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精液LDH-X

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1 概述

LDH-X是精子细胞的一种特异酶,存在睾丸初级精母细胞、精子细胞、精子以及精浆中,以精子含量最高,它是精子糖代谢所必需的酶,为精子在生殖道运动提供充足能源。显然,LDH-X与精子的生成、代谢获能以至受精有密切关系。

2 精液LDH-X的别名

精液乳酸脱氢酶-X

3 精液LDH-X医学检查

3.1 检查名称

精液LDH-X

3.2 分类

体液排泄物检查 > 精液前列腺液检查

3.3 精液LDH-X的测定原理

正常精液内含有6种乳酸脱氢酶同工酶,其中LDH-X为精子特异性酶。利用LDH-X的特异底物2-酮基己酸,可测定出LDH-X活性,再用丙酮酸作为总LDH的底物,测定出总的LDH活性,即可求出LDH-X的相对比值和绝对比值。

3.4 试剂

(1)pH8.6巴比妥缓冲液离子强度0.06):称取巴比妥钠6.38g,巴比妥0.83g,混合加蒸馏水500ml。

(2)pH7.5磷酸缓冲液(0.1mol/L):称取磷酸二氢钾2.16g,磷酸氢二钠Na2HPO4·12H2O)30.13g,溶于蒸馏水中,并稀释至1L。

(3)0.5mol/L的乳酸钠溶液,吸取70%~80%DL-乳酸钠溶液7.42ml,加蒸馏水至100ml。

(4)显色试剂(临用前配制)

①1mg/ml PMS水溶液(避光)

②NAD10mg溶于pH7.5磷酸盐缓冲液1ml中。

③NBT 12mg放乳钵中研磨后,溶于pH7.5磷酸盐缓冲液中3ml。

(5)显色合剂

(6)2%醋酸溶液。

(7)洗脱液,正丙醇9份,二甲亚矾1份混合即可。

3.5 操作方法

(1)点样:将醋酸纤维素薄膜切成2.0cm×8.0cm大小,每份标本取两条,标明“甲”,“乙”,将乙条浸入在pH7.5的磷酸盐缓冲液中。将甲条浸在巴比妥缓冲液中,完全浸透后取出(大约2h),用滤纸吸干、于粗糙面距一端1.5cm处垂直点样(点样端靠阳极)。

(2)通电:电流0.6~1.2mV/cm宽,电压120~140V,电泳时间60min。

(3)显色:电泳结束前15min配制染色液,于中号平皿内。将浸透的乙条取出用滤纸吸干,放入染色液内。电泳毕后;先取出乙条,其光面向下放在干净的载玻片上,再取出甲条,迅速吸干两端缓冲液,将粗面向下,盖在乙条上。将此载玻片移入有盖瓷盘内,盘内放置用pH7.5的磷酸缓冲液泡过的纱布一块,以保持湿度,于37℃温箱中保温40min。可显出3~5条紫红色区带,从阳极开始,依次为LDH1,LDH2,LDH3,LDH4,LDH5。保温结束后将薄膜在2%醋酸溶液中漂洗3次,每次约1min,最后用滤纸吸干。

(4)定量:将已显色的“甲”、“乙”二条薄膜之各区带分别剪成小片置于试管中,每一试管中加洗脱液2.0ml,充分振摇,静止20min后再振摇1次,即可进行比色(用分光光度计波长490nm,以洗脱液校正吸光度到0点)。

3.6 正常值

LDH-X/LD>40%

3.7 化验结果临床意义

LDH-X活性和相对活性(LDH X/LDH)与精子浓度特别是活精子浓度呈良好的正相关,活性减低可致生育力下降。

睾丸萎缩精子生成缺陷及少精无精症患者,LDH-X活性相对降低或消失。这说明LDH-X活性与睾丸生精功能有关,是评价睾丸生精功能的良好指标。

3.8 附注

(1)LDH仅作用L-乳酸钠,只用DL-乳酸钠量一半即可。

(2)草酸盐抑制乳酸脱氢酶的活力,故不能用草酸钾作为抗凝剂的抗凝血来测定。

(3)如长期食用粗制株籽油可致精子生成障碍,甚至无精子生成。

3.9 相关疾病

精液检验

相关文献

开放分类:化验及医学检查体液和排泄物检查精液和前列腺液检查
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  • 评论总管
    2020/8/9 20:12:10 | #0
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本页最后修订于 2013年2月24日 星期日 14:05:20 (GMT+08:00)
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