1 拼音
jiǎ zhuàng xiàn sù jié hé qiú dàn bái
2 英文参考
thyroid binding globulin
TBG
3 概述
甲状腺素结合球蛋白（thyroxine-binding globulin，TBG）是有四个亚基构成的酸性糖蛋白，由肝脏合成，分子量为60kD。TBG是甲状腺激素在血液循环中的主要载体蛋白，对甲状腺激素的贮存、运输、代谢以及维持甲状腺激素的浓度和游离甲状腺激素的动态稳定，均具有重要的作用。
4 甲状腺素结合球蛋白的医学检查
4.1 检查名称
甲状腺素结合球蛋白
4.2 分类
激素类测定 > 甲状腺激素测定
4.3 甲状腺素结合球蛋白的测定原理
血清中的甲状腺素结合球蛋白（TBG）和Eu3＋标记TBG共同竞争性的与限量特异抗体结合。以第二抗体IgG包被活化微量滴定条作为固相分离剂。样品中的TBG越高，则特异性抗体和Eu3＋标记TBG结合就越少。反之，血清TBG降低，则特异性抗体结合Eu3＋标记TBG的量就增多。故样品孔的荧光强度和待测物浓度呈反比。
4.4 试剂
（1）TBG的提取和纯化：取适量T4溶于少量0.1mol/L KOH液中，即刻滴加到活化琼脂糖珠4B悬液中（2mg T4/ml珠）。放4℃过夜，次晨加20倍体积0.1mol/L NaHCO3液抽滤，除去剩余T4。
将正常血清100ml加至烧杯中，加入25ml T4-琼脂糖珠4B混合，室温搅拌反应过夜，静置待4B珠下沉，倾去上清液。用400ml 0.1mol/L NaHCO3洗涤。然后装1.5×30cm柱，用NaHCO3液平衡柱床至流出液至280nmA值最低时，改用2mmol/L KOH液淋洗。紫外检测，将蛋白峰合并，浓缩。对60mmol/L pH8.6 Tris-NaCl透析48h。将提取物液和适量125I-T4混合加至预先经60mmol/L pH8.6-Tris-NaCl平衡DEAE-Sephadex A-50柱中。用相同缓冲液加NaCl梯度淋洗。收集NaCl浓度为0.2mol/L流出液。用γ计数。合并紫外280nm蛋白峰。经SDS-聚丙烯酰胺圆盘电泳为单一区带。浓缩干燥。即得纯化TBG，供免疫动物，标准品和Eu3＋标记用。
（2）固相第二抗体制备：将羊抗小鼠血清IgG抗体，经盐析和DEAE-纤维素柱层析提取IgG。用50mmol/L pH9.6碳酸盐缓冲液配制成50μg/ml，包被预先用戊二醛处理的微量滴定条。倾出IgG液于清洁瓶中。将条洗涤2次，每孔加10%戊二醛液200μl，室温下放1h，倾出戊二醛液，将滴定条放37℃干燥，重新用原IgG液包被1次，以提高包被固相抗体IgG的量。向每孔加20g/L BSA液200μl，室温放置4～6h，洗涤两次，装入塑料内，密封，放4℃冰箱保存。
（3）TBG的Eu3＋标记：取纯化TBG 2mg溶于0.5ml 0.25mol/L NaHCO3液中，加入Eu3＋-[对-异硫氰酸苯基]-DTTA螫合剂350μg，用0.25mol/LNaOH液调至pH8.5～9.0，放4℃冰箱反应过夜。次晨将反应液经Sephadex G-50柱分离，紫外280nm检测，收集蛋白峰。测工作液稀释度和标记比活性。加入保护蛋白和防腐剂，分装，放－20℃保存。
（4）试验缓冲液：50mmol/L pH7.6PBS，每1000ml中加白明胶1g，NaN3 0.5g，DTPA8mg，Tween20 0.2g。
（5）抗TBG单克隆抗体：用试验缓冲液按预先所测得的工作液滴度稀释。
（6）标准TBG液：取纯化TBG经高纯度标准品（Pharmacia公司提供）标定。用试验缓冲液配制成2，5，10，20，40，80mg/L。放－20℃保存或冷冻干燥临用前溶解。
4.5 操作方法
（1）将固相第二抗体微量滴定条用洗涤液洗2～3次。S0孔加缓冲液25μl，S1～6孔加入相对应不同浓度标准TBG 25μl，样品孔加待测血清25μl，均作双孔。
（2）向每孔加稀释Eu3＋-TBG液75μl，稀释抗TBG单克隆抗体100μl。室温下置微量滴定板振荡器上反应3h。
（3）倾去反应液，用自动微量滴定板冲洗器（LKB Wallac产品）洗10次。向每孔加增强液200μl。置振荡器上15min。静置15min后在时间分辨荧光计上测量。按预先制的程序，以S0孔的CPS为B0，各S管的CPS为B0所划出的标准曲线是B/B0为纵坐标，标准TBG浓度为横坐标（对数）。并直接打印出待测血清中TBG的浓度。
4.6 正常值
男：17±3.3μg/L；女：17.6±3.9μg/L。
4.7 化验结果临床意义
（1）甲亢患者血清TBG水平明显降低，病情缓解后，TBG可逐渐上升至正常水平。
（2）甲减时，TBG降解速率减慢，血中TBG浓度可明显升高，可随病情的缓解而逐渐下降。
（3）先天性高TBG血症和遗传性TBG缺乏症可出现TBG升高或降低。
（4）严重的肝脏疾病，由于TBG合成和释放增多而出现血中TBG增高。肢端肥大症、严重的糖尿病或营养不良等疾病血中TBG多降低。
（5）雌激素、糖皮质激素等多种药物均可影响血清TBG的水平，出现TBG升高或降低。
4.8 附注
TBG与T4亲和作用较T3强。
4.9 相关疾病
肢端肥大症、糖尿病