苷-胆酸

目录

1 拼音

gān -dǎn suān

2 英文参考

Cholyglycine

3 概述

甘氨胆酸简称甘胆酸(Cholyglycine,CG),是胆酸与甘氨酸在肝内合成的结合胆酸,是主要的胆酸成分之一,其含量变化在肝脏病诊疗中具有重要价值。

4 英文名

Cholyglycine

5 苷-胆酸医学检查

5.1 分类

血液生化检查、脂类测定

5.2 原理

(1)乙醇提取法(RIA)法:胆酸是一种甾体类化合物,缺少可供磺化标记的基团。需要对结构进行修饰,制成甘胆酸一组胺结合物,将125I标记到组胺分子上。血清中的CG和血浆蛋白相结合,加乙醇使蛋白变性而分离。样品中的甘胆酸和标记物在缓冲溶液中竞争性与抗体结合,根据竞争抑制的基本原理,从标准曲线上求得血清CG浓度。

(2)直接测定法(RIA)法:血清中的甘胆酸绝大部分和蛋白质相结合,向反应液中加一定量的δ-苯胺-1-萘磺酸(ANS)使结合的甘-胆酸解离成游离状态,然后与标记物共同竞争性的和抗体结合。从标准曲线直接查得血清中的CG值。

5.3 试剂

(1)乙醇提取法(RIA)法:

①缓冲液:取0.2mol/L pH7.4 PB100ml,加NaCl 18.5g,明胶(Sigma公司产品)1g,NaN3 1g,加蒸馏水至1000ml,放37℃至溶后放4℃贮存。

②标准液:取甘胆酸,用无水乙醇配制成100nmol/L。临用前用80%乙醇稀释至0.1、0.2、0.5、2.0、5.0μmol/L。

③PR分离剂。

(2)直接测定法(RIA)法:

①缓冲液:同上法。

②标准液:取正常混合血清,经乙醇提取法测定血清中的甘胆酸浓度,然后向其中加入标准甘胆酸或用20g/L BSA液稀释,使浓度为0.5、2.0、5.0、15、30μmol/L。分装每瓶0.25ml,冷冻干燥。4℃保存,临用前加0.25ml蒸馏水溶解。

③2g/L ANS液:取ANS 1g溶于500ml缓冲液中。

④抗血清:制备方法同上法,按可供测100管量分装,冷冻干燥,4℃保存。临用前加缓冲液22ml溶解。

125Ⅰ-组胺-甘胆酸:按每瓶74kBq/100μl分装,4℃保存。临用前加ANS液11ml。

⑥PR分离剂。

5.4 操作方法

(1)乙醇提取法(RIA)法:

①取血清0.1ml,加无水乙醇0.4ml,充分混合,离心(3000r/min)5min。

②取10mm×75mm塑料管,按表1加入样品和试剂。

③加入PR分离剂后,混合,放37℃水浴30min,离心(3500r/min)15min,弃去上清液,在自动γ免疫计数器上测放射性。

④以B/B0Log或B/B0%为纵坐标,标准液浓度(μmol/L)为横坐标绘制标准曲线。从标准曲线上查得样品μmol/L,再乘5即得血清中甘胆酸浓度μmol/L。

(2)直接测定法(RIA)法:

①取10mm×75mm塑料试管,按表2加入样品和试剂。

②加入PR分离剂后混合,放37℃ 30min。离心15min,弃去上清液,测沉淀物的放射性强度。

③以B/B0%对标准液浓度绘制标准曲线,依测定管的B/B0%从标准曲线上直接读出血清中甘胆酸μmol/L。

5.5 正常值

乙醇提取法(RIA)法:

空腹    男2.17±1.23μmol/L

女2.18±1.04μmol/L

餐后2h  男3.79±1.90μmol/L

女3.39±1.29μmol/L

5.6 临床意义

(1)反映肝细胞损伤的敏感指标:急性肝炎、慢性活动性肝炎、肝硬化及原发性肝癌患者血清CG均明显升高,其阳性率均在80%以上,依次为急性肝炎>慢性活动性肝炎>原发性肝癌>肝硬化>慢性迁延性肝炎。当弥漫性肝损伤时,血清CG水平与肝脏病变范围及程度密切相关。急性肝炎、慢性活动性肝炎及重症肝炎患者,由于肝细胞广泛变性坏死,血清中CG与ALT同时升高,但以血清CG升高更敏感,升高幅度更大。11例肝功能正常或基本正常的混合性肝硬化,肝性腹水患者13例次血清CG检测值为10855~66328μg/L。阳性率为100%。Mannes报道,29例经病理或手术证实的ALT正常的肝炎后肝硬化患者空腹及餐后血清CG阳性率分别为93%和97%,而其余肝功能试验的阳性率在69%以下。张建军等报道272例肝胆疾病患者血清CG含量均明显高于对照组,急性肝炎、慢活肝、肝硬化、肝癌时阳性率均在90%以上,慢迁肝、肝炎恢复期及胆道疾病阳性率在60%以上,CG的敏感性显著高于常规肝功能试验。肖波等报道,肝炎后肝硬化患者和原发性肝癌患者血清CG含量的异常率明显高于常规肝功能试验。以上结果均表明,血清CG是反映肝损伤的敏感指标。急性肝炎肝功能指标的相关性研究发现,血清CG的变化与ALT、GGT和血清总胆红素呈正相关,但血清CG的恢复较ALT和血清总胆红素为迟,显示在反映残存病变方面血清CG优于ALT、血清总胆红素。丙型肝炎患者虽然症状较轻,但肝细胞的超微结构已经改变,这些改变常规肝功能试验不能检出,只有测其血清CG才能显示。

近年来众多学者认为,餐后2h测定CG较空腹时更敏感。当肝脏摄取CG或清除CG功能轻度下降时,空腹CG可能正常。但餐后2h肝脏负担最大。易发现血清CG升高,故检测其值更有意义。空腹与餐后血清CG相关性研究发现,空腹血清CG阳性率为32.1%,餐后则高达67.9%(P<0.01),21例空腹血清CG正常和稍高者,试餐后有12例增高。因此,对空腹CG正常或接近正常的可疑患者,宜进行餐后CG测定,可提高轻型肝病的检出率。

(2)用于急性肝炎的病情观察及预后判断:急性黄疸型肝炎患者,黄疸期ALT与血清CG阳性率均为100%;恢复期常规肝功能指标多恢复正常,ALT转阴率为97.87%,而CG仅为46.67%,二者间有显著性差异。50%以上的急性肝炎患者常规肝功能试验恢复正常,ALT转为阴性作为治愈出院者,而CG仍高于正常,提示肝脏仍有实质性损伤。因此有必要将血清CG是否恢复正常作为治愈出院的标准。根据血清CG进行适当调整或定期随访观察,有助于急性肝炎的病情监测。多数资料显示。急性肝炎患者在其恢复过程中CG持续升高,提示预后不良,有发展为慢性肝炎的可能,尤其在乙型肝炎中更为常见。

(3)判断慢性肝炎的活动程度及鉴别诊断:慢性迁延性肝炎患者,常规肝功能指标及组织学检查均未明显异常改变,而CG升高可作为肝炎活动或复发的早期敏感指标。有资料报道,慢性肝炎病情稳定持续缓解组(A组)及停药后复发组(B组),当组织学检查无肝炎活动证据时,A组血清CG在正常或正常值的2倍以下,而B组大部分在正常值的2倍以上。说明血清CG可提示疾病缓解抑或复发。动态观察显示,疾病复发时血清CG升高先于ALT升高。因此,血清CG测定是监测慢性肝炎的较好指标,并可避免肝活检的创伤性检查。慢性活动性肝炎CG的增高程度和频率均明显高于慢性迁延性肝炎,故血清CG测定有助于二者的鉴别诊断。乙醇性肝病患者由于肝细胞摄取和排泄功能受影响较少,无论空腹或餐后血清CG均正常,而GGT则因位于肝细胞浆中的微粒体部分而显著升高,反映了光面内质网的增生,这对鉴别乙醇性肝病有一定价值。急性黄疸型戊型肝炎患者空腹血清胆汁酸均有不同程度的升高,但升高的幅度较急性黄疸型乙型肝炎为低。因此,检测急性期空腹胆汁酸,对病毒性肝炎的病原分型可能有价值。

(4)判断肝硬化的预后:Mannes等对76例肝硬化患者随访1年,以比较临床和实验室检查以及按Child分级与血清CG含量对肝硬化预后的意义,发现各项指标中,血清CG是预测肝硬化预后的最好指标。按患者血清CG升高程度分类,对肝硬化死亡率的预测与Child分类法结果相似。胡懋琳等报道,肝硬化患者血清CG含量与Child分级呈显著正相关,与血清白蛋白呈显著负相关。任成山等对106例肝硬化患者血清CG含量测定,并随访1年,依血清CG含量升高的程度,对病死率预测与Child分级比较。血清CG<10μmol/L提示预后良好,45例中仅5例(11.1%)于1年内死亡,与Child A级的25例中2例(8.0%)死亡相近。血清CG>20μmol/L则预后较差,32例中有22例(68.8%)在1年内死亡,近似于Child C级的33例有24例(72.9%)死亡。用Logistic同归分析对血清CG和Child分级的11个变量进行多元分析,只有血清CG最有统计学意义(P<0.001)。这可能是由于胆酸升高与肝功能衰竭的关系比其他指标更为密切。张建民等对40例肝硬化患者血清CG含量进行了检测及1年的预后随访,发现血清CG与HA一样在判断肝硬化预后方面确实优于GGT、AKP及白蛋白,血清CG浓度高则预后差,死亡组与生存组之间有显著差异。因此,血清CG测定是判断肝硬化预后的良好指标。

(5)反映肝脏病的严重程度:Ferracis报道血清CG和ALT对严重肝脏病的特异性和敏感性无显著性差异。章华础等进一步研究发现,急性肝炎和重症肝炎血清CG的阳性率均为100%,而ALT的阳性率分别为73.7%和50%,不仅证明血清CG测定对严重肝病的诊断优于常规肝功能试验,且在临床上起到决定作用。Jara对病理证实的慢性持续性肝炎检测结果显示,常规肝功能的阳性率在8%~72%之间,而血清CG的阳性率达100%,且重症肝炎血清CG升高幅度明显高于ALT。

(6)其他疾病:原发性肝癌(PHC)患者AFP和CG的阳性率分别为78.3%和85.8%,表明血清CC对PHC的诊断具有重要价值。胆石症患者CG明显升高,可为正常的50倍,一般认为单纯

5.7 附注

测定苷氨胆酸与苷鹅脱氧胆酸的比值可能具有诊断价值,因为约80%肝细胞疾病患者该比值<1,而80%胆汁郁积性疾病患者该比值>1。

5.8 相关疾病

GT、丙型肝炎、胆囊结石、胆石症、腹水、肝癌、肝损伤、肝硬化、黄疸、原发性肝癌

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