脊髓灰质炎病毒抗体

目录

1 拼音

jǐ suǐ huī zhì yán bìng dú kàng tǐ

2 英文参考

poliovirus antibodies

3 概述

脊髓灰质炎病毒(polioviurs)可引起脊髓灰质炎,又名小儿麻痹症。该病毒有3个血清型。脊髓灰质炎病毒的实验室诊断方法有病毒的分离鉴定、分子生物学方法和血清学诊断方法。病毒的分离鉴定虽是常用方法,但一般的临床实验室难以进行。分子生物学方法主要是PCR和核酸杂交。血清学诊断方法有中和试验、间接免疫荧光试验、反向间接血凝试验和ELISA方法等。

4 别名

anti-POV

5 脊髓灰质炎病毒抗体的医学检查

5.1 检查名称

脊髓灰质炎病毒抗体

5.2 分类

血清学检查 > 病毒的血清学检查

5.3 脊髓灰质炎病毒抗体的测定原理

病毒感染机体后,机体会产生针对该病毒的中和抗体。当含中和抗体的血清与病毒结合后,就使其失去感染细胞的能力,接种细胞后,细胞就不会被感染产生病变。据此可以检测出体内是否含有针对该病毒的中和抗体及其效价。

5.4 试剂

荧光显微镜;带孔载玻片;甘油;2/万伊文思蓝;Eagle液;小牛血清,0.01mol/L pH7.4 PBS;Vero或Hep-2细胞;脊灰Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型参考株;异硫氰酸荧光素(FITC)标记的脊灰Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型型特异的单克隆抗体。

5.5 操作方法

(1)抗原片(靶细胞)制备,将脊髓灰质炎病人标本20%大便悬液,分别编号,各号分别感染Vero或Hep-2单层细胞各1瓶,待CPE出现++~+++时,用刮取或酶胰消化法,收集细胞悬液于10ml离心管中,1000r/min,离心5min,PBS洗3次,最后悬浮至0.3~0.4ml PBS中,使细胞浓度为1~2×106个细胞/ml,取带孔载玻片,滴片,使每孔内含细胞均为5×104~1×105,每份标本(包括参考毒株)各涂3孔。对照细胞3孔。

(2)涂好的抗原片,置空气中自然干燥,冷丙酮固定10min,可立刻使用或-20~70℃保存备用。

(3)用2/万伊文思蓝,按工作浓度分别稀释Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ型FITC-McAb。每份标本分别滴加Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型FITC-McAb各1孔,置湿盒中,37℃孵育30min后用PBS洗3次,50%PBS甘油封片,荧光显微镜读结果。

(4)判定标准:应考虑荧光细胞的数目分布及亮度。荧光细胞多而闪亮++++;荧光细胞多而亮+++,荧光细胞亮度一般++;荧光细胞灰暗或朦胧+。

(5)凡那个型别荧光染色细胞出现++或以上者即判为该型病毒阳性,若有两个型或两个以上均出现荧光阳性染色细胞即为混合感染,对照成立。

5.6 正常值

阴性。

5.7 化验结果临床意义

中和抗体为IgG型,出现较晚。脊髓灰质炎病毒感染后,在发病后2~3周达高峰,1~2年内逐渐下降,持续时间很长,一直保持一定水平。恢复期与急性期抗体效价有4倍或4倍以上增长,可诊断。

5.8 附注

中和试验特异性高,但操作繁琐费时,一般临床实验室做起来有困难。

5.9 相关疾病

脊髓灰质炎

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