名称
英文名
Lymphocyte System
化验取材
骨髓
化验方法
骨髓检查
化验类别
骨髓细胞学检查、骨髓检查
概述
骨髓有核细胞分类计数是分析骨髓中各主要造血系统细胞的比例，以及被检查时同一系统造血细胞所处的各个发育阶段比例是否正常。
原理
采用骨髓小粒丰富，制片厚薄均匀的涂片，经瑞氏-姬姆萨混合染色后于显微镜下检查细胞质和量的变化。
试剂
（1）瑞氏染色液：瑞氏染粉1g，置洁净干燥的研钵内，加甘油3～5ml，研磨片刻，使瑞氏染粉充分溶解，加甲醇约50ml，继续研磨片刻后，收集上层染液；残余部分再加甲醇50ml研磨，再收集上层染液，重复几次后，用甲醇冲洗研钵，倒入同一瓶内，最后加甲醇至500ml。开始几周应经常振摇染色液。染色液存放的时间越长，染色效果也越佳。此外，研磨时染粉内应先加甘油，以免染粉在研磨过程中结成块，更易溶解。染粉未经研磨配成的染液不宜用作骨髓片染色。
（2）姬姆萨浓缩染液：将姬姆萨染粉3.8g放入纯甘油250ml中，置60℃水浴2h，溶解后加60℃预热的甲醇250ml混匀，于室温，棕色瓶内保存，配后数天即可使用，可长期保存。
（3）pH6.5磷酸盐缓冲液：磷酸二氢钾1.5g，磷酸氢二钠1.0g，加蒸馏水到5000ml。最后纠正pH6.5。
（4）姬姆萨稀释液：取姬姆萨溶液50ml，加pH6.5磷酸盐缓冲液到500ml，混匀。此液为姬姆萨应用液，可直接作涂片复染用。作瑞氏稀释液时，取此液10～20ml加蒸馏水至100ml，混匀即可。
操作方法
（1）骨髓取材：取材部位有胸骨、棘突、髂骨前嵴或后嵴等。两岁以内小孩最好用胫骨，成人常取髂后上棘，此部位穿刺方便，病人也易接受。穿刺前要求严格消毒，杜绝细菌感染，除穿刺室紫外线消毒和皮肤消毒外，还应注意穿刺包和手套消毒时间有否过期。戴手套要熟练，避免手套接触未消毒物品。穿刺针进入髓腔时常有脱空感，吸取前针筒内应留有1ml左右的空隙，否则髓液很快进入针筒空隙而无法取出。针筒内若有水份也要用消毒纱布擦干，以免溶解细胞。吸液量一般控制在0.2ml左右，因吸量过多，易被外周血稀释。部分病人干抽或吸出量太少时，不要将针头立即拔出，可边抽边调节针头深浅，或边抽边缓慢外移针头，最后将针头内可能残留的髓液尽量推出、制片，以减少病人痛苦。
（2）涂片：骨髓取出后应立即注在一块斜放的玻片上，使多余的外周血自然下流，用推片刮取上部较多小粒的髓液在另一干净玻片上推片。玻片最好事先经稀硝酸液浸泡后用水冲洗，然后用蒸馏水浸泡，应避免用铁锈的烤箱烘烤或用铁丝筐盛放，以减少由铁剂污染而造成的铁染色假阳性。同时，做过细菌检查的玻片，最好不要再用于骨髓片检查。
（3）染色：选两块小粒较多、厚薄均匀的骨髓片，自然干燥后在较厚的头端髓膜上写上病人姓名、日期及“BM”标记。加瑞氏染色液8～12滴，用吸球吹吸并使其布满整张涂片，约半分钟后加姬姆萨稀释液5～10滴，再用吸球吹吸气，使两液充分混匀，若有金黄色油膜出现，染色效果更佳。染色时间一般为10～20min，夏天可缩短些、冬天则可延长些。冲洗时应平放玻片让流水缓慢冲洗。另外，因手拿玻片处可能会有染料残留，应更换手拿位置再予冲洗。染色太淡的涂片，可用姬姆萨稀释液复染3min；着色太深时，可用瑞氏染液滴加于涂片上，立即冲洗即可。各实验室最好能摸索出自己的染色经验，尽量做到一次性染色成功。没有姬姆萨染液的单位，可用蒸馏水加少量天青（或美蓝）代替，但染色效果没有前者好。染好的涂片要自然干燥，切忌加热烘干，否则细胞退色而影响观察。
正常值
原淋巴细胞：0～0.004 （0～0.4%）
幼淋巴细胞：0～0.021 （0～2.1%）
淋巴细胞： 0.107～0.431 （10.7%～43.1%）
化验结果临床意义
增多：急性淋巴细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病、传染性单核细胞增多症、传染性淋巴细胞增多症、百日咳等。急性淋巴细胞白血病以原和幼淋巴细胞增生为主，其余各病例以成熟淋巴细胞增多为主，但有程度和细胞形态的差异，慢性淋巴细胞白血病以淋巴细胞增多显著（50%以上），而上述传染性疾病的淋巴细胞增多不显著。
附注
（l）正常人骨髓中各类造血细胞比例比较固定，一般粒细胞系统占65%，红细胞系统占20%，淋巴细胞系统占15%，尚可看见单核细胞、巨核细胞和其他一些骨髓细胞。而各系统血细胞中的原始阶段细胞极少，无论什么年龄、什么系统的血细胞其原始阶段的细胞都不会超过5%，以成熟阶段细胞所占的比例最高。
（2）由于骨髓抽取的部位不同，人群种族的不同、年龄的不同等，正常人骨髓有核细胞分类计数存在一定的差异。
相关疾病
百日咳、传染性单核细胞增多症、传染性淋巴细胞增多症、急性淋巴细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病
参考资料
《新编临床检验与检查手册》、《新编化验员工作手册》
联系 编辑QQ群：8511895 （不接受疾病咨询）