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抗-ENA抗体

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1 概述

抗原有3个组成部分:组蛋白DNA、可溶性核抗原,后者因可溶于磷酸缓冲液(或生理盐水)中。故名可提取的核抗原(extractable nuclear antigen,ENA)。从分子水平识别ENA多肽抗体足20世纪80年代抗核抗体研究的重大进展,现已发现这类抗体有10余种,抗ENA抗体为其总称。

2 抗-ENA抗体的别名

抗浸出性核抗原抗体

3 抗-ENA抗体医学检查

3.1 检查名称

抗-ENA抗体

3.2 分类

免疫学检查 > 自身抗体测定

3.3 取材

血液

3.4 抗-ENA抗体的测定原理

(1)对流免疫电泳法:为经典的检测抗ENA抗体(主要包括抗RNP和抗Sm两种抗体)的方法。其原理是于琼脂凝胶板成对打孔,将待测血清至阳极侧孔内,于电场中泳动20min,再于阴极侧孔内加ENA抗原.继续电泳30min,若待测血清中有相应的抗体存在,即可在两孔之间的适当位置形成沉淀线。据此来判断抗ENA抗体的有无。该法主要用于检测抗Sm和抗U1-RNP抗体,其优点是较琼脂糖扩散敏感、快速,可于2h观察结果。

(2)免疫印迹法:将ENA抗原进行聚丙烯酰胺凝胶电泳SDS-PAGE),使所含多肽抗原分离;再用电转印法将抗原转印于硝酸纤维素膜上。将待测血清与膜条上的抗原反应,用酶标记抗人IgG作为二抗,加酶底物溶液显色。根据膜条上显色区带的位置,参比阳性对照,即可判断有无某种抗ENA多肽抗体的存在。此法可一次检测抗Sm、抗U1-RNP、抗SS-A、抗SS-B、抗Jo-1、抗Scl-70和抗核糖体(Rib)等7种多肽抗体。

(3)间接免疫荧光法:实验基质多采用Hcp-2细胞或灵长类动物肝脏的冷冻切片,其原理可参看本章抗核抗体测定,分别出现各自特定的免疫荧光模式(表1)。

3.5 试剂

同间接免疫荧光法。

3.6 操作方法

同间接免疫荧光法。

3.7 正常值

正常人血清抗ENA抗体均为阴性

3.8 化验结果临床意义

抗Sm抗体和抗dsDNA一样,对SLE有高度特异性,且不论是否活动期,抗Sm均可阳性,可作为SLE的标志性抗体。但SLE患者中抗Sm阳性者仅占30%左右(20%~40%),故抗Sm阴性时不能排除SLE诊断,抗Sm抗体与临床症状和疾病转归之间的关系迄今尚无一致意见。抗U1-RNP自身抗体在多种风湿病患者血中均可检出,SLE患者的阳性率30%~50%;全身性进行性硬化症(PSS)25%~30%;皮肌炎10%~20%,类风湿性关节炎5%~10%,而在混合性结缔组织病(MCTD)患者,高滴度的抗U1-RNP抗体检出率可达100%,这些患者常无其他特异性的自身抗体。因此,高滴度的抗U1-RNP(尤其是高滴度的抗70kD)抗体被认为是MCTD的诊断标志。抗U1-RNP抗体(抗70kD)阳性与肌炎、食管动功能障碍、雷诺现象相关,但阳性患者多不发生肾炎。抗SS-A/Ro抗体与几种自身免疫病相关。最常见于干燥综合征(40%~95%的病例),也见于系统性红斑狼疮(20%~60%)及原发性胆汁性肝硬化(20%),偶见于慢性活动性肝炎。抗SS-B/La抗体几乎仅见于女性患者(29∶1),可出现在干燥综合征(40%~95%的患者)及系统性红斑狼疮(10%~20%)患者。在干燥综合征者中,抗SS-A/Ro抗体和抗SS-B/La抗体几乎总是同时出现。因此抗SS-A和抗SS-B又被认为是干燥综合征的标志性抗体。抗Scl-70抗体主要见于全身性进行性硬化症(PSS)中的弥漫型。是该病的标志性抗体,其阳性率25%~70%,在重型弥漫型硬皮病患者可高达75%,在CREST综合征患者抗Scl-70检出率仅4%~11%,此抗体阳性者抗着丝粒抗体多为阴性。局限型硬皮病患者,此抗体检出率很低,仅约20%。抗Jo-1对多发性肌炎(PM)和皮肌炎(DM)有一定价值;抗核糖体(Rib)抗体主要出现于SLE,有人认为也可作为SLE标志抗体,为狼疮活动的指标。系统性红斑狼疮(SLE)约50%具有抗ENA抗体,主要是抗Sm抗体,而混合结缔组织病者呈高频率,高效价的抗ENA抗体,主要是针对核糖蛋白。若用核糖核酸酶处理ENA,核糖蛋白即被酶解,而Sm抗原不受影响,所以系统性红斑狼疮仍保持阳性,而混合结缔组织病不再表现抗体活性。Sm抗原对SLE有特异性,对具有抗DNA抗体的患者,若同时具有抗ENA抗体,其预后较好。

3.9 附注

(1)在用对流免疫电泳法检测时,待测血清如含抗U1-RNP和抗Sm两种抗体,与ENA孔之间可出现两条沉淀线。靠近阴极侧的代表抗U1-RNP抗体,靠近阳极侧的代表抗Sm抗体。如只出现一条沉淀线。则需与阳性对照血清参比。以判定其性质。由于Sm抗原可耐56℃ 1h的处理。U1-RNP则否,故也可将ENA抗原加热处理后再与待测血清作对流免疫电泳,即可判定沉淀线性质。也有文献报道,应用核糖核酸酶处理U1-RNP。以区别抗Sm或抗U1-RNP抗体。

(2)免疫印迹法的优点是一次可同时检测7种多肽抗体,但其与对流免疫电泳法或琼脂双向扩散法比较,阳性率并无显著提高(主要原因是其作用的靶抗原多经过热变性处理,使得原先存在于分子表面的抗原表位发生了改变)。因此相应多肽抗体阴性,并不能排除某种风湿病的存在。

3.10 相关疾病

类风湿性关节炎、混合性结缔组织病、干燥综合征、系统性红斑狼疮、红斑狼疮肝硬化、硬皮病

相关文献

开放分类:化验及医学检查免疫学检查自身抗体测定
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  • 评论总管
    2019/9/17 19:38:34 | #0
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本页最后修订于 2013年2月23日 星期六 20:28:43 (GMT+08:00)
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