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精氨基琥珀酸盐裂解酶

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1 概述

精氨基琥珀酸盐裂解酶尿素合成代谢过程中产生的一种酶,其在肝中含量最丰富,少量存在于小肠肾脏。当肝脏发生病变时,精氨基琥珀酸盐裂解酶即可随肝细胞破坏进入血液。目前认为诊断肝炎时测定精氨基琥珀酸盐裂解酶的意义与转氨酶相当。

2 精氨基琥珀酸盐裂解酶的别名

精氨酰琥珀酸裂解酶, ASAL

3 精氨基琥珀酸盐裂解酶的医学检查

3.1 检查名称

精氨基琥珀酸盐裂解酶

3.2 分类

血液生化检查 > 酶类测定

3.3 化验取材

血液

3.4 精氨基琥珀酸盐裂解酶的测定原理

以精氨酰琥珀酸作基质,在一定的反应条件下,血清中的精氨基琥珀酸盐裂解酶作用于基质,产生精氨酸和反丁烯乙酸。加入三氯乙酸,停止酶反应,同时沉淀蛋白,测定无蛋白滤液中精氨酸的量,来测知酶的活力。

3.5 试剂

(1)磷酸盐-EDTA缓冲液(0.1mol.L磷酸盐,0.1mol/L EDTA,pH7.0):取磷酸二氢钠(NaH2PO4·2H2O)31.2g,和乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na2)58.4g,加蒸馏水约500ml溶解,用2.5mol/L氢氧化钠液校正pH至7.0加蒸馏水释至1000ml(存于冰箱中)。

(2)基质液(精氨酰琥珀酸4mmol/L):称取精氨酰琥珀酸钡盐(分子量493.7)50mg,溶于4ml蒸馏水中,加0.35mol/L硫酸钠1ml,混匀后,放置1/2h后离心,吸取上清液。每ml上清液加4ml磷酸盐-EDTA缓冲液,混匀即可使用(冰箱存1周)。

(3)20g/L胸腺嘧啶溶液:称取胸腺嘧啶2g,用2.5mol/L氢氧化钠溶液溶解并稀释至100ml(存于冰箱中)。

(4)0.6g/L 2,4-二氯萘酚溶液:称取2,4-二氯萘酚 60mg,加95%乙醇溶液溶解,并稀释至100ml(存于冰箱中)。

(5)胸腺嘧啶-2,4-二氯萘酚溶液取“3”和“4”等量混合(临用现配)。

(6)次氯酸钠溶液:取安替福民(有效氯5.25%)60ml,加蒸馏水至500ml(存于冰箱中)。

(7)2.5mol/L氢氧化钠水溶液。

(8)0.6mol/L三氯乙酸水溶液。

(9)精氨酸标准液(1mmol/L):称取L-精氨酸17.42mg,于100ml量瓶中,加0.1mol/L盐酸溶液溶解并稀释至刻度(存在于冰箱中)。

3.6 操作方法

按表1操作。

每加一试剂混匀后再加第二试剂,放入冰浴中15min后用515nm波长立即比色,用空白管调吸光度至“0”点,读取测定管的吸光度,在标准曲线上查出ASAL活力单位。

放入冰浴中15min,用515nm波长比色,用1号管调吸光度至“0”点,分别读取各管吸光度,与其相应浓度制图,绘成标准曲线。

3.7 正常值

(1)酶速率法(37℃):0~50U/L

(2)比色法: 0.2~5.3U

3.8 化验结果临床意义

精氨酸琥珀酸裂解酶,是尿素合成代谢中的一种酶,肝脏中含量丰富。当肝脏发生病变时,随肝细胞破坏ASAL就进入血液,所以,此酶测定较转氨酶测定对肝脏疾病有较高的特异性。有助于诊断急慢性肝炎,尤其是HBsAg阳性ALT升高不显著的病人,作出早期诊断有较大价值。

3.9 附注

(1)此方法温度高,显色差;温度低,显色好。因此,应保持在一定低温度下操作,如无冰浴条件,可在20℃以下室温下操作,但重复性差,每次应作标准管计算结果。

(2)比色前应用力振摇,要在半小时内比色完毕,否则将影响测定结果。

(3)此酶低于pH6.4,高于pH70,活力都下降,所以,每次基质液应保持pH70。

相关文献

开放分类:血液生化检查化验及医学检查酶类测定
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参与讨论
  • 评论总管
    2019/10/23 3:53:20 | #0
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