抗-HAV

目录

1 概述

甲型肝炎病毒(hepatitis A virus,HAV)为一直径为27~32nm的二十面体立体对称圆球形颗粒,无包膜,核心为单链正股RNA。HAV属小RNA病毒科嗜肝病毒属(hepatovirus)或嗜肝RNA病毒属(heparnavirus)。HAV主要通过手-口途径传播,潜伏期15~50天,平均28天。病毒常在患者血清ALT升高前的5~6天就存在于患者的血液和粪便中。发病2~3周后,随血清中特异抗体的产生,血清和粪便的传染性就逐渐消失。HAV的实验室诊断可进行抗体检测。临床上用的最多的是用ELISA方法查抗-HAV抗体。

2 别名

抗-HAV;HAV-Ab

3 甲型肝炎抗体的医学检查

3.1 检查名称

甲型肝炎抗体

3.2 分类

血清学检查 > 病毒的血清学检查

3.3 化验取材

血液

3.4 甲型肝炎抗体的测定原理

采用竞争ELISA法,即在板上包被HAVAg,然后同时加入待测血清和酶标抗-HAV,这样,待测血清中如有抗-HAV抗体,则与加入的酶标抗-HAV竞争与包被的HAVAg结合,加底物后作用后显色就浅或无色,为阳性。如待测血清中无抗-HAV抗体,则酶标抗-HAV就与包被的HAVAg结合,加底物作用后则显深色,为阴性。测得的光密度值与抗-AHV含量成反比。

RIA方法原理基本同上,亦用竞争法。

3.5 试剂

国内有商品化试剂盒供应,内含抗μ链包被的反应板(条),HAV应用液,抗HAV-HRP标记物,以及抗HAV IgM阴、阳性对照血清,样品稀释液,洗涤液,底物液及终止液等试剂。

3.6 操作方法

应按试剂盒说明书进行检测。一般试剂盒分两类。

(1)三步法:本法操作步骤较多,检测费时,有逐渐被二步法取代的趋势。

①加稀释样品:在包被反应板(条)孔内加入1∶1000倍稀释样品100μl,每次实验有阴、阳性对照,37℃保温2h,洗板3次。

②加HAV:各孔加HAV 100μl,37℃ 1h后移至4℃过夜,洗板3次。

③加抗HAV-HRP:各孔加抗HAV-HRP 100μl,37℃保温3h,洗板4次。

④显色:各孔加入底物液100μl,37℃保温15min。

⑤终止反应:各孔加入终止液50μl。

⑥结果判读。

目测法:无色或略带淡黄色为阴性,橘黄色为阳性。

比色法:在酶标仪上以试剂空白校零点,测各孔在492nm光密度值,当大于或等于4为阳性,低于4为阴性。

(2)二步法操作:按上法加稀释样品保温、洗涤后,同时各孔加HAV 50μl及抗HAV-HRP 50μl,混匀后37℃保温1h,洗板4次,以后同上法显色和判读结果。

3.7 正常值

阴性。

3.8 化验结果临床意义

抗-HAV总抗体,主要是IgG抗体。它产生于初期感染的早期,在发病时,血清中的滴度已相当高,2~3个月达高峰。抗-HAV IgG可维持很长时间,终生可检测到。抗-HAV IgG是保护性抗体,获得后一般不会再感染。出现抗-HAV IgG本身并不能诊断为甲肝,同时存在IgM类抗体才能做出诊断。出现抗-HAV IgG而无抗-HAV IgM是既往感染HAV并获得免疫力的一个标志。抗-HAV IgG检测可用于对甲肝的流行病调查和接种疫苗效果的观察。母亲感染过HAV的新生儿亦可检测到抗-HAV IgG达8个月。

3.9 附注

抗HAV-IgG出现较晚,而持续时间较长,在感染初期常为阴性。常用以流行病学调查。

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