HBsAg消失后,在乙肝恢复期缓慢上升,可持续多年。抗HBs阳性表示急性乙肝或隐性感染已经恢复,并具有对HBV的免疫力,注射乙肝疫苗后,血清中出现抗HBs是免疫成功的标志。

2 抗-HBs的别名

乙型肝炎表面抗体;HBsAb

3 抗-HBs的医学检查

3.1 检查名称

抗-HBs

3.2 分类

血清学检查 > 病毒的血清学检查

3.3 取材

血液

3.4 抗-HBs的测定原理

采用纯化HBsAg包被反应板,加入待测标本,同时加入HBsAg-HRP,当标本存在抗-HBS时,该抗-HBS与包被HBsAg结合并与酶结合物形成HBsAg-抗HBS-HBsAg-HRP复合物,加入TMB底物产生显色反应,反之则无显色反应。

3.5 试剂

0.05mol/L碳酸盐缓冲液,pH9.6(Na2CO3 0.16g、NaHCO3 0.29g,NaN3 0.02g,加蒸馏水至1000ml,4℃保存);0.05mol/L PBS-Tween20缓冲液,pH7.4(NaCl 8g,KH2PO4 0.2g,NaH2 PO4·12H2O 2.9g,KCl 0.2g,Tween20 0.5ml,加蒸馏水至1000ml);0.02mol/L Tris-HCl-Tween 20缓冲液,pH7.4(Tris 2.42g,1mol/L HCl 3ml,Tween 0.5ml,加蒸馏水至1000ml)。抗HBs·IgG(包被用),辣根过氧化酶标记抗HBs(抗HBs·HRP)和底物(邻苯二胺)随药盒配备或自购。

3.6 操作方法

(1)取用碳酸盐缓冲液作适当稀释的抗HBs·IgG(用抗HBs血清自提或随药盒配备)包被聚苯乙烯反应板,每孔加0.1ml(最后1孔不加,作为空白)。加盖,放4℃ 24h。次日用Tris-HCl-Tween20缓冲液洗涤3次,最后将板倒置于吸水纸上,使各孔液体流尽。

(2)各孔加入待测血清0.1ml(观察滴度可作不同稀释)。每板同时做阳性血清和阴性血清对照。加盖,置37℃ 2h后移去各孔液体,如上法洗涤3次。

(3)各孔加入底物溶液(0.1mol/L Na2HPO4 5.14ml,0.05mol/L枸橼酸4.86ml,邻苯二胺4mg,3%H2O2 0.05ml,避光,临用时配制)0.1ml,置室温暗处15~30min。待阳性对照孔充分显色后,各孔加入2mol/L H2SO4 0.05ml终止反应。

3.7 正常值

阴性

3.8 化验结果临床意义

抗HBs是HBV感染后主要的保护性抗体,一般出现于HBsAg消失后,在乙肝恢复期缓慢上升,可持续多年。抗HBs阳性表示急性乙肝或隐性感染已经恢复,并具有对HBV的免疫力,注射乙肝疫苗后,血清中出现抗HBs是免疫成功的标志。

阳性(或滴度升高):既往感染乙型肝炎病毒

(1)乙型肝炎感染是否有免疫力的检测指标。

(2)判断人群对乙型肝炎病毒的免疫水平。

(3)筛选乙型肝炎表面抗体阳性血源,制备高滴度抗乙型肝炎免疫球蛋白

(4)判定乙型肝炎疫苗母婴阻断率和保护率。

3.9 附注

(1)试剂使用前应摇匀,并弃去l~2滴后垂直滴加注意均匀用力。

(2)从冷藏环境中取出的试剂盒应室温平衡30min再进行测试,余者应及时封存,置冰箱内储藏备用。

(3)冷藏的待查标本需置室温平衡30min,再可检测。

(4)待检标本不可用NaN3防腐

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  • 评论总管
    2019/9/16 15:17:19 | #0
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