红细胞乳酸生成率

目录

1 拼音

hóng xì bāo rǔ suān shēng chéng lǜ

2 英文参考

The erythrocyte lactate production rate

3 概述

乳酸在体内的增加主要是血氧的缺乏,导致三羧酸循环中丙酮酸需氧氧化障碍,糖酵解速度增加,即丙酮酸还原成乳酸的速度增加,血中乳酸与丙酮酸比值增高及乳酸增加。出现高乳酸血症。乳酸的测定一般用全血乳酸分光光度法或血浆乳酸的比色法。

4 红细胞乳酸生成率的医学检查

4.1 检查名称

红细胞乳酸生成率

4.2 分类

血液生化检查 > 酶类测定

4.3 化验取材

血液

4.4 红细胞乳酸生成率的测定原理

在NAD存在下,LDH催化乳酸,氧化成丙酮酸。加入硫酸肼捕获产物丙酮酸,并促进反应完成。反应完成后生成的NADH与乳酸为等摩尔,在340nm波长下测定NADH的量,计算乳酸的含量。

4.5 试剂

(1)50g/L偏磷酸(MPA):称取5.0g MPA,溶于蒸馏水中,并稀释到100ml,新鲜配制。

(2)30g/L偏磷酸:称取3.0g MPA,溶于蒸馏水中,并稀释到100ml,新鲜配制。

(3)Tris-硫酸肼缓冲液,pH9.6(Tris 79mmol/L;硫酸肼400mmol/L):取1mol/L氢氧化钠350ml,加入Tris 4.79g,硫酸肼26g,EDTA Na20.93g,以1mol/L氢氧化钠调至pH9.6,用蒸馏水稀释到500ml,4℃保存可稳定8天。

(4)27mmol/L NAD溶液:根据需要量称取NAD溶于蒸馏水中,4℃可稳定48h。

(5)LDH溶液:取LDH原液,用生理盐水稀释成1500U/ml(如用SigmaⅢ型LDH,该制品从牛心提制,每ml含10mg蛋白,每mg蛋白具有LDH活性400~600U,用盐水稀释成3mg/ml蛋白即可,如按南京军区总院检验科报道方法①,约为1600U/ml,不稀释直接使用;

(6)1mmol/L(9.08mg/dl)乳酸标准液:精确称取L-乳酸锂9.6mg(或DL-乳酸锂19.2mg),以少量蒸馏水溶解,加入25μl浓硫酸,用蒸馏水稀释到100ml,4℃保存可长期稳定。

4.6 操作方法

按表1进行。

混匀,置室温15min后,用分光光度计在340nm波长,以空白调零,读取各管吸光度。

4.7 正常值

全血乳酸0.5~1.7mmol/L(5~15mg/dl)。血浆中乳酸含量约比全血中含量高7%。脑脊液乳酸含量与全血接近,但中枢神经系统疾病时可独立改变。24h尿液排出乳酸量为5.5~22mmol。

4.8 化验结果临床意义

乳酸为体内血氧缺乏时的糖酵解产物,无论是循环衰竭还是呼吸衰竭,都有可能造成危及生命的乳酸中毒症。此时血中乳酸通常超过7mmol/L,甚至高达25mmol/L,有资料表明在高乳酸血症中,乳酸水平低的存活率达65%,而乳酸水平>10.5mmol/L存活率仅30%。

4.9 附注

(1)偏磷酸一般是由偏磷酸(HPO3)及偏磷酸钠(NaPO3)组成的易变混合物。偏磷酸在水溶液中形成各种多聚体(HPO3x。氢离子催化此多聚体,水化成正磷酸(HPO3+H2O→H3PO4)。正磷酸不沉淀蛋白质,偏磷酸溶液沉淀蛋白的能力在4℃时仅能维持大约1周。

(2)本法线性范围达5.6mmol/L(50mg/dl)。

(3)本法不用过氯酸作蛋白沉淀剂,过氯酸不能沉淀粘蛋白,干扰丙酮酸的酶法测定(若需用同一滤液作丙酮酸测定),使LDH的酶促反应变慢。

(4)一般乳酸锂未标明L-或DL-者,均为DL-型,L-型乳酸锂价格昂贵。

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