1 拼音
hóng xì bāo bǐng tóng suān jī méi
2 英文参考
Erythrocyte pyruvate kinase
3 概述
红细胞酶在调节红细胞代谢中起重要作用。PK是细胞溶酶体中的一种转移酶，酶缺乏导致能量供应减少，红细胞寿命缩短引起溶血性贫血等。
4 红细胞丙酮酸激酶的医学检查
4.1 检查名称
红细胞丙酮酸激酶
4.2 分类
血液生化检查 > 酶类测定
4.3 红细胞丙酮酸激酶的测定原理
丙酮酸激酶在ADP存在下能催化磷酸烯醇式丙酮酸（简称PEP）产生丙酮酸，再由乳酸脱氢酶（简称LDH）将其转变为乳酸，同时将NADH变为NAD。其反应式如下：
4.4 试剂
（1）Tris-HCl 1mol/L：EDTA 5mmol/L DH8.0溶液。取12.1g Tris和168mg EDTA-Na2放在烧杯中，在室温下，用接近80ml的蒸馏水溶解，用浓盐酸凋pH至8.2（约用5ml浓HCl）再用2mol/L HCl调节pH至8.0。将混合液移至100ml容量瓶中，加蒸馏水至100ml。
（2）1mol/L：KCl（MW 74.55）称7.46g KCl溶解至100ml。
（3）0.1mol/L：MgCl2（MW 203.31）称MgCl22.033g加蒸馏水溶解至100ml。
（4）30mmol/L：ADP（MW 529.2）精称8mg溶解在0.5ml蒸馏水中。
（5）50mmol/L：PEP（MW 465.3）精称23.3mg溶在1ml蒸馏水中。
（6）60u/ml：LDH取1880u/ml LDH 330μL用β-疏基乙醇EDTA稳定液稀释到1ml。
（7）100g/L：EDTA溶液（中性）称10g EDTA加蒸馏水至100ml，取1mol/L NaOH调节pH到7.0。
（8）NADH：2mmol/L、MW 709.4纯度100%精称1.42mg溶于1ml蒸馏水中（现用现配）。
（9）β-疏基乙醇-EDTA稳定液取5μl：β-疏基乙醇加1ml 10%EDTA，用蒸馏水稀释至100ml。
（10）溶血液的制备：取3ml肝素抗凝血，放置4℃冰箱使其自然沉降，吸弃血浆、白细胞、血小板部分，用冷生理盐水洗涤红细胞3次，离心速度1000r/min，5min，再用冷生理盐水配成50%红细胞悬液。
（11）1∶20溶血液：取50%红细胞悬液0.2ml，加1.8ml β疏基乙醇-EDTA稳定液，此液需测Hb浓度。
4.5 操作方法
见表1。
在波长340nm，37℃下测定15min内吸光度下降的差值，如无恒温装置，可先测一个最大A值，孵育反应液37℃15min再测A值两者相减，计算酶活力，按下式计算：
式中E：每克HB酶活性，国际单位。
A：每毫升反应液的酶单位。
Hb：每100ml溶血液中Hb含量，以克表示。
VC：比色杯容积。
VH：反应系统中红细胞溶血液体积。
△A：在340nm每分钟的吸光度变化（以测得A值之差除以15min）。
6.22：1mol/L NADH溶液的最佳吸光度。
4.6 正常值
60名正常人测定结果，红细胞PK正常值15.1±4.99u.g Hb，与国际血液学委员会红细胞PK15.0±1.99u/g Hb相近，本组35名男性（20～46岁）红细胞PK＝15.0±4.02u/g Hb，25名女性（20～50岁）为15.9±4.4u/g Hb，成人男女无显著差别（P＞0.05）。
4.7 化验结果临床意义
丙酮酸激酶（PK），是红细胞葡萄糖无氧酵解途径中三个限速酶之一，直接关系着红细胞能量代谢，此酶缺乏属常染色体隐性遗传，可导致非球形红细胞溶血性贫溶血性贫血，在人类红细胞酶缺陷病人中，PK缺乏的发病率仅次于G-6-PD缺乏，属第二位，它也可继发于部分的骨髓增生异常综合征MDS，白血病及再生障碍性贫血的病人，我们已测定到5例先天性非球形红细胞溶血性贫溶血性贫血病人（原因不明），1例MDS（后转为白血病）1例急性多颗粒早幼粒细胞白血病，1例慢性粒细胞白血病均为PK活性缺乏。
4.8 附注
（1）因白细胞、血小板、网织红细胞影响红细胞PK活性测定，即使在红细胞PK缺乏亦是如此。此须尽可能从红细胞悬液中除去。
（2）血液标本需新鲜，若以4℃贮存进行测定，不得超过3天。最好是需带正常对照。
（3）试剂纯度要保证，有的试剂要求新鲜配制，孵育时间、温度、试剂pH要准确。
（4）我们根据国际血液学标准委员会推荐的方法稍加改良，建立PK定量测定方法。
4.9 相关疾病
溶血性贫血、骨髓增生异常综合征、再生障碍性贫血